一种单条秀丽隐杆线虫转录组测序文库的构建方法及测序方法

    公开(公告)号:CN109881257A

    公开(公告)日:2019-06-14

    申请号:CN201910161196.5

    申请日:2019-03-04

    Applicant: 浙江大学

    Inventor: 周京花 徐素宏

    Abstract: 本发明公开了一种单条秀丽隐杆线虫转录组测序文库的构建方法及测序方法。测序文库在构建时第一步通过将单条秀丽隐杆线虫在加入裂解液的情况下进行研磨以使虫体裂解完全。本发明方法为了克服实验操作性难题,通过改进裂解液及裂解方法等相关裂解技术,改进单细胞文库构建体系,成功攻克了单条线虫裂解的技术难题,成功建立单条成年线虫转录组测序文库,并建立完善的实验技术流程,不仅为特殊处理线虫提供了强有力的技术支持,也为稀有线虫或特殊处理线虫转录组方面的研究提供了关键的技术保障。

    COL-12过表达线虫模型及其在药物筛选中的应用

    公开(公告)号:CN116622776A

    公开(公告)日:2023-08-22

    申请号:CN202310643597.0

    申请日:2023-06-01

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明属于药物筛选与评价方法领域,涉及医药技术领域,具体涉及一种COL‑12过表达线虫模型及其在药物筛选中的应用。所述COL‑12过表达线虫模型的建立,包括以下步骤:(1)同源修复模板质粒的构建;(2)显微注射和基因编辑;(3)荧光筛选单拷贝转基因线虫。本发明的COL‑12过表达线虫模型可反应胶原蛋白的分泌,用于研究胶原分泌和组装。本发明的COL‑12过表达线虫模型清晰明确地标记了L4时期或成年线虫皮肤COL‑12在线虫角质外壳的定位,所有同期线虫的表达强度基本一致,可用于定量分析实验。该转基因纯合体线虫能够稳定传代,该转基因对线虫的发育无明显影响,便于进行其他遗传杂交和基因组实验。

    一种利用纳米抗体快速提取活性线粒体的方法

    公开(公告)号:CN115197889A

    公开(公告)日:2022-10-18

    申请号:CN202210624628.3

    申请日:2022-06-02

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明提供了一种利用纳米抗体快速提取活性线粒体的方法,属于生物技术与生物医疗技术领域,本发明将线粒体外膜蛋白标记有蛋白标签的线虫置于线粒体分离液中,匀浆,得到匀浆液;对所述匀浆液进行低速离心,取上清;在所述上清中加入固相载体,进行孵育,清洗,得到吸附在固相载体上的线粒体;所述固相载体上偶联有蛋白标签纳米抗体;所述蛋白标签纳米抗体与标记所述线粒体外膜蛋白的蛋白标签可特异性结合。本发明利用抗原抗体结合原理,利用偶联有蛋白标签纳米抗体的固相载体对线粒体进行吸附,可以实现选择性亲和纯化带有对应蛋白标签的线粒体。

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