公开(公告)号：CN116103340A

公开(公告)日：2023-05-12

申请号：CN202211433138.1

申请日：2022-11-16

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 刘薇 ,  马振玲 ,  岳岩磊 ,  张国只 ,  苏丽娟 ,  许君 ,  吴亚儒

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N15/64 ,  C12N15/113 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明利用一种基于CRISPR‑Cas9编辑技术得到敲除人Twist1基因的细胞系，其原理和最核心的关键技术是科学合理的构建了靶向人Twist1基因的sgRNA，然后将sgRNA克隆至带有Cas9基因的lentiCRISPR v2质粒并将质粒转染至细胞中，利用CRISPR‑Cas9系统达到基因沉默，通过药物筛选和亚克隆的方法最后获得阳性单克隆细胞株，从而获得人源Twist1敲除的293T细胞系。在SeV感染后促进了IFN‑β的产生，用于宿主抗病毒的天然免疫相关疾病等研究，也为研发抗病毒靶点药物提供了新思路。填补了国内外相关技术的空白，具有较大的应用研究价值，社会和经济效益巨大。