公开(公告)号：CN110029130A

公开(公告)日：2019-07-19

申请号：CN201910331839.6

申请日：2019-04-24

Applicant: 皖南医学院第一附属医院(皖南医学院弋矶山医院)

Inventor： 高家林 ,  王李卓 ,  吕康甲 ,  章尧 ,  粱飞腾 ,  张杨

IPC: C12N15/90 ,  C12N15/85 ,  C12N9/22 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明公开了基于CRISPR/Cas9系统在Beta-TC-6细胞株中剔除Sidt2基因方法，针对小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞(Beta-TC-6)难转染以及CRISPR/Cas9质粒分子较大的特点，通过采取电穿孔进行Cas9质粒的递送，并设置不同的穿孔电压梯度进行电转参数的优化，从而实现了在小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞(Beta-TC-6)中高效的递送CRISPR/Cas9质粒；同时，通过将CRISPR/Cas9基因编辑系统和电穿孔相结合，克服了CRISPR/Cas9质粒难转导的特点，为常规的分子生物学实验室开展CRISPR/Cas9基因基因编辑系统提供了切实可行的办法，具有极高的推广应用价值。

公开(公告)号：CN111349630A

公开(公告)日：2020-06-30

申请号：CN202010246241.X

申请日：2020-03-31

Applicant: 皖南医学院第一附属医院(皖南医学院弋矶山医院)

Inventor： 高家林 ,  王李卓 ,  章尧 ,  熊钱颖

IPC: C12N15/11 ,  C12Q1/6869 ,  C12Q1/6883

Abstract: 本发明公开了2型糖尿病单核苷酸多态性C502A的Sidt2基因检测方法和试剂盒,所述引物对是引物809、引物791、引物324所示的核昔酸序列，所述引物对用于检测Sidt2基因启动子区C502A位点。所述检测方法包括提取基因组DNA,设计引物对，以全基因组为模板进行PCR扩增，对PCR扩增产物进行测序,分析测序结果并判断是否发生突变。医护人员可使用试剂盒对Sidt2基因进行先抽取、再反应检测处理，通过对试剂盒内控温装置的使用，确保了试剂盒内Sidt2基因样本的恒温性。此外，医护人员可将控温机构取出，再将现有技术的Y型管与该装置内部左右两侧的安装孔相连接，再通过抽气泵与Y型管的配合使用，将试剂盒处于真空环境中进行放置，以此防止试剂盒内部的细菌滋生，对基因起到保护作用。