公开(公告)号：CN119101704A

公开(公告)日：2024-12-10

申请号：CN202411268806.9

申请日：2024-09-11

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 温鑫 ,  史雪盟 ,  许君 ,  刘明扬 ,  徐俊飞 ,  刘名洋 ,  王朝颜

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10 ,  C12Q1/02 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明涉及一种稳定敲除ifitm1基因的HepG2.215细胞系构建方法及其应用，基于CRISPR‑Cas9编辑技术得到敲除人ifitm1基因的HepG2.215细胞系，科学合理的构建了靶向人ifitm1基因的sgRNA，然后将sgRNA克隆至带有Cas9基因的LentiCRISPRV2‑PURO质粒，并将质粒转染至HepG2.215细胞中，利用CRISPR‑Cas9系统达到基因沉默，通过药物筛选的方法最后获得阳性细胞株，从而获得人源ifitm1敲除的HepG2.215细胞系。IFITM1敲除后HepG2.215细胞中的HBV显著升高，以此用于宿主抗HBV病毒的天然免疫相关疾病等研究，也为研发抗病毒靶点药物提供了新思路，具有较大的应用研究价值，社会和经济效益巨大。

公开(公告)号：CN119464379A

公开(公告)日：2025-02-18

申请号：CN202411644194.9

申请日：2024-11-18

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 史雪盟 ,  温鑫 ,  刘名洋 ,  王靖仪 ,  陈帅武 ,  许君 ,  闫妍 ,  周亚婷

IPC: C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N15/12 ,  A61K48/00 ,  A61K38/46 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种猪ATP6v0d2(sATP6v0d2)敲除PK15细胞系的构建方法及其在抑制乙型脑炎病毒感染中的应用。本发明提供了特异性靶向sATP6v0d2的sgRNA，结合CRI SPR/Cas9基因编辑技术在猪肾PK15细胞中实现了sATP6v0d2基因的敲除，获得的单克隆细胞能够显著抑制乙型脑炎病毒的感染，对乙型脑炎疾病的防治具有重要意义。本方法简便高效，构建的细胞系可广泛应用于ATP6v0d2基因功能以及乙型脑炎病毒感染相关的研究，具有广阔的应用前景。