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公开(公告)号：CN104789682B
公开(公告)日：2019-05-17
申请号：CN201510213846.8
申请日：2015-04-29
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了检测甘蓝型油菜抗磺酰脲类除草剂基因BnALS3R的引物与应用，属于分子育种领域。引物SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2用于检测甘蓝型油菜抗磺酰脲类除草剂基因BnALS3R的方法为:以甘蓝型油菜总DNA作为模板，加入引物进行PCR扩增；PCR产物进行限制性核酸内切酶BsrDI消化；酶切产物用来区分含抗性基因BnALS3R的纯合型油菜、含抗性基因BnALS3R的杂合型油菜和不含抗性基因BnALS3R的纯合型油菜。本发明能快速、准确地检测油菜植株是否含有抗性基因BnALS3R，更精确检测所含除草剂基因是纯合型还是杂合型，从而快速有效地实现培育抗除草剂油菜新品种的育种目标。
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公开(公告)号：CN107058350A
公开(公告)日：2017-08-18
申请号：CN201710166233.2
申请日：2017-03-20
申请人： 江苏省农业科学院
CPC分类号： C12N9/1022 , C12N15/8205 , C12N15/8274 , C12Y202/01006
摘要： 本发明涉及一种基于体外定点突变获得的油菜抗多种ALS抑制剂类除草剂基因及应用，属于生物技术领域。该基因mALS3是在抗除草剂油菜M342的ALS3基因序列中引入一个新的突变位点，该位点位于ALS3基因的第560位，原来是C碱基，编码187位的丙氨酸，经突变成T碱基后则在187位变成了缬氨酸。本发明应用体外定点突变技术获得一个具有双突变位点即A187V和W556L的油菜mALS3基因，该双突变位在油菜基因组中尚未见文献报道。经过转基因拟南芥初步的功能验证，结果表明含此双突变位点的油菜mALS3基因对除草剂咪唑乙酰胺、苯磺隆、双氟磺酰胺和双草醚等多种ALS抑制剂类除草剂具有明显的抗性。该抗性基因可用于抗除草剂农作物的培育。
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公开(公告)号：CN103070068A
公开(公告)日：2013-05-01
申请号：CN201310054645.9
申请日：2013-02-21
申请人： 江苏省农业科学院
摘要： 本发明提供了一种基于ALS靶酶的抗除草剂油菜定向选育方法，属于植物性状选育方法。选择油菜生产或油菜育种需要的材料，将种子进行EMS处理，诱变种子经隔离扩繁至M2代，在以ALS为靶酶的除草剂选择压下，大群体定向筛选抗除草剂突变性状。为了提高获得突变性状的机率，定向筛选可连续多年或同年多点或多年多点进行，直至筛选到所需的突变材料。
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公开(公告)号：CN102766628A
公开(公告)日：2012-11-07
申请号：CN201210282863.3
申请日：2012-08-09
申请人： 江苏省农业科学院
摘要： 本发明公开一种转基因高油酸油菜W-4事件外源插入载体右边界旁测序列及其应用，涉及农业生物技术领域中转基因油菜的检测。本发明以转基因高油酸油菜W-4为材料，获得W-4事件外源插入载体右边界旁侧序列，其中1-495碱基为载体序列，496-785碱基为油菜基因组序列。该段基因组序列碱基组成特征：G+C含量为31.27%，A+T含量为68.73%。本发明依据该旁侧序列设计特异性引物，建立了转基因高油酸油菜外源基因整合事件W-4的事件特异性定性PCR检测方法。
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公开(公告)号：CN102224801B
公开(公告)日：2012-09-26
申请号：CN201110097939.0
申请日：2011-04-19
申请人： 江苏省农业科学院
