一种适合毕赤酵母高表达的基因序列优化方法

    公开(公告)号:CN112270956B

    公开(公告)日:2023-05-16

    申请号:CN202011153706.3

    申请日:2020-10-26

    Abstract: 本发明公开了一种适合毕赤酵母高表达的基因序列优化方法,包括以下步骤:1)将要表达的蛋白质序列读入后进行处理;2)根据密码子先后组合权重,建立密码子转换矩阵;3)定义图G,其中根据要表达的蛋白质序列含有的氨基酸数量n,图G分为n层,每一层的节点都有一条边连接到下一层的节点;4)设计最大权重数组Max Weight[i,j];5)从图G的倒数第二层开始向图G的第一层遍历,初始化当前层i层MaxWeight[i,j]为负值,并更新当前层的MaxWeight元素;6)从图G的第一层向最后一层进行遍历,通过已经计算好的MaxWeight[i,j],输出具有最大权值的密码子组合,即优化序列。本发明通过毕赤酵母密码子对偏好性对基因序列进行优化,充分解决了最优化序列候选路径呈指数增长的问题。

    一种可高效加工前体蛋白的毕赤酵母工程菌构建方法

    公开(公告)号:CN110438021A

    公开(公告)日:2019-11-12

    申请号:CN201811177982.6

    申请日:2018-10-10

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,更具体地,涉及毕赤酵母工程菌构建方法,特别是指一种可高效加工前体蛋白的毕赤酵母工程菌构建方法。该方法首先设计一对上游引物、下游引物;而后通过PCR技术从商业化载体中扩增出Furin基因编码序列,PCR反应中模板浓度为1~1000 ng,将毕赤酵母Furin基因编码序列克隆到毕赤酵母胞内表达载体的多克隆位点中,构建重组表达载体pFurin同时将重组表达载体pFurin转化到毕赤酵母菌株中,完成了毕赤酵母工程菌的构建。本发明构建的高效加工前体蛋白的Furin异源表达毕赤酵母工程菌株,与未改造的传统毕赤酵母相比,异源表达毕赤酵母菌株能更有效加工前体蛋白,加工效率可达到80%以上,工程菌的构建成功为Furin加工的前体蛋白在毕赤酵母中高效表达奠定了基础。

    一种用组织工程支架珠核培育珍珠的方法

    公开(公告)号:CN105309346B

    公开(公告)日:2017-12-15

    申请号:CN201510306482.8

    申请日:2015-06-07

    CPC classification number: Y02A40/81

    Abstract: 本发明公开一种用组织工程支架珠核培育珍珠的方法,其特征是,在植入育珠蚌的珠核表面粘附有一层厚度均匀的可降解高分子聚合物作为组织工程支架,所述组织工程支架为一个可以容纳细胞生长的立体网络空间,将珍珠贝的外套膜组织用酶消化法分离成单个存在的游离的外套膜细胞,配制成一定细胞密度的外套膜细胞悬液,然后将珠核粘附外套膜细胞后与外套膜细胞悬液一起植入育珠蚌的插核位置来培育有核珍珠。本发明方法操作简便,无需体外培养细胞,避免了采用细胞培养方法对技术和设备要求高的问题,可将无菌包装好的珠核直接运至养殖现场操作,运输方便,对设备、操作人员的要求低,成本生产大幅降低,适于大规模生产应用。

    一种用组织工程支架珠核培育珍珠的方法

    公开(公告)号:CN105309346A

    公开(公告)日:2016-02-10

    申请号:CN201510306482.8

    申请日:2015-06-07

    CPC classification number: Y02A40/81

    Abstract: 本发明公开一种用组织工程支架珠核培育珍珠的方法,其特征是,在植入育珠蚌的珠核表面粘附有一层厚度均匀的可降解高分子聚合物作为组织工程支架,所述组织工程支架为一个可以容纳细胞生长的立体网络空间,将珍珠贝的外套膜组织用酶消化法分离成单个存在的游离的外套膜细胞,配制成一定细胞密度的外套膜细胞悬液,然后将珠核粘附外套膜细胞后与外套膜细胞悬液一起植入育珠蚌的插核位置来培育有核珍珠。本发明方法操作简便,无需体外培养细胞,避免了采用细胞培养方法对技术和设备要求高的问题,可将无菌包装好的珠核直接运至养殖现场操作,运输方便,对设备、操作人员的要求低,成本生产大幅降低,适于大规模生产应用。

