公开(公告)号：CN110835635B

公开(公告)日：2024-01-09

申请号：CN201810935546.4

申请日：2018-08-16

Applicant: 深圳华大生命科学研究院 ,  武汉华大吉诺因生物科技有限公司

Inventor： 高千千 ,  赵正琦 ,  李燕珊 ,  丁仁鹏 ,  李波 ,  侯勇 ,  王飞

IPC: C12N15/90 ,  C12N15/63

Abstract: 本发明公开了一种不同启动子启动多个串联sgRNA表达的质粒构建方法。本发明方法采用常见载体改造为工具载体，然后通过一些通用序列及通用引物的应用，实现快速构建两个至多个sgRNA串联的载体。本发明中，因为不同的sgRNA由不同的启动子启动，从而能够保证基因编辑效率不受串联影响，同时靶向不同的目的基因片段，实现高效特异的多基因编辑。另外，该构建方法灵活，可根据实际需要替换不同的sgRNA，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN110835635A

公开(公告)日：2020-02-25

申请号：CN201810935546.4

申请日：2018-08-16

Applicant: 深圳华大生命科学研究院 ,  武汉华大吉诺因生物科技有限公司

Inventor： 高千千 ,  赵正琦 ,  李燕珊 ,  丁仁鹏 ,  李波 ,  侯勇 ,  王飞

IPC: C12N15/90 ,  C12N15/63

Abstract: 本发明公开了一种不同启动子启动多个串联sgRNA表达的质粒构建方法。本发明方法采用常见载体改造为工具载体，然后通过一些通用序列及通用引物的应用，实现快速构建两个至多个sgRNA串联的载体。本发明中，因为不同的sgRNA由不同的启动子启动，从而能够保证基因编辑效率不受串联影响，同时靶向不同的目的基因片段，实现高效特异的多基因编辑。另外，该构建方法灵活，可根据实际需要替换不同的sgRNA，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN109777798A

公开(公告)日：2019-05-21

申请号：CN201711115396.4

申请日：2017-11-13

Applicant: 深圳华大生命科学研究院

Inventor： 赵正琦 ,  高千千 ,  韩序 ,  侯勇 ,  王飞 ,  李波 ,  李燕珊 ,  昃白尘

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/11 ,  C12N15/63 ,  A61K31/7105 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR技术治疗KRAS突变恶性肿瘤的sgRNA及其应用。本发明首先保护一种sgRNA，命名为G12S-sgRNA，其靶序列长度为15-25bp，所述靶序列中具有序列2中的第20-34位核苷酸。本发明还保护一种用于治疗癌症的药物，其活性成分为所述sgRNA。本发明还保护所述sgRNA在制备药物中的应用；所述药物为治疗癌症的药物。本发明提供的G12S-sgRNA适用于对携带G12S突变型KRAS基因的恶性肿瘤的精准靶向治疗，具有很强的应用前景和临床应用价值。