公开(公告)号：CN106591271B

公开(公告)日：2019-07-16

申请号：CN201710119423.9

申请日：2017-03-02

Applicant: 江南大学

Inventor： 张涛 ,  江波 ,  蒋航宇 ,  沐万孟 ,  缪铭

IPC: C12N9/78 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P13/10 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12N9/78 ,  A61K38/50 ,  A61P35/02 ,  C12N15/70 ,  C12P13/10 ,  C12Y305/03006

Abstract: 一种酶活和温度稳定性提高的精氨酸脱亚胺酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。该精氨酸脱亚胺酶突变体为酶活性中心附近的甘氨酸突变为脯氨酸，即Gly292 Pro。本发明利用定点突变技术对野生型精氨酸脱亚胺酶arcA编码基因进行分子改造，得到了一种突变体酶ADIG292P，相对于野生型精氨酸脱亚胺酶氨基酸序列的第292位甘氨酸突变为脯氨酸。本发明所述的定点突变改造的精氨酸脱亚胺酶与野生酶相比其酶活力提高了1.5倍，在40℃下的半衰期提高了5.43倍，解决了精氨酸脱亚胺酶催化瓜氨酸合成时，催化能力和温度稳定性低的问题，为高效合成瓜氨酸的工业化生产及医药应用奠定了基础。

公开(公告)号：CN106591271A

公开(公告)日：2017-04-26

申请号：CN201710119423.9

申请日：2017-03-02

Applicant: 江南大学

Inventor： 张涛 ,  江波 ,  蒋航宇 ,  沐万孟 ,  缪铭

IPC: C12N9/78 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P13/10 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12N9/78 ,  A61K38/50 ,  A61P35/02 ,  C12N15/70 ,  C12P13/10 ,  C12Y305/03006 ,  C12N2800/101

Abstract: 一种酶活和温度稳定性提高的精氨酸脱亚胺酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。该精氨酸脱亚胺酶突变体为酶活性中心附近的甘氨酸突变为脯氨酸，即Gly292 Pro。本发明利用定点突变技术对野生型精氨酸脱亚胺酶arcA编码基因进行分子改造，得到了一种突变体酶ADIG292P，相对于野生型精氨酸脱亚胺酶氨基酸序列的第292位甘氨酸突变为脯氨酸。本发明所述的定点突变改造的精氨酸脱亚胺酶与野生酶相比其酶活力提高了1.5倍，在40℃下的半衰期提高了5.43倍，解决了精氨酸脱亚胺酶催化瓜氨酸合成时，催化能力和温度稳定性低的问题，为高效合成瓜氨酸的工业化生产及医药应用奠定了基础。

公开(公告)号：CN106591270B

公开(公告)日：2018-09-21

申请号：CN201710058055.1

申请日：2017-01-23

Applicant: 江南大学

Inventor： 张涛 ,  江波 ,  蒋航宇 ,  沐万孟 ,  缪铭

IPC: C12N9/78 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 一株定点突变改造的基因工程精氨酸脱亚胺酶，属于基因工程技术领域。其氨基酸序列为SEQ ID No.1。所述定点突变的精氨酸脱亚胺酶氨基酸序列相对于天然的精氨酸脱亚胺酶氨基酸序列的第264位甘氨酸突变为脯氨酸。本发明所述的突变精氨酸脱亚胺酶与野生酶相比其有效pH作用范围得到一定的扩展，尤其在生理pH 7.4下仍具有较好的酶活性。随着有效pH作用范围的拓宽，突变酶在pH 5.5~7.5条件下，仍然具有较高的稳定性。因此解决了精氨酸脱亚胺酶在临床上对肿瘤治疗的应用上生理条件下普遍酶活力低、体内半衰期短的问题，为利用该酶及其编码基因来用于临床治疗创造好的条件。

公开(公告)号：CN106591270A

公开(公告)日：2017-04-26

申请号：CN201710058055.1

申请日：2017-01-23

Applicant: 江南大学

Inventor： 张涛 ,  江波 ,  蒋航宇 ,  沐万孟 ,  缪铭

IPC: C12N9/78 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12N9/78 ,  C12N15/70 ,  C12N2800/101 ,  C12Y305/03006

Abstract: 一株定点突变改造的基因工程精氨酸脱亚胺酶，属于基因工程技术领域。其氨基酸序列为SEQ ID No.1。所述定点突变的精氨酸脱亚胺酶氨基酸序列相对于天然的精氨酸脱亚胺酶氨基酸序列的第264位甘氨酸突变为脯氨酸。本发明所述的突变精氨酸脱亚胺酶与野生酶相比其有效pH作用范围得到一定的扩展，尤其在生理pH 7.4下仍具有较好的酶活性。随着有效pH作用范围的拓宽，突变酶在pH 5.5~7.5条件下，仍然具有较高的稳定性。因此解决了精氨酸脱亚胺酶在临床上对肿瘤治疗的应用上生理条件下普遍酶活力低、体内半衰期短的问题，为利用该酶及其编码基因来用于临床治疗创造好的条件。