公开(公告)号：CN110029130A

公开(公告)日：2019-07-19

申请号：CN201910331839.6

申请日：2019-04-24

Applicant: 皖南医学院第一附属医院(皖南医学院弋矶山医院)

Inventor： 高家林 ,  王李卓 ,  吕康甲 ,  章尧 ,  粱飞腾 ,  张杨

IPC: C12N15/90 ,  C12N15/85 ,  C12N9/22 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明公开了基于CRISPR/Cas9系统在Beta-TC-6细胞株中剔除Sidt2基因方法，针对小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞(Beta-TC-6)难转染以及CRISPR/Cas9质粒分子较大的特点，通过采取电穿孔进行Cas9质粒的递送，并设置不同的穿孔电压梯度进行电转参数的优化，从而实现了在小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞(Beta-TC-6)中高效的递送CRISPR/Cas9质粒；同时，通过将CRISPR/Cas9基因编辑系统和电穿孔相结合，克服了CRISPR/Cas9质粒难转导的特点，为常规的分子生物学实验室开展CRISPR/Cas9基因基因编辑系统提供了切实可行的办法，具有极高的推广应用价值。