一种新型噬菌粒展示载体pCANTAB5M

    公开(公告)号:CN102676569A

    公开(公告)日:2012-09-19

    申请号:CN201210142147.5

    申请日:2012-05-08

    IPC分类号: C12N15/70 C12N7/01

    摘要: 本发明公开了一种新型噬菌粒展示载体pCANTAB5M及其制备方法和应用。该载体对商用载体pCANTAB5E进行了改进,在Sfi I和Not I酶切位点之间插入了Xba I、Stu I、EcoRV和Kpn I 4个常用的内切酶克隆位点,同时在载体中引入了Myc标签和His标签及通用测序引物BGH。这样的改进简化了外源基因的定向克隆操作,提高了库容量与克隆效率,使得阳性噬菌粒克隆的鉴定更为准确,极大地方便了阳性克隆的测序验证工作。本发明适用于展示各种随机肽库,抗体库和各种功能靶蛋白。

    哺乳动物细胞高效表达载体的构建及应用

    公开(公告)号:CN103525868A

    公开(公告)日:2014-01-22

    申请号:CN201310486380.X

    申请日:2013-10-17

    摘要: 本发明涉及哺乳动物细胞高效表达载体pSNEO,该载体是基于新霉素抗性筛选基因NEO通过联合弱化筛选基因表达和增强目的基因表达的策略构建而成。其中,筛选基因的弱化包括两方面,在启动子中引入缺失突变实现筛选基因的转录弱化,然后在筛选基因翻译起始位点前引入发夹结构序列以实现筛选基因的翻译弱化。目的基因的表达增强是在目的基因表达框的多克隆位点与PolyA加尾信号之间加入转录调控元件WPRE序列。本发明构建的pSNEO载体可以方便快速的完成目的基因的稳定高表达细胞株的构建,为大分子重组蛋白的制备提供了新的工具。

    哺乳动物细胞高效表达载体的构建及应用

    公开(公告)号:CN103525868B

    公开(公告)日:2015-01-21

    申请号:CN201310486380.X

    申请日:2013-10-17

    摘要: 本发明涉及哺乳动物细胞高效表达载体pSNEO,该载体是基于新霉素抗性筛选基因NEO通过联合弱化筛选基因表达和增强目的基因表达的策略构建而成。其中,筛选基因的弱化包括两方面,在启动子中引入缺失突变实现筛选基因的转录弱化,然后在筛选基因翻译起始位点前引入发夹结构序列以实现筛选基因的翻译弱化。目的基因的表达增强是在目的基因表达框的多克隆位点与PolyA加尾信号之间加入转录调控元件WPRE序列。本发明构建的pSNEO载体可以方便快速的完成目的基因的稳定高表达细胞株的构建,为大分子重组蛋白的制备提供了新的工具。