公开(公告)号：CN103627684A

公开(公告)日：2014-03-12

申请号：CN201310589076.8

申请日：2013-11-20

Applicant: 浙江农林大学

Inventor： 周明兵 ,  汤定钦 ,  郑丽娜

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54

CPC classification number: C12N9/1241

Abstract: 本发明公开了一种Mariner-Like转座酶，本发明将毛竹中克隆到的活性转座酶或对其进行分子优化之后获得较高活性的植物MLE转座酶，为利用MLE转座子开发基因标签奠定了基础，为后基因组时代大规模分离和标记基因功能提供了有力保障。

公开(公告)号：CN102696478A

公开(公告)日：2012-10-03

申请号：CN201210215462.6

申请日：2012-06-19

Applicant: 浙江农林大学

Inventor： 桂仁意 ,  刘亚迪 ,  方伟 ,  汤定钦

IPC: A01H1/06

Abstract: 一种毛竹理化复合诱变育种方法，按如下五个步骤进行：—是毛竹种子的采集，种子净度≥90％，千粒重≥28g，含水率10％-14％，密封后4℃中保存备用。二是辐照射线选定为原子量137的铯γ射线作照射源，与两种诱变剂处理液。三是两种诱变剂处理液的配制。四是理化复合诱变处理，辐射剂量率1Gy/min，辐射剂量为30Gy，再用温水浸种十几小时吸水纸吸干表面水后，用浓度为0.04mmol/L的叠氮化钠(NaN3)溶液或甲基磺酸乙酯(EMS)溶液进行浸种诱变处理8h后取出用清水反复冲洗2h即成复合诱变处理的毛竹种子，再用该种子进行发芽试验，验证诱变效果和确定诱变剂量。本方法诱变的突变体多、性状变异多样，育种所需的优良性状选择余地大。

公开(公告)号：CN106811447B

公开(公告)日：2020-09-11

申请号：CN201710042731.6

申请日：2017-01-20

Applicant: 浙江农林大学

Inventor： 周明兵 ,  汤定钦

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19

Abstract: 本发明公开了一种具有高催化活性的Ppmar1转座酶V376A突变体，所述的Ppmar1转座酶V376A突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码所述Ppmar1转座酶V376A突变体的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。是将野生型Ppmar1转座酶376位置上的缬氨酸突变为丙氨酸。该Ppmar1转座酶V376A突变体催化转座子转座的活性是野生型转座酶的活性的2.59倍，为利用MLE转座子开发基因标签奠定了基础，为后基因组时代大规模分离和标记基因，研究基因的功能提供了新工具。

公开(公告)号：CN106701711B

公开(公告)日：2020-08-28

申请号：CN201710042725.0

申请日：2017-01-20

Applicant: 浙江农林大学

Inventor： 周明兵 ,  汤定钦

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N1/19 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种具有高催化活性的Ppmar1转座酶S171A突变体，所述的Ppmar1转座酶S171A突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码所述Ppmar1转座酶S171A突变体的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。是将野生型Ppmar1转座酶171位置上的丝氨酸突变为丙氨酸。该Ppmar1转座酶S171A突变体催化转座子转座的活性是野生型转座酶的活性的10倍，为利用MLE转座子开发基因标签奠定了基础，为后基因组时代大规模分离和标记基因，研究基因的功能提供了新工具。

公开(公告)号：CN106754815B

公开(公告)日：2020-09-11

申请号：CN201710042721.2

申请日：2017-01-20

Applicant: 浙江农林大学

Inventor： 周明兵 ,  汤定钦

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19

Abstract: 本发明公开了一种具有高催化活性的Ppmar1转座酶C296I突变体，所述的Ppmar1转座酶C296I突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码所述Ppmar1转座酶C296I突变体的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。是将野生型Ppmar1转座酶296位置上的半胱氨酸突变为异亮氨酸。该Ppmar1转座酶C296I突变体催化转座子转座的活性是野生型转座酶的活性的2.67倍，为利用MLE转座子开发基因标签奠定了基础，为后基因组时代大规模分离和标记基因，研究基因的功能提供了新工具。

公开(公告)号：CN106754815A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201710042721.2

申请日：2017-01-20

Applicant: 浙江农林大学

Inventor： 周明兵 ,  汤定钦

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19

Abstract: 本发明公开了一种具有高催化活性的Ppmar1转座酶C296I突变体，所述的Ppmar1转座酶C296I突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码所述Ppmar1转座酶C296I突变体的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。是将野生型Ppmar1转座酶296位置上的半胱氨酸突变为异亮氨酸。该Ppmar1转座酶C296I突变体催化转座子转座的活性是野生型转座酶的活性的2.67倍，为利用MLE转座子开发基因标签奠定了基础，为后基因组时代大规模分离和标记基因，研究基因的功能提供了新工具。

公开(公告)号：CN103627684B

公开(公告)日：2016-07-06

申请号：CN201310589076.8

申请日：2013-11-20

Applicant: 浙江农林大学

Inventor： 周明兵 ,  汤定钦 ,  郑丽娜

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54

Abstract: 本发明公开了一种Mariner-Like转座酶，本发明将毛竹中克隆到的活性转座酶或对其进行分子优化之后获得较高活性的植物MLE转座酶，为利用MLE转座子开发基因标签奠定了基础，为后基因组时代大规模分离和标记基因功能提供了有力保障。

公开(公告)号：CN103602654B

公开(公告)日：2016-02-24

申请号：CN201310589855.8

申请日：2013-11-20

Applicant: 浙江农林大学

Inventor： 周明兵 ,  汤定钦 ,  郑丽娜

IPC: C12N9/90 ,  C12N15/61

Abstract: 本发明公开了一种Mariner-Like转座酶，本发明将毛竹中克隆到的活性转座酶和对其进行分子优化之后获得较高活性的植物MLE转座酶，为利用MLE转座子开发基因标签奠定了基础，为后基因组时代大规模分离和标记基因功能提供了有力保障。

公开(公告)号：CN106916799B

公开(公告)日：2020-09-11

申请号：CN201710042523.6

申请日：2017-01-20

Applicant: 浙江农林大学

Inventor： 周明兵 ,  汤定钦

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19

Abstract: 本发明公开了一种具有高催化活性的Ppmar1转座酶D332S突变体，所述的Ppmar1转座酶D332S突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码所述Ppmar1转座酶D332S突变体的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。是将野生型Ppmar1转座酶332位置上的天冬氨酸突变为丝氨酸。该Ppmar1转座酶D332S突变体催化转座子转座的活性是野生型转座酶的活性的2.56倍，为利用MLE转座子开发基因标签奠定了基础，为后基因组时代大规模分离和标记基因，研究基因的功能提供了新工具。

公开(公告)号：CN106701710B

公开(公告)日：2020-08-28

申请号：CN201710042522.1

申请日：2017-01-20

Applicant: 浙江农林大学

Inventor： 周明兵 ,  汤定钦

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19

Abstract: 本发明公开了一种具有高催化活性的Ppmar1转座酶F302Q突变体，所述的Ppmar1转座酶F302Q突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码所述Ppmar1转座酶F302Q突变体的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。是将野生型Ppmar1转座酶302位置上的苯丙氨酸突变为谷氨酰胺。该Ppmar1转座酶F302Q突变体催化转座子转座的活性是野生型转座酶的活性的2.71倍，为利用MLE转座子开发基因标签奠定了基础，为后基因组时代大规模分离和标记基因，研究基因的功能提供了新工具。