公开(公告)号：CN119432786A

公开(公告)日：2025-02-14

申请号：CN202411451808.1

申请日：2024-10-17

Applicant: 江南大学

Inventor： 李会 ,  李嘉曦 ,  毛玉欣 ,  丁昊鑫 ,  张晓梅 ,  史劲松 ,  许正宏

IPC: C12N9/04 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P33/06 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种17β‑羟基类固醇脱氢酶突变体、工程菌及应用，以甲基双酮为底物，利用17β‑羟基类固醇脱氢酶突变体生物转化制备诺龙。其中，17β‑羟基类固醇脱氢酶是真菌Cochliobolus lunatus来源的17β‑羟基类固醇脱氢酶(17β‑HSDcl)，其突变体是将其164位的组氨酸His突变成缬氨酸Val的单突变体、151位的苏氨酸Thr突变成丙氨酸Ala的单突变体或164位与151位共同突变的双突变体。本发明以pET28a为表达质粒，实现了17β‑HSDcl突变体在E.coli BL21(DE3)中的异源表达。经过24h工程菌全细胞转化，单突变体H164V、单突变体T151A、双突变体H164V/T151A的诺龙产量分别是突变前的1.27倍、1.30倍、1.34倍。本发明为微生物工业化生产诺龙提供了基础。