公开(公告)号：CN109929918B

公开(公告)日：2020-10-30

申请号：CN201910232981.5

申请日：2019-03-26

Applicant: 浙江大学

Inventor： 张松英 ,  张银丽 ,  马烨榕 ,  金佳敏 ,  杨玮杰

IPC: C12Q1/6851 ,  C12Q1/6888

Abstract: 本发明涉及生物技术领域。目的是提供一种评估卵母细胞及胚胎质量的方法，该方法具有准确率高的特点，有利于提高胚胎移植成功率，减少医疗费用。技术方案是：一种基于颗粒细胞基因表达情况评估卵及胚胎质量的方法；按以下步骤依次进行：1)在管性因素有生殖问题的取卵病人取卵日，收集其卵子外围多余的颗粒细胞；2)将收集的颗粒细胞作为样品，使用RNA提取试剂盒获得颗粒细胞样品中的总RNA；3)使用逆转录试剂盒配置混合物后在普通PCR仪中实验获得cDNA模板；4)使用实时定量PCR试剂盒，在步骤3)获得的cDNA模板中分别加入如下序列的ADAMTS1引物、HSPG2引物以及管家基因β‑actin引物。

公开(公告)号：CN113791224B

公开(公告)日：2023-12-01

申请号：CN202111098867.1

申请日：2021-09-18

Applicant: 浙江大学

Inventor： 孙小荷 ,  张银丽 ,  童晓嵋 ,  张松英

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明属于生殖医学领域。技术方案是：本发明提供的技术方案是：一种基于卵泡液HRG、C4B蛋白表达水平作为不明原因复发性流产的预警方法，所述方法非用于疾病诊断治疗；包括如下步骤：1)卵泡液的收集、保存：对收集到的卵泡液在恒温下进行卵冠丘复合物的拾取后将剩余的卵泡液收集，进行1500rpm离心取上清、分装，冻存于‑80℃；2)C4B、HRG卵泡液蛋白浓度ELISA测定：采用相应蛋白的ELISA检测试剂盒，对卵泡液进行相应蛋白浓度的检测；3)结果统计及分析。该种方法应能对URSA患者的妊娠结局有一定的预测价值。(56)对比文件Frida C. Mohlin, et al..Analysis ofgenes coding for CD46, CD55, and C4b-binding protein in patients withidiopathic,recurrent, spontaneouspregnancy loss《.Eur. J. Immunol.》.2013,Soumya R. Jena, et al..Paternalcontributors in recurrent pregnancy loss:Cues from comparative proteome profilingof seminal extracellular vesicles《.MolReprod Dev.》.2020,Deug-Chan Lee, et al..Proteinprofiling underscores immunologicalfunctions of uterine cervical mucus plugin human pregnancy《.Journal ofProteomics》.2011,Alberuni M Zamah, et al..Proteomicanalysis of human follicular fluid fromfertile women《.Clinical Proteomics》.2015,

公开(公告)号：CN115287325A

公开(公告)日：2022-11-04

申请号：CN202210810270.3

申请日：2022-07-11

Applicant: 浙江大学

Inventor： 张银丽 ,  张松英 ,  马烨榕 ,  童晓嵋

IPC: C12Q1/02

Abstract: 发明公开了一种基于ACLY蛋白表达定位的评估胚胎发育潜能的方法，包括以下步骤：对囊胚激光打孔，随机获取囊胚滋养外胚层的2‑5个细胞，进行固定、透膜、封闭和ACLY一抗孵育、二抗孵育等免疫荧光染色步骤，拍照检测ACLY蛋白表达定位并统计ACLY定位的细胞核/质比例，根据ACLY蛋白定位情况判断出着床前胚胎发育潜能；本发明比较表达ACLY野生型和ACLY出核的胚胎，发现ACLY出核导致早期胚胎发育囊胚比例显著下降，且发现人囊胚中ACLY蛋白核定位与高质量胚胎显著相关。本发明通过对ACLY表达于囊胚卵裂球细胞核的比例，将评估方法定量化，减少因技术人员不同引起的评估差异，并且将Gardner囊胚评分系统下处于同一级别的胚胎进一步细分，可优选出最高发育潜能的胚胎进行移植。

公开(公告)号：CN113846156A

公开(公告)日：2021-12-28

申请号：CN202111231317.2

申请日：2021-10-22

Applicant: 浙江大学 ,  中信湘雅生殖与遗传专科医院有限公司

Inventor： 张松英 ,  林戈 ,  范衡宇 ,  张银丽 ,  郑伟 ,  童晓嵋 ,  金佳敏 ,  任佩佩

IPC: C12Q1/6883 ,  C12N15/12 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供了一种用于判断女性原发不孕和/或试管婴儿结局的MOS基因、引物、试剂盒及应用，属于基因检测技术领域。本发明提供了MOS基因在判断女性原发不孕和/或试管婴儿结局中的应用，所述MOS基因的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示。本发明通过检测患者的MOS基因序列，判断其MOS基因是否发生突变，从而判断女性原发不孕和/或试管婴儿结局，提供了一种新的可预测女性原发不孕和试管婴儿结局的方法，克服了不孕患者只能在行辅助生殖后才能告知结局的缺点，有利于提高早诊率和遗传性原发不孕的诊断准确率，一旦检出突变，可降低患者试管婴儿成本及对患者产生的伤害。

公开(公告)号：CN113791224A

公开(公告)日：2021-12-14

申请号：CN202111098867.1

申请日：2021-09-18

Applicant: 浙江大学

Inventor： 孙小荷 ,  张银丽 ,  童晓嵋 ,  张松英

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明属于生殖医学领域。技术方案是：本发明提供的技术方案是：一种基于卵泡液HRG、C4B蛋白表达水平作为不明原因复发性流产的预警方法，所述方法非用于疾病诊断治疗；包括如下步骤：1)卵泡液的收集、保存：对收集到的卵泡液在恒温下进行卵冠丘复合物的拾取后将剩余的卵泡液收集，进行1500rpm离心取上清、分装，冻存于‑80℃；2)C4B、HRG卵泡液蛋白浓度ELISA测定：采用相应蛋白的ELISA检测试剂盒，对卵泡液进行相应蛋白浓度的检测；3)结果统计及分析。该种方法应能对URSA患者的妊娠结局有一定的预测价值。

公开(公告)号：CN109929918A

公开(公告)日：2019-06-25

申请号：CN201910232981.5

申请日：2019-03-26

Applicant: 浙江大学

Inventor： 张松英 ,  张银丽 ,  马烨榕 ,  金佳敏 ,  杨玮杰

IPC: C12Q1/6851 ,  C12Q1/6888

Abstract: 本发明涉及生物技术领域。目的是提供一种评估卵母细胞及胚胎质量的方法，该方法具有准确率高的特点，有利于提高胚胎移植成功率，减少医疗费用。技术方案是：一种基于颗粒细胞基因表达情况评估卵及胚胎质量的方法；按以下步骤依次进行：1)在管性因素有生殖问题的取卵病人取卵日，收集其卵子外围多余的颗粒细胞；2)将收集的颗粒细胞作为样品，使用RNA提取试剂盒获得颗粒细胞样品中的总RNA；3)使用逆转录试剂盒配置混合物后在普通PCR仪中实验获得cDNA模板；4)使用实时定量PCR试剂盒，在步骤3)获得的cDNA模板中分别加入如下序列的ADAMTS1引物、HSPG2引物以及管家基因β-actin引物。