公开(公告)号：CN1580032A

公开(公告)日：2005-02-16

申请号：CN200410018527.3

申请日：2004-05-18

Applicant: 浙江大学

Inventor： 梅乐和 ,  杨建丽 ,  姚善泾

IPC: C07C69/24 ,  C07C67/08

Abstract: 本发明公开了一种10－溴代癸酸甲酯(ω－溴代癸酸甲酯)的合成方法。它是在反应容器中加入摩尔比为1∶2～5的10－溴代癸酸/含1M催化剂的甲醇和200mL～2000mL有机溶剂/摩尔10－溴代癸酸，所用的有机溶剂为70∶30∶1(v/v)的己烷/乙醚/醋酸混合溶剂，在45～65℃温度下回流反应10～30h，反应完毕，冷至室温，用1/5～1/2反应液体积的饱和碳酸氢钠调节pH至7～8，接着用1～2.5倍反应液体积的乙醚萃取2～3次，再用1/10～1/4萃取液体积的水洗涤，洗涤液用无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸馏脱除有机溶剂。本发明的优点是：1)原料易得，价也廉；2)溶剂易回收再利用；3)反应温和，操作简便；4)无副反应及目标产物的收率高；5)成本低，具有工业化生产的前景。

公开(公告)号：CN100406557C

公开(公告)日：2008-07-30

申请号：CN200410053250.8

申请日：2004-07-22

Applicant: 浙江大学

Inventor： 梅乐和 ,  杨建丽 ,  谭培生 ,  姚善泾

IPC: C12N11/02 ,  C12N11/08 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种固定化细胞色素P450 BM-3的制备方法。步骤如下：1)粗酶液的提取：发酵所得3g湿菌体用5ml缓冲液溶解，悬浮后在冰浴中超声3min，破胞液于4℃，8000r/min离心20min，上清液即为粗酶液，超声功率为200W，超声时间2s，间隙时间5s，工作次数75；2)酶的固定化：取1.2ml比活为39.5U/gPro粗酶液溶于包含有3.6%、4.2%、4.5%、4.7%、5.1%NaCS的10mM、25mM、50mM、75mM，pH75、pH8.0、pH8.2、pH8.5Tris-Hcl缓冲液18.8mL中，混合，用4号针头滴入50ml溶于相同条件缓冲液的6%、6.2%的PDMDAAC中，再继续搅拌40min，然后在pH8.0下用50mMTris-HCl洗涤三次，吸干即可。本发明的优点是：操作简便，条件温和；固定化酶稳定性好；能用于生物反应器，具有工业应用的前景。

公开(公告)号：CN1580036A

公开(公告)日：2005-02-16

申请号：CN200410018525.4

申请日：2004-05-18

Applicant: 浙江大学

Inventor： 梅乐和 ,  杨建丽 ,  陆燕 ,  姚善泾

IPC: C07C205/37 ,  C07C201/14

Abstract: 本发明公开了一种10－对硝基苯氧基癸酸的合成方法。它的步骤：1)以10－溴代癸酸为原料，首先在混合有机溶剂中，在催化剂作用下与甲醇酯化，制得10－溴代癸酸甲酯，10－溴代癸酸/含1M催化剂的甲醇的摩尔比为1∶2～5，反应温度为45～65℃，反应时间为10－30h；2)10－溴代癸酸甲酯在二甲基亚砜中，与对硝基酚钠发生反应，制得10－对硝基苯氧基癸酸甲酯，10－溴代癸酸甲酯/对硝基酚钠摩尔比为1∶1.1～1.5，反应温度为110～130℃，反应时间为2～4h；3)10－pNCAMe在丙酮/水缓冲体系中，在固定化脂肪酶作用下水解，制得10－对硝基苯氧基癸酸，在35～50℃温度下反应10～20h。本发明的优点是：原料价廉易得；固定化酶易回收再利用；反应温和，操作简便；无副反应及目标产物的收率高。

公开(公告)号：CN1597947A

公开(公告)日：2005-03-23

申请号：CN200410053250.8

申请日：2004-07-22

Applicant: 浙江大学

Inventor： 梅乐和 ,  杨建丽 ,  谭培生 ,  姚善泾

IPC: C12N11/02 ,  C12N11/08

Abstract: 本发明公开了一种NaCS－PDMDAAC微胶囊固定化细胞色素P450 BM－3的制备方法。它是在0～10℃温度下，按质量比6～15∶100将细胞色素P450 BM－3粗酶液混匀于质量分数为3.6～5.1％的纤维素硫酸钠(NaCS)，用4～7号针头滴入2～3倍体积质量分数为4～8％的聚二甲基二丙烯基氯化铵(PDMDAAC)中，再继续搅拌30～60min，然后用去离子水或缓冲液洗涤三次，吸干即可。本发明的优点是：操作简便，条件温和；固定化酶稳定性好；能用于生物反应器，具有工业应用的前景。