-
公开(公告)号：CN118291419A
公开(公告)日：2024-07-05
申请号：CN202410538927.4
申请日：2024-04-30
申请人： 清华大学
摘要： 本发明公开了一种热稳定转氨酶的突变体及其应用。本发明提供了一种蛋白，是如下A)或B)：A)所示的蛋白为将野生型转氨酶或对应于其的氨基酸序列中第136、142、228和249位氨基酸残基中至少一位、至少2位、至少3位或至少4位进行突变，得到具有转氨酶活性的蛋白质；B)所示的蛋白为将A)所示蛋白的氨基酸序列末端添加标签序列且具有转氨酶活性的由A)衍生的蛋白质。本发明所获得的多个重组转氨酶突变体催化剂热稳定性较野生型显著提高。实现了热稳定性和酶活力的双重提升，同时保持了催化剂的高立体选择性。
-
公开(公告)号：CN114317507B
公开(公告)日：2024-07-02
申请号：CN202111448620.8
申请日：2021-11-30
申请人： 清华大学
摘要： 本发明提供了腈水合酶突变体及其应用。本发明提供了一种腈水合酶突变体或其片段，与野生型腈水合酶相比，所述突变体或其片段包含以下的突变：突变I：位于野生型腈水合酶β亚基的起始端的二级结构域α螺旋‑1和α螺旋‑2之间的结构域上的疏水性氨基酸突变；突变II：距离活性中心残基‑C(S/T)LCSC(T/Y)#imgabs0#范围内的无规则卷曲结构域上的极性氨基酸突变。本发明所述的腈水合酶组合突变体，其能在改良型腈水合酶的基础上，发挥协同调控效应，在具有更好的热稳定性和耐受性的同时，进一步显著地提高了活力。
-
公开(公告)号：CN117586356A
公开(公告)日：2024-02-23
申请号：CN202410066538.6
申请日：2024-01-17
申请人： 清华大学 , 北京衍微科技有限公司
摘要： 本申请涉及生物技术、基因工程领域，尤其涉及一种多肽及其用途。该多肽，多肽，其长度为20aa‑50aa，氨基酸序列如下所示：M（X）n‑RX‑（X）m（A）p‑（X）q‑AXA（XXA，AXX），其中，n，m，p，q为0‑10的任意整数，X每次出现，各自独立地为任意氨基酸；M（X）n‑RX为N端带电荷区域；（X）m（A）p‑（X）q为含丙氨酸的疏水区域；AXA（XXA，AXX）为N端带电荷区域。将该多肽融合表达在目标蛋白的N端可实现目标蛋白在宿主中的分泌表达，还能增强目标蛋白的表达水平，即该多肽同时具有介导目标蛋白分泌以及增强目标蛋白表达水平的双重功能。
-
公开(公告)号：CN114107148B
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202111338339.9
申请日：2021-11-12
申请人： 清华大学
IPC分类号： C12N1/21 , C12N9/06 , C12N9/10 , C12N9/00 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/52 , C12N15/77 , C12P19/26 , C12R1/15
摘要： 本发明提供了一种高产透明质酸的基因工程菌株及其应用，所述基因工程菌株是强化透明质酸合成过程中的果糖‑6‑磷酸到D‑葡萄糖胺‑6‑磷酸的反应。本发明的高产透明质酸的基因工程菌株是在出发菌株中同时转入谷氨酰胺‑果糖‑6‑磷酸转氨酶以及谷氨酸合成酶或谷氨酰胺合成酶，来强化透明质酸合成中的限速步骤，从而提高透明质酸的产量。本发明中的宿主谷氨酸棒杆菌是食品安全级菌株，不产生任何内毒素和外毒素。所构建的新菌株摇瓶最高产量是出发菌株的2.8倍，达到17.4g/L，具有良好的工业应用前景。
-
公开(公告)号：CN114317507A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202111448620.8
申请日：2021-11-30
申请人： 清华大学
摘要： 本发明提供了腈水合酶突变体及其应用。本发明提供了一种腈水合酶突变体或其片段，与野生型腈水合酶相比，所述突变体或其片段包含以下的突变：突变I：位于野生型腈水合酶β亚基的起始端的二级结构域α螺旋‑1和α螺旋‑2之间的结构域上的疏水性氨基酸突变；突变II：距离活性中心残基‑C(S/T)LCSC(T/Y)范围内的无规则卷曲结构域上的极性氨基酸突变。本发明所述的腈水合酶组合突变体，其能在改良型腈水合酶的基础上，发挥协同调控效应，在具有更好的热稳定性和耐受性的同时，进一步显著地提高了活力。
