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公开(公告)号：CN117070567A
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202310795095.X
申请日：2023-06-30
Applicant: 江苏省农业科学院 , 韩国首尔国立大学 , 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心
Inventor： 谢星 , 冯志新 , 宋錞燮 , 陈蓉 , 郝飞 , 徐路路 , 廉旻珠 , 林鍾佑 , 张磊 , 甘源 , 赵龙 , 李文良 , 熊祺琰 , 刘永杰 , 刘蓓蓓 , 于岩飞 , 白昀 , 邵国青
Abstract: 本发明提供一种兼用于猪呼吸道和消化道的病毒载体递送系统及其应用，属于生物技术领域。该病毒载体递送系统，包括骨架质粒和辅助质粒：所述骨架质粒是在pUC57质粒中插入了B型猪肠道病毒全长cDNA后得到的；所述辅助质粒是将绿色荧光蛋白编码基因插入质粒pCAG‑T7‑polymerase中所得。本发明病毒载体递送系统，建效率高，感染细胞后能够快速产生细胞病变，病毒滴度可达到107.75 TCID50/mL，且保持稳定性高。在骨架质粒中插入猪呼吸道和消化道病原表位，无致病性，稳定性好，病毒滴度高，接种猪只后，具有较好的免疫效果。因此，本发明病毒载体递送系统可用于构建多种猪呼吸道和消化道疫苗候选毒株。
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公开(公告)号：CN117281893A
公开(公告)日：2023-12-26
申请号：CN202311261238.5
申请日：2023-09-27
Applicant: 江苏省农业科学院 , 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心
Abstract: 本发明提供一种非洲猪瘟病毒多肽疫苗，属于兽医领域。该非洲猪瘟病毒多肽疫苗，包括抗原，所述抗原含有多肽P1和P2，所述多肽P1和P2的氨基酸序列如SEQ ID NO:1‑2所示。本发明采用多肽P1和P2或P1、P2和P3作为疫苗抗原，能够高效刺激外周血单个核细胞增殖，显著增强全身性细胞免疫反应，显著提高IFN‑γ分泌细胞的数量，显著提高全身性Th1反应的效果。以P1、P2和P3为抗原的疫苗免疫后，对猪只具有良好的安全性，能够高效刺激猪产生特异性的循环抗体IgG及局部黏膜抗体IgA，诱导猪产生偏向CD4+T细胞的免疫应答。
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公开(公告)号：CN107338225B
公开(公告)日：2020-08-28
申请号：CN201710556520.4
申请日：2017-07-10
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明提供猪支气管上皮细胞系、制备方法及其应用，属于生物技术领域。猪支气管上皮细胞系hTERT‑PBEC，保藏编号为CCTCC NO：C201749。该细胞系hTERT‑PBEC的制备方法，包括构建携带绿色荧光蛋白基因和人端粒酶逆转录酶基因的真核表达载体pEGFP‑hTERT；利用Lipofectamin 3000将真核表达载体pEGFP‑hTERT转染猪原代支气管上皮细胞，通过G418筛选得到猪支气管上皮细胞系hTERT‑PBEC。本发明通过巧妙的方法，显著提高了筛选效率，得到的猪支气管上皮细胞系，能够稳定传代至60代以上，且保留有原代细胞的特性，能够应用于研究猪呼吸道病原感染致病机理中。
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公开(公告)号：CN110904060A
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201911307538.6
申请日：2019-12-18
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明提供猪肺炎支原体毒力因子NADH氧化酶及其应用，属于生物技术领域。该NADH氧化酶氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，编码基因核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明还提供含有所述编码基因的重组载体、重组菌或细胞系。本发明首次发现猪肺炎支原体NADH氧化酶是一种毒力因子，具有结合纤溶酶原及纤连酶原的能力，对猪支气管上皮细胞具有黏附能力，能够诱导宿主细胞的氧化应激、释放乳酸脱氢酶和凋亡，因此可以应用于猪支原体肺炎新型疫苗及药物的制备。
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公开(公告)号：CN115074297B
公开(公告)日：2025-03-18
申请号：CN202210874063.4
申请日：2022-07-25