摘要： 本发明提供了一种油菜多目标性状的快速聚合方法，属于植物育种方法。选择需要聚合的优异育种目标性状，冬季在当地温室配制单交组合，异地夏繁配制多亲本的复式杂交组合，将多个具有优异目标性状的亲本按育种需要进行组装与聚合；对已实现多目标育种性状重组聚合的复式杂交后代进行小孢子苗培养，构建双单倍体（DH）育种群体，实现多目标性状聚合后代目的基因型的快速固定与纯合；对实现多目标性状聚合的后代目的基因型按性状特性进行有效的田间和室内鉴定与筛选，重要目标性状进行分子标记辅助选择，选育符合育种目标的新材料。
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公开(公告)号：CN102224801A
公开(公告)日：2011-10-26
申请号：CN201110097939.0
申请日：2011-04-19
申请人： 江苏省农业科学院
摘要： 本发明提供了一种油菜多目标性状的快速聚合方法，属于植物育种方法。选择需要聚合的优异育种目标性状，冬季在当地温室配制单交组合，异地夏繁配制多亲本的复式杂交组合，将多个具有优异目标性状的亲本按育种需要进行组装与聚合；对已实现多目标育种性状重组聚合的复式杂交后代进行小孢子苗培养，构建双单倍体（DH）育种群体，实现多目标性状聚合后代目的基因型的快速固定与纯合；对实现多目标性状聚合的后代目的基因型按性状特性进行有效的田间和室内鉴定与筛选，重要目标性状进行分子标记辅助选择，选育符合育种目标的新材料。
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公开(公告)号：CN1226626C
公开(公告)日：2005-11-09
申请号：CN03113049.6
申请日：2003-03-25
申请人： 江苏省农业科学院经济作物研究所
IPC分类号： G01N33/53 , G01N33/543 , G01N33/532
摘要： 一种金标记免疫吸附法检测转Bt基因抗虫棉属于转Bt基因抗虫棉的检测方法。本方法是以硝酸纤维素膜为固相载体，将待测样品固定在硝酸纤维素膜上，用兔抗Bt毒蛋白抗体与膜上的Bt毒蛋白特异性反应，其特点是再用生物素标记的羊抗兔抗体与膜上的Bt毒蛋白特异性反应，最后再利用胶体金标记的链霉亲和素蛋白与标记羊抗兔抗体的生物素分子之间的高度亲和反应显示结果。因此，本方法具有灵敏度高，特异性强，操作简单，无需特殊设备，判断直观，非常适合对大量样品的检测。
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公开(公告)号：CN1515694A
公开(公告)日：2004-07-28
申请号：CN03152835.X
申请日：2003-08-26
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明涉及一种转基因植物GUS报告基因组化检测的改进方法，属于植物基因工程技术领域。该方法具体操作步骤为：A、配制GUS组化检测液：75～85mM磷酸钾缓冲液(pH7.0)，1.5～2.5mMK4Fe(CN)6，1.5～2.5mMK3Fe(CN)6，8～12mM EDTA，0.08～0.012％Triton X－100，0.8～1.2mg/ml X－Gluc；B、无菌条件下，切取待检植物组织块，浸没于上述检测液中；C、反应体系置于29～31℃环境中，保温40～60小时；D、观察反应体系中的组织块颜色，如组织块呈现蓝色，则说明该样品为GUS转基因阳性。本发明可以明显提高筛选鉴定转基因阳性植株的准确率。
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公开(公告)号：CN1437844A
公开(公告)日：2003-08-27
申请号：CN03113050.X
申请日：2003-03-25
申请人： 江苏省农业科学院经济作物研究所
IPC分类号： A01H1/02
摘要： 一种涉及棉花超强纤维种质库高效杂交育种方法，通过高效远缘杂交技术，包括克服种间杂交的不可交配性，杂交一代不育性及后代疯狂分离的新方法，从而克服了不可交配性，高度不育性以及野生不良性状的连锁累赘，经过人工选育，从不同的野生棉后代中分别培养出了超高品质种质系，构成了棉花高品质育种的种质基因库，为棉花高品质育种奠定了基因基础，也为开展纤维品质基因组学研究提供重要基因资源。因此，应用本发明的种间杂交方法，可以最大程度的利用多个野生棉的优异基因资源，创造出为育种可利用的高品质种质系，已育成超强纤维种质系列33个系，高强纤维种质系56个系，可满足纺80支以上高支纱的需求。
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