-
公开(公告)号：CN112280761B
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202011280191.3
申请日：2020-11-16
申请人： 清华大学
摘要： 本发明公开了一种重组转氨酶和所述重组转氨酶的突变体及其应用。本发明通过对转氨酶编码基因的密码子进行优化，得到了一种核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示的转氨酶编码基因。在此基础上，通过构建转氨酶的突变体库得到了一系列所述转氨酶突变体，并筛选出最优突变体。本发明所获得的重组转氨酶催化剂能够不对称催化合成17种高附加值的手性氨基醇及手性胺，反应转化率最高可达99％，产物光学纯度可达99％以上。且通过蛋白质工程改造获取的转氨酶突变体相比野生型母本活力提高明显，最优突变体相比野生型母本的活力提升105倍，且产物ee在99％以上。
-
公开(公告)号：CN110499274B
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN201910880078.X
申请日：2019-09-18
申请人： 清华大学
摘要： 本发明公开了基因工程技术领域的一种基因工程红球菌及其构建方法与应用。其中的基因工程红球菌构建的方法，是基于CRISPR/Cas9的基因编辑方法，基因敲除效率高，能实现无痕敲除，以及基因叠加敲除，为红球菌的基因改造提供了高效的操作工具。以酰胺酶基因敲除为例，其敲除效率可达到75％。同时，利用上述编辑方法构建的低副产物合成、高催化稳定性红球菌，应用于催化丙烯腈水合生产丙烯酰胺或丙烯酸铵制备中，催化稳定性好，效率高，具有良好的应用前景。
-
公开(公告)号：CN112280761A
公开(公告)日：2021-01-29
申请号：CN202011280191.3
申请日：2020-11-16
申请人： 清华大学
摘要： 本发明公开了一种重组转氨酶和所述重组转氨酶的突变体及其应用。本发明通过对转氨酶编码基因的密码子进行优化，得到了一种核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示的转氨酶编码基因。在此基础上，通过构建转氨酶的突变体库得到了一系列所述转氨酶突变体，并筛选出最优突变体。本发明所获得的重组转氨酶催化剂能够不对称催化合成17种高附加值的手性氨基醇及手性胺，反应转化率最高可达99％，产物光学纯度可达99％以上。且通过蛋白质工程改造获取的转氨酶突变体相比野生型母本活力提高明显，最优突变体相比野生型母本的活力提升105倍，且产物ee在99％以上。
-
公开(公告)号：CN110331121B
公开(公告)日：2021-01-05
申请号：CN201910549289.5
申请日：2019-06-24
申请人： 清华大学
摘要： 本发明公开了属于基因工程技术领域的一种高产脂肽的重组菌及其应用，所述高产脂肽的重组菌，其是将亮氨酸合成途径中的2‑异丙基苹果酸合酶基因转化至原始菌株构建而成。本发明的进一步过表达部分亮氨酸合成路径(2‑异丙基苹果酸合酶、3‑异丙基苹果酸脱氢酶、3‑异丙基苹果酸脱水酶和支链氨基酸转氨酶)的重组菌与出发菌株相比，表面活性素产量最高提高了55.6％，可用于脂肽类生物表面活性剂的生产，具有良好的工业应用前景，摇瓶发酵所得发酵液中脂肽产量平均为13‑16g/L。
-
公开(公告)号：CN110499274A
公开(公告)日：2019-11-26
申请号：CN201910880078.X
申请日：2019-09-18
申请人： 清华大学
摘要： 本发明公开了基因工程技术领域的一种基因工程红球菌及其构建方法与应用。其中的基因工程红球菌构建的方法，是基于CRISPR/Cas9的基因编辑方法，基因敲除效率高，能实现无痕敲除，以及基因叠加敲除，为红球菌的基因改造提供了高效的操作工具。以酰胺酶基因敲除为例，其敲除效率可达到75％。同时，利用上述编辑方法构建的低副产物合成、高催化稳定性红球菌，应用于催化丙烯腈水合生产丙烯酰胺或丙烯酸铵制备中，催化稳定性好，效率高，具有良好的应用前景。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
搜索结果
105 条记录 (耗时 0.032 秒)
