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公开(公告)号:CN116068202B
公开(公告)日:2024-10-22
申请号:CN202211737737.2
申请日:2022-12-30
Applicant: 南京岚煜生物科技有限公司 , 江苏华控生物科技有限公司
IPC: G01N33/68 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及一种筛选荧光免疫层析配对抗体的方法,包括以下步骤:S1双抗夹心Elisa配对初步筛选:用PBS将抗体一稀释至合适的浓度,进行酶标板包被;将抗体二标记HRP,2~8℃储存,待用;S2荧光微球标记抗体二复筛:采用羧基荧光微球标记抗体二,2~8℃储存;再用抗体一包被酶标板,并在包被抗体一的酶标板中加入梯度抗原进行孵育,孵育后加入荧光微球标记的配对抗体二,进行双抗体夹心孵育,孵育后清洗,进行荧光信号检测,根据信噪比值挑选出配对抗体进行荧光层析试纸条验证。
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公开(公告)号:CN116143920A
公开(公告)日:2023-05-23
申请号:CN202211734051.8
申请日:2022-12-30
Applicant: 南京岚煜生物科技有限公司 , 江苏华控生物科技有限公司
IPC: C07K16/26 , C12N5/20 , G01N33/74 , G01N33/543 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种胃泌素17的单克隆抗体及其细胞株的制备方法和运用,S1制备抗原:合成胃泌素17多肽,将偶联到BSA载体蛋白上,透析后获得胃泌素17抗原;S2免疫:抗原乳化,免疫小鼠;S3细胞融合:小鼠脾细胞悬液依次与小鼠骨髓瘤细胞sp2/0和混和10xHAT的胸腺细胞混合;S4将HAT培养基换成HT培养基,ELISA筛选;S5亚克隆:筛选出的阳性克隆用梯度稀释法进行亚克隆,直至筛选出纯合的阳性细胞株;S6腹水制备,收集于离心管中,4℃或‑20℃保存;S7单克隆抗体的纯化;S8双抗夹心法筛选抗体配对:筛选出一对抗体2C5和8B10。再应用胃泌素17抗体制备免疫层检测试纸条。
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公开(公告)号:CN114702572A
公开(公告)日:2022-07-05
申请号:CN202111443928.3
申请日:2021-11-30
Applicant: 南京岚煜生物科技有限公司 , 江苏华控生物科技有限公司
IPC: C07K14/795 , C07K1/107 , G01N33/82 , G01N33/558 , G01N33/548 , G01N33/531 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种25‑羟基维生素D3抗原制备方法及免疫层析试纸条,该方法包括以下步骤:取25‑羟基维生素D3、载体蛋白KLH、EDC和NHS;其中,25‑羟基维生素D3和NHS分别用DMF充分溶解分别得到小分子溶液和NHS溶液,载体蛋白KLH用PBS溶解得到载体蛋白KLH溶液,EDC用CHCl3溶解得到EDC溶液;将小分子溶液、EDC溶液和NHS溶液依次加入到混合容器中;向蒸干后的容器内加入DMF溶液充分溶解容器内壁上所有的干燥颗粒物,然后将容器内的DMF溶液缓慢滴加到载体蛋白溶液内;将过夜放置的溶液进行透析;得到25‑羟基维生素D3抗原。本发明的合成步骤简洁有效,得率高,抗原免疫原性强。
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公开(公告)号:CN119798409A
公开(公告)日:2025-04-11
申请号:CN202411964259.8
申请日:2024-12-30
Applicant: 江苏华控生物科技有限公司
IPC: C07K14/765 , C07K16/44 , C12P21/08 , G01N33/68 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种人同型半胱氨酸半抗原的合成及其抗体的制备方法和应用,其中人同型半胱氨酸半抗原的合成步骤为:S1‑1:配制BSA溶液、EDC溶液、NHS溶液和同型半胱氨酸HCY溶液;S1‑2:在BSA溶液中加入NHS溶液和EDC溶液,混匀后在37℃中振荡孵育,获得混合液一;S1‑3:配制PBS溶液,在4℃下,对混合液进行透析;S1‑4:将透析后的混合液一进行定量定容,加入同型半胱氨酸HCY溶液,混匀后37℃振荡孵育,获得混合液二;S1‑5:在4℃下,对混合液二进行透析,透析结束,制得人同型半胱氨酸半抗原。再采用人同型半胱氨酸半抗原制备抗体及应用在制备相应的检测试剂盒中。具有高灵敏度、高特异性。
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公开(公告)号:CN114354945A
公开(公告)日:2022-04-15
申请号:CN202111670946.5
申请日:2021-12-31
Applicant: 南京岚煜生物科技有限公司 , 江苏华控生物科技有限公司
IPC: G01N33/68 , G01N33/533 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及一种基于时间分辨免疫荧光分析仪检测抗体配对的抗体筛选方法,具体包括以下步骤:S1:制备荧光标记物,使用制备的荧光标记物标记抗体;S2:将抗体包被至固相载体中,并进行封闭;S3:将待检抗原加入所述步骤S2的固相载体中,使抗原与抗体相结合,形成抗原抗体复合物;S4:向所述步骤S3的固相载体中加入所述步骤S1中已荧光标记的抗体,进行孵育后,放入时间分辨免疫荧光分析仪进行检测,筛选抗体。该基于时间分辨免疫荧光分析仪检测抗体配对的抗体筛选方法提高了抗体筛选配对成功率,减轻了工作量,具有高通量筛选抗体配对的优点,同时提高了与POCT免疫层析技术平台抗体配对符合率。
