公开(公告)号：CN100434535C

公开(公告)日：2008-11-19

申请号：CN200710099584.2

申请日：2007-05-24

Applicant: 清华大学

Inventor： 何苗 ,  胡秀华 ,  刘丽 ,  施汉昌 ,  李丹

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种定量检测轮状病毒的方法及其专用标准品。本发明的定量检测轮状病毒的标准品，是含有序列表中序列1的核苷酸序列的重组载体，或是含有所述重组载体的转基因宿主细胞。本发明的定量检测轮状病毒的方法，是分别以待检测样品和该标准品的基因组DNA为模板，或以分别由所述待检测样品和该标准品的总RNA反转录得到的cDNA为模板，利用由核苷酸序列是序列表中序列2的核苷酸片段和核苷酸序列是序列表中序列3的核苷酸片段组成的引物对进行PCR，对待检测样品进行轮状病毒定量。该标准品具有广谱识别和感染性特异相结合的特点，敏感性高，制备方法简便，可长期保存，纯度好，检测线性范围较宽，可以普遍用于各种样品，中轮状病毒的快速定量检测。

公开(公告)号：CN101058834A

公开(公告)日：2007-10-24

申请号：CN200710099584.2

申请日：2007-05-24

Applicant: 清华大学

Inventor： 何苗 ,  胡秀华 ,  刘丽 ,  施汉昌 ,  李丹

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种定量检测轮状病毒的方法及其专用标准品。本发明的定量检测轮状病毒的标准品，是含有序列表中序列1的核苷酸序列的重组载体，或是含有所述重组载体的转基因宿主细胞。本发明的定量检测轮状病毒的方法，是分别以待检测样品和该标准品的基因组DNA为模板，或以分别由所述待检测样品和该标准品的总RNA反转录得到的cDNA为模板，利用由核苷酸序列是序列表中序列2的核苷酸片段和核苷酸序列是序列表中序列3的核苷酸片段组成的引物对进行PCR，对待检测样品进行轮状病毒定量。该标准品具有广谱识别和感染性特异相结合的特点，敏感性高，制备方法简便，可长期保存，纯度好，检测线性范围较宽，可以普遍用于各种样品，中轮状病毒的快速定量检测。

公开(公告)号：CN101126107A

公开(公告)日：2008-02-20

申请号：CN200710120353.5

申请日：2007-08-16

Applicant: 清华大学

Inventor： 何苗 ,  李丹 ,  胡秀华 ,  施汉昌 ,  刘丽

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种检测感染性轮状病毒的方法。该检测感染性轮状病毒的方法，是将待检测样品和轮状病毒的宿主细胞共培养，然后提取所述宿主细胞的总RNA，利用由核苷酸序列是序列表中序列1的核苷酸片段和核苷酸序列是序列表中序列2的核苷酸片段组成的引物对进行RT－PCR，如待检测样品中得到300－400bp的PCR产物，则所述待检测样品中有感染性轮状病毒。本发明不仅具有特异性好、灵敏度高、抗杂质干扰能力强等优点，而且还能提供环境介质中轮状病毒潜在的感染效应等信息，为快速检测环境介质中具有感染性的轮状病毒、评估环境中轮状病毒感染风险、预防轮状病毒疾病爆发流行提供强有力的技术支持。