公开(公告)号：CN109929918B

公开(公告)日：2020-10-30

申请号：CN201910232981.5

申请日：2019-03-26

Applicant: 浙江大学

Inventor： 张松英 ,  张银丽 ,  马烨榕 ,  金佳敏 ,  杨玮杰

IPC: C12Q1/6851 ,  C12Q1/6888

Abstract: 本发明涉及生物技术领域。目的是提供一种评估卵母细胞及胚胎质量的方法，该方法具有准确率高的特点，有利于提高胚胎移植成功率，减少医疗费用。技术方案是：一种基于颗粒细胞基因表达情况评估卵及胚胎质量的方法；按以下步骤依次进行：1)在管性因素有生殖问题的取卵病人取卵日，收集其卵子外围多余的颗粒细胞；2)将收集的颗粒细胞作为样品，使用RNA提取试剂盒获得颗粒细胞样品中的总RNA；3)使用逆转录试剂盒配置混合物后在普通PCR仪中实验获得cDNA模板；4)使用实时定量PCR试剂盒，在步骤3)获得的cDNA模板中分别加入如下序列的ADAMTS1引物、HSPG2引物以及管家基因β‑actin引物。

公开(公告)号：CN115287325A

公开(公告)日：2022-11-04

申请号：CN202210810270.3

申请日：2022-07-11

Applicant: 浙江大学

Inventor： 张银丽 ,  张松英 ,  马烨榕 ,  童晓嵋

IPC: C12Q1/02

Abstract: 发明公开了一种基于ACLY蛋白表达定位的评估胚胎发育潜能的方法，包括以下步骤：对囊胚激光打孔，随机获取囊胚滋养外胚层的2‑5个细胞，进行固定、透膜、封闭和ACLY一抗孵育、二抗孵育等免疫荧光染色步骤，拍照检测ACLY蛋白表达定位并统计ACLY定位的细胞核/质比例，根据ACLY蛋白定位情况判断出着床前胚胎发育潜能；本发明比较表达ACLY野生型和ACLY出核的胚胎，发现ACLY出核导致早期胚胎发育囊胚比例显著下降，且发现人囊胚中ACLY蛋白核定位与高质量胚胎显著相关。本发明通过对ACLY表达于囊胚卵裂球细胞核的比例，将评估方法定量化，减少因技术人员不同引起的评估差异，并且将Gardner囊胚评分系统下处于同一级别的胚胎进一步细分，可优选出最高发育潜能的胚胎进行移植。

公开(公告)号：CN109929918A

公开(公告)日：2019-06-25

申请号：CN201910232981.5

申请日：2019-03-26

Applicant: 浙江大学

Inventor： 张松英 ,  张银丽 ,  马烨榕 ,  金佳敏 ,  杨玮杰

IPC: C12Q1/6851 ,  C12Q1/6888

Abstract: 本发明涉及生物技术领域。目的是提供一种评估卵母细胞及胚胎质量的方法，该方法具有准确率高的特点，有利于提高胚胎移植成功率，减少医疗费用。技术方案是：一种基于颗粒细胞基因表达情况评估卵及胚胎质量的方法；按以下步骤依次进行：1)在管性因素有生殖问题的取卵病人取卵日，收集其卵子外围多余的颗粒细胞；2)将收集的颗粒细胞作为样品，使用RNA提取试剂盒获得颗粒细胞样品中的总RNA；3)使用逆转录试剂盒配置混合物后在普通PCR仪中实验获得cDNA模板；4)使用实时定量PCR试剂盒，在步骤3)获得的cDNA模板中分别加入如下序列的ADAMTS1引物、HSPG2引物以及管家基因β-actin引物。