公开(公告)号：CN118086163A

公开(公告)日：2024-05-28

申请号：CN202410348884.3

申请日：2024-03-26

Applicant: 江南大学

Inventor： 沐万孟 ,  朱莺莺 ,  陆瑞 ,  赵明利

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/52 ,  C12N15/54 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12P17/16 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种观蓝染料的生物合成方法，属于微生物代谢工程技术领域。本发明构建的重组大肠杆菌是以大肠杆菌BL21(DE3)为出发菌株，将观蓝合成酶基因bpsA和4′‑磷酸酯基转移酶基因sfp2转入大肠杆菌中，并添加底物谷氨酰胺发酵合成观蓝；或再过表达谷氨酰胺合成酶基因glnA，并添加底物谷氨酸发酵合成观蓝。当添加1.46g/L谷氨酰胺时，重组菌EL1摇瓶发酵的观蓝产量可以达到6.009g/L；当添加1.46g/L谷氨酸时，重组菌EL4摇瓶发酵的观蓝产量最高可达5.241g/L，为生物合成法生产观蓝提供了思路。

公开(公告)号：CN118064344A

公开(公告)日：2024-05-24

申请号：CN202410348886.2

申请日：2024-03-26

Applicant: 江南大学

Inventor： 沐万孟 ,  朱莺莺 ,  陆瑞 ,  赵明利

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/52 ,  C12N15/54 ,  C12N15/55 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12P17/16 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种生产观蓝的重组大肠杆菌及应用，属于微生物代谢工程技术领域。本发明构建的重组大肠杆菌是以大肠杆菌BL21(DE3)为出发菌株，表达了观蓝合成酶基因bpsA、4′‑磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶基因sfp2、谷氨酰胺合成酶基因glnA、α‑酮戊二酸脱氢酶抑制酶基因odhI和谷氨酸脱氢酶基因gdh，以及来自Streptomyces chromofuscus的辅助蛋白基因Sc‑indB。本发明构建的重组大肠杆菌经摇瓶发酵培养48h后，观蓝的产量可以达到14.98g/L，具备工业化应用的潜力。