拟除虫菊酯类农药代谢物的广谱识别单链抗体及其应用

    公开(公告)号:CN110467677B

    公开(公告)日:2022-08-30

    申请号:CN201910770828.8

    申请日:2019-08-20

    Abstract: 本发明涉及一种拟除虫菊酯类农药代谢物的广谱特异性识别单链抗体及其应用,该单链抗体基因是以一株抗3‑苯氧基苯甲酸杂交瘤细胞株为模板,分别扩增其重链和轻链可变区基因进行构建,并在大肠杆菌中进行了可溶性表达,该单链抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示;该单链抗体对多种拟除虫菊酯农药的代谢/降解产物,即3‑苯氧基苯甲酸、3‑苯氧基苯甲醛和3‑苯氧基苯甲醇具有广谱识别能力,在拟除虫菊酯类农药代谢物广谱筛查检测中具有良好的应用前景,亦可以用于单种代谢物的快速筛查检测。

    基于核酸适体结构的荧光信号转变机制检测汞离子残留的方法

    公开(公告)号:CN102621120B

    公开(公告)日:2014-04-23

    申请号:CN201210095340.8

    申请日:2012-03-31

    Abstract: 本发明涉及一种基于核酸适体结构及荧光信号转变的机制检测汞离子残留的方法,是以标记有荧光素分子的汞离子核酸适体与标记有猝灭素的互补序列构成荧光检测体系,其中:汞离子核酸适体由27~28个碱基组成的茎环结构,拥有碱基GGAC和GTCC共价结合形成的茎,互补序列Q2的碱基序列为SEQIDNO.1;荧光检测体系检测汞离子残留的方法为:加入系列浓度的汞离子与互补序列Q2竞争结合核酸适体,根据荧光信号的变化来建立标准曲线,确定最低检出限和线性范围,然后对待测样品进行加标检测,根据标准曲线判断样品中汞离子含量。本方法快速简单,具有较高的灵敏度和选择性,样品需求量少,适用于实际样品中汞离子的检测。

    抗Cry1Ac毒素单链抗体的编码基因及免疫PCR检测方法

    公开(公告)号:CN102936598A

    公开(公告)日:2013-02-20

    申请号:CN201210474694.3

    申请日:2012-11-21

    Abstract: 本发明涉及一种抗Cry1Ac单链抗体的编码序列及噬菌体单链抗体检测Cry1Ac的免疫PCR方法。本发明从天然噬菌体抗体库中淘选获得单链抗体(scFv),其特征在于此单链抗体的特异性是由其重链、轻链可变区序列中CDR区序列决定。免疫PCR结果显示用荧光检测体系可以对Cry1Ac进行定量检测,检测范围在0.2-100ng/mL之间。本方法快速简单,具有较高的灵敏度,并且避免了传统免疫PCR过程中标记报告DNA分子的步骤,更简化了实验操作,具有潜在的实用价值。

    抗呕吐毒素DON单链抗体ScFv及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN101983970A

    公开(公告)日:2011-03-09

    申请号:CN201010102383.5

    申请日:2010-01-28

    Abstract: 本发明涉及一种抗呕吐毒素DON单链抗体ScFv及其制备与应用,属于生物制品领域。本发明从能够分泌抗呕吐毒素DON的单克隆抗体的杂交瘤细胞株McGill078中,通过PCR方法克隆获得该抗体重链和轻链的可变区基因Fab段,通过基因工程的方法将两个基因重组后,构建原核表达质粒载体,转化大肠杆菌表达出能够特异性识别呕吐毒素DON的ScFv抗体活性片段,然后对重组单链抗体ScFv进行纯化和复性;本发明用作呕吐毒素DON抗体的重组单链抗体ScFv具有与呕吐毒素DON结合的活性。其优点是:对呕吐毒素DON的识别与结合活性,使其可用于呕吐毒素DON的残留检测,具有人源化改造后治疗呕吐毒素DON中毒的抗体药物前景,所构建的转化载体质粒易于保存与大量生产。

    用于检测有机磷农药残留的免疫抗体及其应用

    公开(公告)号:CN1598586A

    公开(公告)日:2005-03-23

    申请号:CN200410041895.X

    申请日:2004-09-07

    Abstract: 本发明涉及一种用于检测有机磷农药残留免疫的抗体及其应用,其特征在于,以二乙基膦酸乙酸为半抗原,通过与牛血清蛋白(BSA)偶联制备成人工免疫原,并通过免疫新西兰大白兔制备成多克隆抗体或通过小鼠免疫、细胞融合、筛选及克隆化培养等过程制成单克隆抗体,所述的多克隆抗体或单克隆抗体可用于间接竞争性ELISA、直接ELISA或免疫试纸对有机磷类农药的残留进行检测。本发明的优点在于:所选择的半抗原具有多种有机磷类农药的通用结构,不需要进行结构改造,即可与蛋白质进行藕连后免疫动物,可用于食品,水源中多种有机磷类农药的筛选检测,充分显示了免疫检测技术的快速、简便的特点。

    海洋源枯草芽孢杆菌杀虫活性产物的培育方法及其应用

    公开(公告)号:CN1556195A

    公开(公告)日:2004-12-22

    申请号:CN200310112809.5

    申请日:2003-12-30

    Abstract: 本发明涉及一株海洋源枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)杀虫活性产物的培育方法及其应用。它以棉铃虫为指示试虫,采用浸虫法和筛选法对采自中国海域的海洋微生物进行了生物活性筛选,获得了一株高活性菌株;并接种于发酵培养基中培养,获得活性产物;该活性产物可溶解于水或缓冲液中,分子量大于8KD。该活性产物对多种农业害虫具有灭杀活性。本发明的优点在于:海洋源枯草芽孢杆菌杀虫活性产物的培育过程中所涉的原料容易获得,发酵条件简单,对设备要求低;获得的杀虫活性产物具有高效、广谱;活性产物源于微生物的次生代谢产物,对环境及非靶标生物安全,不会造成环境污染。

    基于反向荧光增强双通道信号的克百威免疫检测方法及抗体

    公开(公告)号:CN113899898B

    公开(公告)日:2023-12-19

    申请号:CN202111202710.9

    申请日:2021-10-15

    Abstract: 本发明公开了一种基于反向荧光增强双通道信号的克百威免疫检测方法,即利用竞争免疫层析法,将样品处理液与克百威单克隆抗体‑多巴胺包金探针混合后孵育,然后滴入样品垫,通过同时观察检测试纸条的颜色变化与荧光变化,判断样品中是否含有克百威;本申请通过观察多巴胺包金的紫红色条带与量子点的绿色荧光条带实现克百威的双信号快速检测,最低检测限3.13ng/mL;其中克百威单克隆抗体重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示,轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示;该方法通过荧光的恢复‑淬灭关系转换,将读取的信号和目标物浓度变为正相关关系,提高了检测灵敏度,具有操作简单、现场检测速度快的特点。

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