公开(公告)号：CN110643566B

公开(公告)日：2022-09-02

申请号：CN201911018183.9

申请日：2019-10-24

Applicant: 福建省农业科学院水稻研究所

Inventor： 张建福 ,  谢云杰 ,  何炜 ,  姜身飞 ,  谢华安

IPC: C12N5/04 ,  C12N15/82

Abstract: 本发明公开了一种水稻原生质体分离与转化方法。涉及原生质体分离转化技术领域。分离方法为取水稻苗茎部和叶片制备成薄片，酶解，过筛，弃滤液，留残存的薄片；将酶解后残存的薄片用W5溶液洗脱回收，震荡，过筛收集滤液，将收集的全部滤液混合，离心，弃上清，得沉淀，和W5溶液重悬，离心弃上清，和MMg溶液混合。转化方法为将目标载体和原生质体悬浊液混匀，和PEG混匀，水浴，和W5溶液混合，并终止反应，离心，弃上清，再和W5溶液混合，转到入细胞培养板，避光培养。本发明能够较好地获得高质量水稻原生质体，并将其应用于后续研究。

公开(公告)号：CN110643566A

公开(公告)日：2020-01-03

申请号：CN201911018183.9

申请日：2019-10-24

Applicant: 福建省农业科学院水稻研究所

Inventor： 张建福 ,  谢云杰 ,  何炜 ,  姜身飞 ,  谢华安

IPC: C12N5/04 ,  C12N15/82

Abstract: 本发明公开了一种水稻原生质体分离与转化方法。涉及原生质体分离转化技术领域。分离方法为取水稻苗茎部和叶片制备成薄片，酶解，过筛，弃滤液，留残存的薄片；将酶解后残存的薄片用W5溶液洗脱回收，震荡，过筛收集滤液，将收集的全部滤液混合，离心，弃上清，得沉淀，和W5溶液重悬，离心弃上清，和MMg溶液混合。转化方法为将目标载体和原生质体悬浊液混匀，和PEG混匀，水浴，和W5溶液混合，并终止反应，离心，弃上清，再和W5溶液混合，转到入细胞培养板，避光培养。本发明能够较好地获得高质量水稻原生质体，并将其应用于后续研究。

公开(公告)号：CN111394365A

公开(公告)日：2020-07-10

申请号：CN202010327640.9

申请日：2020-04-23

Applicant: 福建省农业科学院水稻研究所

Inventor： 张建福 ,  姜身飞 ,  谢云杰 ,  何炜 ,  肖开转 ,  蔡秋华 ,  谢华安

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/82 ,  C07K14/415 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46

Abstract: 本发明公开了OsDUF6基因在提高水稻耐旱性中的应用，属于基因工程技术领域。本发明克隆获得了一个水稻未知功能结构域基因OsDUF6，通过遗传转化获得该基因的过表达植株；对OsDUF6过表达植株进行干旱处理，发现与野生型植株相比，其存活率上升、抗氧化酶的活性升高、膜脂过氧化程度减弱、ABA含量变化升高、活性氧(ROS)的含量下降，表明过表达OsDUF6可显著提高水稻对干旱的耐受性。