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公开(公告)号：CN102649815A
公开(公告)日：2012-08-29
申请号：CN201210150844.5
申请日：2012-05-15
Applicant: 浙江大学
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C07K16/18 , C07K16/06 , A61K39/395 , A61P31/04
CPC classification number: Y02A50/403
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，旨在提供AIF1蛋白及抗体在制备近江牡蛎抗感染免疫制剂中的应用。该蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO：2 所示；该基因的编码框核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述蛋白质在制备近江牡蛎抗感染免疫制剂中的应用，是将所述蛋白质免疫新西兰大白兔进而获得多克隆抗血清。本发明获得了近江牡蛎AIF1基因编码框全序列，并通过构建原核表达载体，表达并纯化了可溶性的AIF1蛋白质产品，并制备了其多克隆兔抗血清。其多克隆兔抗血清具有抑制近江牡蛎病原RLO和革兰氏阴性细菌LPS引起的炎症反应及细胞坏死和细胞凋亡的作用。
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公开(公告)号：CN100350056C
公开(公告)日：2007-11-21
申请号：CN200410052013.X
申请日：2004-11-02
Applicant: 中国科学院南海海洋研究所 , 浙江大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种栉孔扇贝病原类立克次氏体的原位杂交检测方法及用于该法的试剂盒。该法包括如下步骤：根据栉孔扇贝类立克次氏体在细菌分类学上具有保守功能的16S rDNA序列中的三段特有的DNA序列设计合成了地高辛标记的三条寡核苷酸探针，该特异探针与栉孔扇贝组织切片中类立克次氏体16s rRNA杂交结合后通过免疫学的抗原抗体反应扩大信号，然后经酶反应显色。该检测方法能直观地将病原检测与其病理变化结合起来；在高效、准确检测类立克次氏体的同时可由样本切片上分析感染率和感染强度；由于探针与16s rRNA的杂交是特异的，且信号经过了逐级放大，所以远较常规的染色观察检测灵敏、精确；而且检测结果杂交显色后的切片可长期保存。
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公开(公告)号：CN1775807A
公开(公告)日：2006-05-24
申请号：CN200510061771.2
申请日：2005-12-02
Applicant: 浙江大学
IPC: C07K16/18 , C12N15/09 , G01N33/577
Abstract: 九孔鲍免疫因子特异抗体的制备及其检测方法，该抗体的制备是先设计核转录因子(NF－kB)的特异引物，寻找比对编码框，将DNA结合域(DBD)和转录激活域(TAD)的编码框连入原核表达载体，转化大肠杆菌，经凝胶亲和柱纯化后，注射家兔得九孔鲍核转录因子的DBD和TAD两个多克隆抗体，该抗体可以用普通间接ELISA检测抗体效价。用两种抗体对九孔鲍核转录因子进行蛋白杂交(Western blotting)检测；亦可利用双抗体与二抗联用间接夹心酶联免疫反应试验(ELISA)检测九孔鲍核转录因子。本发明提供一种对养殖贝类，特别是九孔鲍免疫因子的检测技术，有助于对贝类分子免疫机理的研究，进而有助于利用现代生物技术防治贝类病害。
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公开(公告)号：CN1987464B
公开(公告)日：2012-03-14
申请号：CN200610053671.X
申请日：2006-09-29
Applicant: 浙江大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 磁捕获技术在NF-κB蛋白分离与检测中的应用。应用磁捕获分离、检测NF-κB蛋白的技术是先制备含NF-κB结合位点，且末端标记生物素的NF-κB探针。将生物素标记的NF-κB探针与链霉亲和素包被的Dynabead磁珠连接，形成DNA-磁珠复合物。取该复合物与细胞总蛋白抽提物进行结合，在磁性分离器中清洗DNA-磁珠-蛋白复合物，除去未结合的细胞蛋白，洗脱捕获的蛋白。用相应的抗体对洗脱下的蛋白进行Western印迹检测，进而验证该技术的有效性。该技术在分离蛋白的同时，还可以鉴定其活性，而且还能捕获疑是互作分子的蛋白。试验表明磁捕获NF-κB蛋白技术是一种多功能、实用的新技术，其将有助于在蛋白水平研究NF-κB蛋白。
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公开(公告)号：CN101205254A
公开(公告)日：2008-06-25
申请号：CN200710070419.4
申请日：2007-08-03
Applicant: 浙江大学
Abstract: 九孔鲍NF－κB(Ab－Rel)抗体的制备及其检测方法。按Ab－Rel全长cDNA序列，设计用于扩增RHD和TD片段的寡聚核苷酸引物，获得编码框表达载体pGEX－RHD和pGEX－TD；转化大肠杆菌重组蛋白的表达与鉴定，经凝胶亲和柱纯化后，注射家兔得到Ab－Rel的RHD和TD两个多克隆抗体，用间接夹心ELISA检测抗体的效价；用两种抗体对Ab－Rel的RHD和TD进行蛋白印迹(Western blotting)检测；亦可利用双抗体与二抗联用间接夹心酶联免疫反应试验(ELISA)检测Ab－Rel的RHD和TD。本发明提供一种对养殖贝类，特别是九孔鲍免疫因子的检测技术。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1987464A