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公开(公告)号:CN115754299B
公开(公告)日:2025-04-08
申请号:CN202211352128.5
申请日:2022-10-31
Applicant: 南京岚煜生物科技有限公司 , 江苏华控生物科技有限公司
IPC: G01N33/68 , G01N33/543 , G01N21/76
Abstract: 本发明涉及一种同型半胱氨酸检测试剂盒,包含试剂R1、试剂R2、试剂R3和试剂R4,所述试剂R1中包含S‑腺苷‑L‑同型半胱氨酸抗体包被的磁微粒和基础缓冲液一;所述试剂R2中包含重组S‑腺苷‑L‑同型半胱氨酸水解酶和基础缓冲液二;所述试剂R3中包含被可检测标记物标记的S‑腺苷‑L‑半胱氨酸结合物和基础缓冲液三;试剂R4中包含二硫苏糖醇和基础缓冲液四;还包括校准品,校准品包括HCY抗原和校准品稀释液,校准品稀释液包括pH值调节剂、无机盐离子、表面活性剂和稳定剂,稳定剂中包含牛血清白蛋白。该同型半胱氨酸检测试剂盒的稳定性好,便于使用和保存,且能提高检测结果的准确性。
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公开(公告)号:CN119020300A
公开(公告)日:2024-11-26
申请号:CN202411128449.6
申请日:2024-08-16
Applicant: 江苏华控生物科技有限公司
IPC: C12N5/20
Abstract: 本发明涉及一种杂交瘤细胞饲养层替代物Hybridoma Feeder添加因子及应用,添加因子的配方中包括:体积百分比为90%的DMEM培养基,体积百分比为10%的胎牛血清,浓度为1mM的草酰乙酸,浓度为1mM的丙酮酸钠,浓度为0.1‑0.5ug/mL的胰岛素,浓度为0.5‑2ng/mL的人白介素‑6,浓度为5‑15ng/mL佛波酯,浓度为1‑5ug/mL的LPS脂多糖,浓度为10‑30ug/mL的肽聚葡糖,浓度为BlyS/BAFF的0.1‑2ng/mL。经在小鼠细胞上的应用证明该配方能够完全替代饲养层细胞,能与饲养层细胞一样加快杂交瘤细胞的生长速度,在亚克隆过程中提高亚克隆效率,避免污染。
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公开(公告)号:CN117659157A
公开(公告)日:2024-03-08
申请号:CN202311815760.3
申请日:2023-12-27
Applicant: 江苏华控生物科技有限公司
IPC: C07K14/47 , C07K1/22 , C12N15/12 , C12N15/85 , C12N15/66 , G01N33/82 , G01N33/68 , G01N33/543 , G01N21/76
Abstract: 本发明涉及一种人胃内因子蛋白的表达方法及应用,表达方法步骤为:S1:选用上游引物和下游引物,以已保存有IF基因片段的T载体重组质粒为模板,通过PCR反应扩增IF目的基因;S2:将IF基因片段克隆到表达载体pCDNA3.1(+)上,构建IF基因的表达载体pCDNA3.1(+)‑IF;S3:将表达载体pCDNA3.1(+)‑IF转染至HEK293细胞株:用去内毒素试剂盒抽提质粒,将表达载体pCDNA3.1(+)‑IF线性化后转染至HEK293细胞中;再筛选出单克隆扩大培养;S4确验证并确定重组表达IF蛋白是否成功表达,再纯化表达成功的重组表达IF蛋白并测试蛋白活性。获得的重组IF蛋白的活性高。
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公开(公告)号:CN114349848B
公开(公告)日:2023-09-12
申请号:CN202111629271.X
申请日:2021-12-28
Applicant: 南京岚煜生物科技有限公司 , 江苏华控生物科技有限公司
IPC: C07K14/775 , C07K1/22 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种SAA重组蛋白及其制备方法和应用,该制备方法,包括以下步骤:S1重组质粒、转化与培养:将具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列对应的核苷酸序列的SAA重组质粒转化至BLR(DE3)菌,培养获得活化菌株,然后1:1000接种到LB培养基中,恒温振荡培养,进行摇瓶实验,诱导,离心得菌体;S2纯化:将所述步骤S1中离心得到的菌体沉淀进行细胞裂解,获得包涵体蛋白,His柱过柱纯化,8M尿素和260mM咪唑洗脱,获得SAA重组蛋白,透析复性获得最终SAA重组蛋白。本发明的制备方法可大幅提高重组血清淀粉样蛋白SAA抗原的产量和活性,且SAA重组蛋白在液体状态下稳定性好,能满足作为临床诊断的校准品要求,用作SAA免疫诊断试剂校准品和SAA检测试剂盒的制备。
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公开(公告)号:CN116068202A
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN202211737737.2
申请日:2022-12-30
Applicant: 南京岚煜生物科技有限公司 , 江苏华控生物科技有限公司
IPC: G01N33/68 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及一种筛选荧光免疫层析配对抗体的方法,包括以下步骤:S1双抗夹心Elisa配对初步筛选:用PBS将抗体一稀释至合适的浓度,进行酶标板包被;将抗体二标记HRP,2~8℃储存,待用;S2荧光微球标记抗体二复筛:采用羧基荧光微球标记抗体二,2~8℃储存;再用抗体一包被酶标板,并在包被抗体一的酶标板中加入梯度抗原进行孵育,孵育后加入荧光微球标记的配对抗体二,进行双抗体夹心孵育,孵育后清洗,进行荧光信号检测,根据信噪比值挑选出配对抗体进行荧光层析试纸条验证。
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