    一种优化的毕赤酵母GS115交配外激素α-factor信号肽及其应用

    公开(公告)号:CN110054667A

    公开(公告)日:2019-07-26

    申请号:CN201910339544.3

    申请日:2019-04-25

    Abstract: 本发明公开了一种优化的毕赤酵母GS115交配外激素α-factor信号肽及其应用。本发明对具有如SEQID NO:1所示氨基酸序列的毕赤酵母GS115α-factor信号肽引入一个N糖基化位点,得到优化后的毕赤酵母GS115交配外激素α-factor信号肽,其氨基酸序列如SEQIDNO:3所示。本发明优化的α-factor信号肽特别适用于引导外源蛋白在毕赤酵母中的分泌表达,与优化前信号肽相比,表达水平提高了5-7倍,其应用有利于筛选到高表达菌株,具有降低生产成本、便于后续纯化等优势。

    一种多功能移液枪架
    8.
    发明公开

    公开(公告)号:CN108160130A

    公开(公告)日:2018-06-15

    申请号:CN201711484266.8

    申请日:2017-12-29

    Abstract: 本发明属于实验室设备技术领域,具体涉及一种多功能移液枪架。多功能实用经济型移液枪架,由移液枪挂架和底座两个部分构成,呈“L”型,底座为“L”型的底部,为立方体,移液枪挂架为“L”的上部,立于底座的一侧边缘,移液枪挂架和底座之间通过契状滑槽连接。与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:结构简单,枪架与底座通过契状滑槽连接为一体,结构稳定,同时,包装运输、收纳等有可拆卸,体积校,部长位置;枪架垂直面上可放置定时器、枪架底座上设置有可放置便签本的标签盒,记录笔、解剖镊以及多规格的离心管、试管等,实现了多功能的整合。

    二-((3-氯苯并噻吩-2-酯基)六氟苯氧基)轴向取代硅酞菁的制备方法

    公开(公告)号:CN112574248A

    公开(公告)日:2021-03-30

    申请号:CN202011454456.7

    申请日:2020-12-10

    Abstract: 本发明属于配合物领域,尤其属于二‑((3‑氯苯并噻吩‑2‑酯基)六氟苯氧基)轴向取代硅酞菁制备的方法,该配合物作为光敏剂应用于光动力治疗细菌感染。本方法通过以下步骤实现:3‑氯‑苯并噻吩‑2‑酯基六氟苯酚(简称为CBT‑OH)和二氯硅(Ⅳ)酞菁按照1:0.25~4比例在无水K2CO3存在下于甲苯中140℃混合搅拌,回流制备二‑((3‑氯苯并噻吩‑2‑酯基)六氟苯氧基)轴向取代硅酞菁。本发明不仅可以利用体积较大亲脂性氯苯并噻吩环结构分子的空间位阻,在一定程度上抑制酞菁聚集体的形成,抑制聚集体形成,增加细菌细胞膜通透,使芳基噻吩轴向取代硅酞菁配合物成为一类具有应用潜力的光敏剂。

    二-(4-二苯并噻吩-2-苯氧基)轴向取代硅酞菁的制备方法

    公开(公告)号:CN112457341A

    公开(公告)日:2021-03-09

    申请号:CN202011454469.4

    申请日:2020-12-10

    Abstract: 本发明属于二‑(4‑二苯并噻吩‑2‑苯氧基)轴向取代硅酞菁配合物制备的方法,该配合物作为光敏剂应用抗菌治疗。(1)将2‑溴二苯并噻吩、4‑羟基苯硼酸、1,3‑二溴丙烷和四(三苯基膦)钯加入到四氢呋喃和无水K2CO3的混合溶液中,搅拌混合、回流制备前驱体4‑二苯并噻吩‑2‑苯酚;(2)将前驱体4‑二苯并噻吩‑2‑苯酚和二氯硅(Ⅳ)酞菁加入到在无水K2CO3存在下甲苯溶液中,140℃搅拌混合,回流制备得到二‑(4‑二苯并噻吩‑2‑苯氧基)取代硅酞菁。本发明制备的硅酞菁,利用芳基噻吩结构的空间位阻,抑制酞菁聚集体的形成,同时将苯并噻吩引入到酞菁轴向位置,具有抗微生物、抗癌作用,可应用于光敏剂。

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