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明提供一种高效动物支原体培养基及其制备方法，属于动物医学领域。该高效动物支原体培养基，是在KM2培养基中添加FH和C4bp。本发明培养基的配制方法，包括如下步骤：在KM2培养基中添加无菌FH和C4bp，得到所述培养基。采用本发明动物支原体培养基能够显著提高动物支原体的CCU50值，显著降低疫苗生成成本和提高免疫效果。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111218433A
公开(公告)日：2020-06-02
申请号：CN201911308111.8
申请日：2019-12-18
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明提供猪肺炎支原体毒力因子NADH黄素氧化还原酶及其应用，属于生物技术领域。该猪肺炎支原体毒力因子NADH黄素氧化还原酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明首次发现了未知功能的猪肺炎支原体蛋白NADH黄素氧化还原酶的毒力因子功能，包括结合纤溶酶原及纤连酶原的能力，对猪支气管上皮细胞具有黏附能力，诱导宿主细胞的氧化应激、释放乳酸脱氢酶和凋亡，因此猪肺炎支原体蛋白NADH黄素氧化还原酶能够应用于制备猪支原体肺炎新型疫苗和药物。
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公开(公告)号：CN108094315A
公开(公告)日：2018-06-01
申请号：CN201711362236.X
申请日：2017-12-18
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明提供构建猪肺炎支原体小鼠发病模型的方法及鉴别强弱毒株的方法，属于动物模型领域。构建方法是对小鼠进行两次攻毒，第一次攻毒后13‑15天，获得小鼠发病模型；第二次攻毒是在第一次攻毒后42‑54小时进行的；每次攻毒时，向每只小鼠的左右鼻孔各滴入至少25μL 109CCU/ml的猪肺炎支原体培养物，然后对每只小鼠腹腔注射至少50μL 109CCU/ml的猪肺炎支原体培养物。鉴别强弱毒株的方法是构建小鼠发病模型，通过对小鼠肺脏病变进行评分等鉴别强弱毒株。本发明弥补了猪肺炎支原体体外细胞模型不能模拟体内环境的缺陷，也解决了多株猪肺炎支原体菌株在本体动物猪上进行试验的成本和场地等饲养环境的制约。
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公开(公告)号：CN119391562A
公开(公告)日：2025-02-07
申请号：CN202411386952.1
申请日：2024-09-30
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明提供一种可显著提高菌株滴度的猪肺炎支原体培养基及其应用，属于兽用生物制品领域。所述猪肺炎支原体培养基，是在含有巴马香猪血清的KM2培养基中添加L‑天冬酰胺、肌肉肌醇、花生四烯酸、尿素、组胺、丙酮酸钠、丙戊酸、甘油酸、溶血磷脂酸、L‑瓜氨酸、L‑谷氨酰胺和L‑亮氨酸后所得。本发明培养基，可以在低血清浓度下，显著提高猪肺炎支原体的生长速度和活菌滴度，降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN118878700A
公开(公告)日：2024-11-01
申请号：CN202410864481.4
申请日：2024-06-30
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , A61K39/385 , A61K39/39 , A61P37/04
Abstract: 本发明提供一种低敏性负载锰佐剂的铁蛋白纳米疫苗载体的制备方法和应用，属于纳米颗粒疫苗研究领域。所述载体是负载有锰佐剂的低敏性铁蛋白；所述低敏性铁蛋白自N端至C端由SpyCatcher003、linker、伸展肽和螺原体铁蛋白组成。本发明还提供所述纳米疫苗载体的制备方法，在厌氧环境下，将氯化锰溶液和双氧水溶液滴加到所述低敏性铁蛋白溶液中，进行反应，反应结束后用柠檬酸钠螯合游离的锰离子，离心，分离上清液，得到所述纳米疫苗载体。本发明还提供所述的低敏性负载锰佐剂的铁蛋白纳米疫苗载体的制备方法制备所得的纳米载体在疫苗上的应用。本发明载体，既不易刺激机体产生自身免疫反应，又能具有高效的免疫增强作用。
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公开(公告)号：CN117384925A
公开(公告)日：2024-01-12
申请号：CN202211510854.5
申请日：2022-11-29
IPC: C12N15/53 , C12N15/11 , C12N5/10 , C12N15/867 , G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种双荧光素报告IFN‑β启动子活性慢病毒质粒、报告细胞系及构建方法，本发明以plvx质粒为骨架通过引入Gluc分泌性荧光素酶基因作为报告基因，并且在该基因的下游反向串联Luc基因作为内参基因以归一化实验结果，合成了用于报告IFN‑β启动子活性的DNA片段组合物、构建了pIFNβ活性双荧光素酶报告系统稳转细胞系。本发明不仅解决了因为转染不同质粒的效率和细胞状态带来的实验差异，同时将分泌性荧光素酶报告基因和慢病毒包装系统结合使得整套系统更加适合高通量持续性实验的检测。
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