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公开(公告)号：CN118086390A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410212036.X
申请日：2024-02-27
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明涉及动物病毒学与基因工程学技术领域，旨在提供一种一步构建猪流行性腹泻病毒感染性质粒的方法与应用。本发明通过分为4段的PEDV全基因组cDNA与pBelo‑BAC11载体骨架的一步同源重组，实现猪流行性腹泻病毒感染性cDNA质粒高效构建；通过五片段同源重组一步构建具有特定遗传变化的PEDV感染性cDNA质粒新突变体；最终得到序列如SEQ ID NO:41所示的PEDV感染性cDNA质粒。本发明通过打断毒性序列，降低了PEDV基因组对细胞的毒性，使PEDV基因组cDNA序列片段在高拷贝质粒pUC57中稳定保存，并实现一步同源重组构建PEDV感染性cDNA克隆。因此通过本方法可以高效实现猪流行性腹泻病毒感染性cDNA克隆的构建和编辑。
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公开(公告)号：CN116621976B
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202310806431.6
申请日：2023-07-04
Applicant: 浙江大学
IPC: C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，旨在提供一种抗PDCoV核衣壳蛋白的单克隆抗体2H7及其应用方法。该单克隆抗体包含抗体重链的Ig结构域VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3，以及抗体轻链的Ig结构域VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3；其中，前三者的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1～3所示，后三者的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:5所示。该单克隆抗体为IgG1亚型，抗体的亲和力高，免疫能力强，具有稳定性好，活性高、亲和力强、灵敏度高、特异性强等优点；与PEDV和TGEV等其他猪肠道病毒无交叉反应，可用于PDCoV诊断试剂盒开发，能够有效进行PDCoV鉴别诊断的推广与应用。
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公开(公告)号：CN110331155B
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN201910551632.X
申请日：2019-06-24
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，旨在提供一种携带2型BVDV‑Erns基因的高繁殖力猪瘟弱毒标记疫苗的构建方法。本发明利用分子克隆及反向遗传方法，将BVDV2‑890#毒株的Erns基因和CSFV流行毒株QZ14的E2基因VR1区置换CSFV‑C株相应的基因片段，并引入7个特定的突变位点，得到了重组病毒rC‑Marker2。获得的重组病毒带有分子标记(BVDV2 Erns)，猪瘟病毒2型流行毒株的VR1以及特定的突变位点，为开发适应体外细胞培养体系的标记疫苗奠定了基础。应用该技术构建的重组嵌合猪瘟病毒弱毒标记疫苗株，能够通过血清学方法判断猪瘟病毒抗体阳性的猪是由于疫苗接种还是野毒感染引起；对当前流行的基因2型猪瘟病毒有较好的中和效果；在体外细胞培养系统中表现出良好的生长能力，可以降低疫苗的生产成本。
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公开(公告)号：CN110305853B
公开(公告)日：2021-09-17
申请号：CN201910551633.4
申请日：2019-06-24
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/65 , A61K39/187 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，旨在提供一种携带1型BVDV‑Erns基因的高繁殖力猪瘟弱毒标记疫苗的构建方法。本发明利用分子克隆以及反向遗传方法，将CSFV‑C株基因组的Erns和E2基因的VR1区分别用BVDV1的Erns基因及CSFV流行株QZ14的VR1区进行置换，并向C株基因组7个特定位点引入突变，得到重组病毒rC‑Marker1。该重组病毒带有外源标记(BVDV Erns)、CSFV流行毒株E2基因的VR1区以及特定的突变位点，为开发适合体外细胞培养体系的猪瘟标记疫苗奠定基础。应用该技术构建的重组嵌合猪瘟病毒弱毒标记疫苗株，能够快速判断猪瘟病毒阳性血清是由于野毒感染还是接种疫苗引起，接种该弱毒标记疫苗株诱导的血清抗体对猪瘟病毒2型流行毒株有较好的中和能力，可以降低疫苗生产成本。
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公开(公告)号：CN106022516A
公开(公告)日：2016-10-12
申请号：CN201610326696.6
申请日：2016-05-16
