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公开(公告)号：CN101974584A
公开(公告)日：2011-02-16
申请号：CN201010267199.6
申请日：2010-08-26
Applicant: 江南大学
IPC: C12P19/18
Abstract: 一种双果糖酐III的双酶耦合制备方法，属于功能性食品生物加工技术领域。本发明以蔗糖为底液，采用蔗糖果糖转移酶和菊糖果糖转移酶，通过双酶耦合催化反应来合成双果糖酐III。蔗糖底物浓度控制在20～300g/L，先用蔗糖果糖转移酶反应，添加量为1～20U/g底物，在30～55℃催化反应4～12小时，再加入菊糖果糖转移酶，添加量为2～15U/g底物，在40～60℃催化反应12～36小时，生物转化率超过35％。本发明生产方法简单，对环境无污染，所得到的双果糖酐III安全可靠，属于一种市场前景广阔的低热量新型甜味剂。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101974584B
公开(公告)日：2013-01-23
申请号：CN201010267199.6
申请日：2010-08-26
Applicant: 江南大学
IPC: C12P19/18
Abstract: 一种双果糖酐III的双酶耦合制备方法，属于功能性食品生物加工技术领域。本发明以蔗糖为底液，采用蔗糖果糖转移酶和菊糖果糖转移酶，通过双酶耦合催化反应来合成双果糖酐III。蔗糖底物浓度控制在20～300g/L，先用蔗糖果糖转移酶反应，添加量为1～20U/g底物，在30～55℃催化反应4～12小时，再加入菊糖果糖转移酶，添加量为2～15U/g底物，在40～60℃催化反应12～36小时，生物转化率超过35％。本发明所得到的双果糖酐III是一种低热量甜味剂。
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公开(公告)号：CN101914598A
公开(公告)日：2010-12-15
申请号：CN201010271528.4
申请日：2010-09-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种利用酶-膜耦合技术制备高纯度双果糖酐III的方法，属于功能性食品添加剂制备技术领域。本发明通过以下技术手段实现的：采用酶水解反应与超滤-纳滤膜分离集成反应器相结合，即时分离双果糖酐III（DFAIII），酶水解反应与膜分离选择连续操作或者间歇操作；先对菊糖进行充分溶解，然后对菊糖溶液采用菊糖果糖转移酶水解反应与超滤-纳滤膜分离耦合的技术制备DFAIII，得到纯度高达95%的DFAIII产品。本发明采用的酶-膜耦合技术，在酶解反应的同时连续地借助超滤-纳滤技术将反应产物——DFAIII等小分子物质分离出反应系统，以实现酶解反应的快速进行和菊糖果糖转移酶的循环利用，减少了间歇式反应存在灭酶的操作，提高了效率，降低了成本，有利于实现产业化。
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公开(公告)号：CN101906405A
公开(公告)日：2010-12-08
申请号：CN201010231286.6
申请日：2010-07-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种菊糖果糖转移酶的克隆及其高效表达，属于生物工程技术领域。本发明公开了一种菊糖果糖转移酶(IFTase)基因、其高表达重组大肠杆菌BL21-IFT的构建及诱导高效表达的方法。以产IFTase的金黄节杆菌(Arthrobacter aurescens)SK 8.001的DNA为模板，经PCR扩增获得编码IFTase的基因ift。采用特定核苷酸序列的引物进行扩增，获得重组DNA片段，经鉴定、酶切、连接，转化入宿主细胞，构建成IFTase高表达重组大肠杆菌BL21-IFT。将此阳性克隆子在含氨苄青霉素的LB培养基中活化，再接种于新鲜的含氨苄青霉素的LB液体培养基中，培养至OD600为0.4-1.2时，加入诱导剂、表面活性剂诱导表达，IFTase得到了高效表达。
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公开(公告)号：CN102492618A
公开(公告)日：2012-06-13
申请号：CN201110389531.0
申请日：2011-11-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种双膜耦合循环制备高浓度双果糖酐III的反应系统及制备方法，属于水解液的分离及浓缩技术领域。本发明将菊糖粉末加水溶解，加热至55-65℃温度，然后调节pH至5.0-6.0；将酶加入溶液中与菊糖进行酶水解反应1-5小时，得到菊糖水解液；用分子量为3-10kDa膜过滤水解液，将大分子量的酶保留并返回生物反应器中；然后用分子量为200-300Da的膜浓缩设备进行浓缩，将DFAIII浓缩并保留下来，透过的溶剂（水）重新返回到生物反应器中再利用。本发明实现了制取、分离、浓缩、酶和溶剂循环利用的合理集成及连续同步，不间断运行；连续循环制备，最大限度提高酶重复利用和制备高浓度DFAIII；同时节能、节约溶剂，大幅度减低生产成本，而且实现了工艺的简单化、合理化和清洁化生产。
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公开(公告)号：CN202322851U
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201120488142.9
申请日：2011-11-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本实用新型涉及一种双膜耦合循环制备高浓度双果糖酐III的反应系统，属于水解液的分离及浓缩技术领域。本实用新型由酶反应器，膜分离装置，膜浓缩装置，第一加压泵，第二加压泵，DFAIII容器，高浓度DFAIII容器，和高效液相检测组成；酶反应器与膜分离装置由第一加压泵相连接，膜分离装置又有酶液管道与酶反应器连接，膜分离装置由透过液管道与DFAIII容器连接，DFAIII容器与膜浓缩装置由第二加压泵相连接，膜浓缩装置有水循环管道与酶反应器连接，膜浓缩装置与高浓度DFAIII容器有管道相连接；膜分离装置与高效液相检测相连；本实用新型实现了制取、分离、浓缩、酶和溶剂循环利用的合理集成及连续同步，不间断运行；连续循环制备，最大限度提高酶重复利用和制备高浓度DFAIII；同时节能、节约溶剂，大幅度减低生产成本，而且实现了工艺的简单化、合理化和清洁化生产。
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