公开(公告)日：2007-06-27
申请号：CN200610053671.X
申请日：2006-09-29
Applicant: 浙江大学
Abstract: 磁捕获技术在NF－κB蛋白分离与检测中的应用。应用磁捕获分离、检测NF－κB蛋白的技术是先制备含NF－κB结合位点，且末端标记生物素的NF－κB探针。将生物素标记的NF－κB探针与链霉亲和素包被的Dynabead磁珠连接，形成DNA－磁珠复合物。取该复合物与细胞总蛋白抽提物进行结合，在磁性分离器中清洗DNA－磁珠－蛋白复合物，除去未结合的细胞蛋白，洗脱捕获的蛋白。用相应的抗体对洗脱下的蛋白进行Western印迹检测，进而验证该技术的有效性。该技术在分离蛋白的同时，还可以鉴定其活性，而且还能捕获疑是互作分子的蛋白。试验表明磁捕获NF－κB蛋白技术是一种多功能、实用的新技术，其将有助于在蛋白水平研究NF－κB蛋白。
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公开(公告)号：CN1873026A
公开(公告)日：2006-12-06
申请号：CN200610050306.3
申请日：2006-04-11
Applicant: 浙江大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明提供一种对虾白斑综合症病毒(White spotsyndrome virus，WSSV)和桃拉综合症病毒(taura syndrome virus，TSV)的二温式多重PCR快速检测方法。该检测技术首先根据白斑综合症病毒和桃拉综合症病毒的基因保守序列设计两对特异引物，建立一种二温式多重PCR技术用于对虾病毒的同时复合检测的方法。该二温式多重PCR技术操作简便，特异性好，灵敏度高，既能缩短病原检测时间，又能节约检测费用，可用于对虾白斑综合症和桃拉综合症的同时早期检测，及各养殖时期虾体的健康状况调查研究，对控制对虾疾病的流行有着重要的意义，同时对于对虾的其它病原鉴别诊断有一定的参考价值。
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公开(公告)号：CN101565462A
公开(公告)日：2009-10-28
申请号：CN200910099040.5
申请日：2009-06-04
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，旨在提供大黄鱼体内的Pc－BPI蛋白质中的重组载体的构建和表达技术及其重组蛋白质在制备抗生素药物中的应用。该大黄鱼BPI－BN蛋白质具有SEQ IDNO：1所示的氨基酸序列。本发明利用基因工程技术，对大黄鱼Pc－BPI蛋白质的N末端结构域进行重组载体的构建和表达，获得重组BPI蛋白质。该重组BPI蛋白质具有极高效的杀灭弧菌的作用，可以作为绿色抗生素而在渔药开发以及人类医学中应用。
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公开(公告)号：CN101219214A
公开(公告)日：2008-07-16
申请号：CN200710067877.2
申请日：2007-04-06
Applicant: 浙江大学
CPC classification number: Y02A50/403
Abstract: 本发明涉及近江牡蛎类立克次体中一种类ompH外膜蛋白的全序列，本发明的类ompH外膜蛋白可以用于制备类外膜蛋白亚单位疫苗，目的是用于预防近江牡蛎类立克次体病。本发明主要技术要点：1.以近江牡蛎类立克次体特有的基因组DNA为模板，设计扩增类ompH外膜蛋白基因的引物，获得编码类ompH外膜蛋白的基因全序列；2.利用生物技术手段将类ompH外膜蛋白的基因片段克隆到合适的pGEM－T easy载体中，转入相应的大肠杆菌TG I宿主细胞中，获得表达载体pET－28a(+)－ompH；3.类ompH外膜蛋白的体外表达，Western－blot，SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法鉴定目的蛋白；4.利用亲和柱分离纯化重组类ompH外膜蛋白，制成亚单位疫苗。
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公开(公告)号：CN100366754C
公开(公告)日：2008-02-06
申请号：CN200510061853.7
申请日：2005-12-06
Applicant: 浙江大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 用于PCR检测近江牡蛎病原微生物的特异引物。它是用于应用PCR技术检测寄生于近江牡蛎体内的类立克次体这种病原微生物。本发明从近江牡蛎类立克次体16SrDNA的核酸序列中筛选出一对特异性引物，其序列为AGTCTGTGAATAATGGGCTA；TTATGCAGTTTGGATAGCAC；上述引物，可以被添加或删除一个或几个单核苷酸，但不影响应用于检测病原微生物Oceanrickettsia ariakensis的PCR反应；或与上述特异性引物相似度在80%以上的引物，且用于检测病原微生物Oceanrickettsia ariakensis。
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