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种副溶血性弧菌在对虾去壳环节交叉污染的预测模型和方法。所述预测模型通过Weibull方程表示为y(x)＝b*(xn)，尺度因子表示为b＝c×IL+d；副溶血性弧菌接种到对虾上，对不同接种水平下的对虾进行多次去壳实验，获得对虾去壳前后的表面菌落总数和细菌的迁移数量并计算迁移率，将实验数据输入到预测模型中，获得第一、第二线性模型参数及其形状因子，采用构建获得的预测模型对被测对虾去壳过程进行预测，获得去壳环节中的迁移率数据。本发明能准确、客观、定量的反映对虾中副溶血性弧菌在去壳加工环节所发生的交叉污染情况，为对虾虾仁的质量安全和产品卫生标准提供技术支持，在海产品加工管理，安全性评价以及风险预警、风险评估方面有广阔的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104914084A
公开(公告)日：2015-09-16
申请号：CN201510364429.3
申请日：2015-06-25
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明属于生物工程领域，旨在提供一种量子点阳离子交换信号放大技术检测蛋白类毒素的方法。该方法是利用羧基修饰的水溶性硒化镉/硫化锌量子点对蛋白类毒素多克隆抗体进行标记，使量子点上的羧基与抗体氨基在偶联剂的作用下形成稳定的形成量子点-多克隆抗体偶联物；然后以夹心ELISA模式对蛋白类毒素进行检测，采用阳离子交换信号放大技术对结果进行分析，实现蛋白类毒素的定性检测和定量分析。本发明在提高检测灵敏度和稳定性的同时，缩短了检测的时间；对待检的蛋白类毒素的检测灵敏度可以达到皮克水平；本发明中使用的量子点合成方便，成本低。具有高效、快捷、灵敏度高、检测信号稳定等优点。
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公开(公告)号：CN102789743A
公开(公告)日：2012-11-21
申请号：CN201210306405.9
申请日：2012-08-24
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明涉及标签材料领域，旨在提供一种用于指示环境温度变化的视觉标签。该标签至少包括依次设置的三层结构：滤纸A、塑隔层和滤纸B，且塑隔层能够从滤纸A和滤纸B之间抽离；其中，滤纸A上含有均匀混合的高分子聚合材料H-[OCH2-CH2-]n-OH及颜料，用于指示环境温度变化；所述颜料为食品着色剂或化工染料。本发明的温敏标签适用于食品冷链物流、生物制品冷链物流、冷库、冷藏车、超市冷柜、高温电缆、变电站、极地等对温度有特殊要求的环境。相对于现有的温度标识技术，本发明具有简捷、快速、使用方便、适用广、成本低廉等优点。
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公开(公告)号：CN101914566A
公开(公告)日：2010-12-15
申请号：CN201010197337.8
申请日：2010-06-08
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，旨在提供一种基于E2基因的可插入式猪瘟病毒cDNA载体构建及应用。该构建方法包括：以含有猪瘟病毒疫苗C株基因组5’半长的重组质粒pA-F123为模板，用限制性内切酶SpeI和NsiI进行酶切，酶切产物经割胶回收后获得纯化的pA-ΔE2-F123质粒；用BamHI和SalI将含有猪瘟病毒疫苗C株基因组3’半长的F456片段从重组质粒pB-F456中切下，克隆于相同酶作用的pA-ΔE2-F123中，获得重组质粒pA-ΔE2-FL22。本发明构建的可插入式cDNA载体，可根据该病的流行形势，快速、方便的拯救携带不同基因型E2基因的重组C株病毒；重组病毒E2基因中引入探针标记序列可应用于荧光定量PCR鉴别检测方法中。拯救的重组病毒保留C株在兔体内复制以及对自然宿主猪无致病力等特性。
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公开(公告)号：CN100448364C
公开(公告)日：2009-01-07
申请号：CN200610052057.1
申请日：2006-06-20
Applicant: 浙江大学
IPC: A23K1/16
Abstract: 本发明公开了一种抗嗜水气单胞菌卵黄免疫球蛋白蛋黄粉包膜剂的制备方法。收集含有滴度为1∶640及以上的抗嗜水气单胞菌卵黄抗体鸡蛋的蛋黄液，将β-环糊精和水混合、搅拌成β-环糊精水溶液；按体积比为2.8～5.6∶1将蛋黄液缓慢加入至β-环糊精水溶液中，在转速为250转/分钟的条件下搅拌，将含水率小于＜8%的淀粉与β-环糊精蛋黄液混合、搅拌，所获混合物料于60目筛网制粒，于卧式沸腾干燥机上干燥，80目筛网上过筛。所获产品在保留卵黄免疫球蛋白等生物活性物质活性的同时，具有缓释特性，减少了胃蛋白酶对其活性的影响，试验表明本发明制备的蛋黄粉包膜剂添加剂有较高的生物活性和较好的适口性。
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公开(公告)号：CN1864520A
公开(公告)日：2006-11-22
申请号：CN200610052057.1
申请日：2006-06-20
Applicant: 浙江大学
IPC: A23K1/16
Abstract: 本发明公开了一种抗嗜水气单胞菌卵黄免疫球蛋白蛋黄粉包膜剂的制备方法。收集含有滴度为1∶640及以上的抗嗜水气单胞菌卵黄抗体鸡蛋的蛋黄液，将β－环糊精和水混合、搅拌成β－环糊精水溶液；按体积比为2.8～5.6∶1将蛋黄液缓慢加入至β－环糊精水溶液中，在转速为250转/分钟的条件下搅拌，将含水率小于＜8％的淀粉与β－环糊精蛋黄液混合、搅拌，所获混合物料于60目筛网制粒，于卧式沸腾干燥机上干燥，80目筛网上过筛。所获产品在保留卵黄免疫球蛋白等生物活性物质活性的同时，具有缓释特性，减少了胃蛋白酶对其活性的影响，试验表明本发明制备的蛋黄粉包膜剂添加剂有较高的生物活性和较好的适口性。
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