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公开(公告)号：CN113848321B
公开(公告)日：2023-12-05
申请号：CN202111131460.4
申请日：2021-09-26
Applicant: 武汉生物制品研究所有限责任公司
IPC: G01N33/573 , G01N33/58 , C07K16/40 , C07K16/06 , C07K1/22
Abstract: 本发明涉及一种流感疫苗TPCK‑胰酶残量检测试剂盒。所述试剂盒包括包被TPCK‑胰酶抗体的酶标板和HRP‑TPCK‑胰酶抗体，所述抗体使用TPCK‑胰酶免疫家兔获取抗血清经纯化所得。本发明具有定量、线性范围大、灵敏度高、特异性强、准确度高、重复性好、耐用性好、高通量等优点，可快速对MDCK细胞基质流感疫苗中的TPCK‑胰酶残量进行定量，为流感疫苗生产提供一种质控方法。
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公开(公告)号：CN116948975A
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202310692117.X
申请日：2023-06-11
Applicant: 武汉生物制品研究所有限责任公司
Abstract: 本发明提供一种IFNAR1基因敲除的MDCK细胞株及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。所述IFNAR1基因敲除的细胞株命名为MDCK‑IFNAR1‑KO，已于2023年5月9日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:C202390。该细胞株对多种流感病毒的亚型敏感，可用于分离流感病毒或生产流感疫苗。且该细胞株的胰酶消化时间相对于MDCK原始细胞大幅度缩短，不仅能提高流感疫苗生产效率，同时还能降低生产成本。
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公开(公告)号：CN119752799A
公开(公告)日：2025-04-04
申请号：CN202411710398.8
申请日：2024-11-27
Applicant: 武汉生物制品研究所有限责任公司
Abstract: 本发明提供一种PRSS1基因定点敲入的MDCK细胞株，所述细胞株是通过基因敲入技术在MDCK细胞的Rosa26基因位点处敲入经犬源密码子优化后的牛胰蛋白酶原基因PRSS1后得到；其中，所述Rosa26基因安全位点序列如SEQ ID No.1所示；优化后的PRSS1基因序列如SEQ ID No.2所示。本发明提供的敲入外源基因PRSS1的安全位点Rosa26，PRSS1敲入后对细胞的生长无影响，敲入基因蛋白能够正常表达。构建的细胞株能够自主表达胰蛋白酶原，在流感病毒培养过程中，可减少胰酶的添加量，降低潜在外源因子对流感病毒稳定性的影响，并提高H1N1型流感病毒的血凝滴度，可用于流感病毒疫苗的制备。
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公开(公告)号：CN116875557A
公开(公告)日：2023-10-13
申请号：CN202310692129.2
申请日：2023-06-11
Applicant: 武汉生物制品研究所有限责任公司
Abstract: 本发明提供一种Bcl‑xL基因敲除的MDCK细胞株及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。所述Bcl‑xL基因敲除的细胞株命名为狗肾细胞MDCK‑Bcl‑xL‑KO，已于2023年5月10日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2023108。该细胞株通过CRISPR/Cas9基因编辑系统分别构建出sgRNA载体和同源臂重组载体，并将两种载体共转染MDCK细胞，经单克隆细胞筛选和鉴定得到。该细胞株与MDCK原始细胞相比，具有更低的成瘤性和更高的病毒敏感性。
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公开(公告)号：CN119530163A
公开(公告)日：2025-02-28
申请号：CN202411692290.0
申请日：2024-11-25
Applicant: 武汉生物制品研究所有限责任公司
IPC: C12N5/10 , C12N15/12 , A61K39/215 , A61P31/16
Abstract: 本发明提供了一种FLNB基因敲除的MDCK细胞株及其构建方法和应用。所述FLNB基因敲除的细胞株命名为MDCK‑FLNB‑KO，已于2024年11月20日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:C2024391。其中，FLNB基因敲除利用CRISPR/Cas9技术，针对MDCK细胞的FLNB基因第1号外显子设计sgRNA，构建FLNB基因敲除载体质粒1和质粒2；将质粒1和质粒2转染进MDCK细胞，获得FLNB基因敲除的MDCK细胞株。该细胞株较原始MDCK细胞株黏附能力降低，应用于流感病毒培养产量更高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113848321A
公开(公告)日：2021-12-28
申请号：CN202111131460.4
申请日：2021-09-26
Applicant: 武汉生物制品研究所有限责任公司
IPC: G01N33/573 , G01N33/58 , C07K16/40 , C07K16/06 , C07K1/22
Abstract: 本发明涉及一种流感疫苗TPCK‑胰酶残量检测试剂盒。所述试剂盒包括包被TPCK‑胰酶抗体的酶标板和HRP‑TPCK‑胰酶抗体，所述抗体使用TPCK‑胰酶免疫家兔获取抗血清经纯化所得。本发明具有定量、线性范围大、灵敏度高、特异性强、准确度高、重复性好、耐用性好、高通量等优点，可快速对MDCK细胞基质流感疫苗中的TPCK‑胰酶残量进行定量，为流感疫苗生产提供一种质控方法。
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公开(公告)号：CN115772502B
公开(公告)日：2024-03-15
申请号：CN202210754324.9
申请日：2022-06-28
Applicant: 中国生物技术股份有限公司 , 武汉生物制品研究所有限责任公司
Abstract: 本发明提供一种唾液酸转移酶基因缺失的MDCK细胞株及其构建方法和应用。与原始MDCK细胞以及构建的MDCK‑st3gal2KO细胞相比，本发明采用CRISPR‑Cas9基因编辑方法构建的MDCK‑st3gal1KO细胞和MDCK‑st3galKO细胞能够提升对人流感病毒的敏感性。
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公开(公告)号：CN116179494B
公开(公告)日：2024-01-26
申请号：CN202211258618.9
申请日：2022-10-13
Applicant: 武汉生物制品研究所有限责任公司
Abstract: 本发明提供低成瘤性MDCK细胞株及其构建方法和应用。本发明自噬相关基因敲除的MDCK细胞株通过CRISPR Cas9基因编辑系统敲除lc3基因或者sqstm1基因，整体上获得了低成瘤性的细胞株，应用安全性更高。
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公开(公告)号：CN116179494A
公开(公告)日：2023-05-30
申请号：CN202211258618.9
申请日：2022-10-13
Applicant: 武汉生物制品研究所有限责任公司
Abstract: 本发明提供低成瘤性MDCK细胞株及其构建方法和应用。本发明自噬相关基因敲除的MDCK细胞株通过CRISPR Cas9基因编辑系统敲除lc3基因或者sqstm1基因，整体上获得了低成瘤性的细胞株，应用安全性更高。
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公开(公告)号：CN115772502A
公开(公告)日：2023-03-10
申请号：CN202210754324.9
申请日：2022-06-28
Applicant: 中国生物技术股份有限公司 , 武汉生物制品研究所有限责任公司
Abstract: 本发明提供一种唾液酸转移酶基因缺失的MDCK细胞株及其构建方法和应用。与原始MDCK细胞以及构建的MDCK‑st3gal2KO细胞相比，本发明采用CRISPR‑Cas9基因编辑方法构建的MDCK‑st3gal1KO细胞和MDCK‑st3galKO细胞能够提升对人流感病毒的敏感性。
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