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公开(公告)号：CN102492662B
公开(公告)日：2013-10-09
申请号：CN201110358688.7
申请日：2011-11-14
申请人： 武汉大学
IPC分类号： C12N7/01 , C12N7/02 , C12N15/62 , C12N15/866
摘要： 本发明公开了一种多色标记活体病毒颗粒的方法，其步骤：A、借助病毒展示系统，将绿色荧光蛋白与病毒囊膜蛋白GP64融合表达，构建出GP64上带有绿色荧光蛋白的重组病毒；B、金属配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+溶液加入胎牛血清的Grace’s培养基中培养sf宿主细胞；将构建的重组病毒Bac-EGFP加入培养的宿主细胞中进行病毒感染，置于培养箱中培养，收获子代病毒；C、收集，纯化双色标记的子代病毒颗粒，得到的子代病毒通过透射电镜，电感耦合等离子体质谱和激光扫描共聚焦显微镜表征其结构，测量其单颗病毒金属配合物含量及展示其单颗病毒的双荧光信号。操作简便，标记效率高，得到的标记病毒具有优异的荧光信号，能更好地满足实时示踪活病毒颗粒侵染宿主细胞研究的需要。
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公开(公告)号：CN102492662A
公开(公告)日：2012-06-13
申请号：CN201110358688.7
申请日：2011-11-14
申请人： 武汉大学
IPC分类号： C12N7/01 , C12N7/02 , C12N15/62 , C12N15/866
摘要： 本发明公开了一种多色标记活体病毒颗粒的方法，其步骤：A、借助病毒展示系统，将绿色荧光蛋白与病毒囊膜蛋白GP64融合表达，构建出GP64上带有绿色荧光蛋白的重组病毒；B、金属配合物[Ru(phen)2(dppz)]2+溶液加入胎牛血清的Grace’s培养基中培养sf宿主细胞；将构建的重组病毒Bac-EGFP加入培养的宿主细胞中进行病毒感染，置于培养箱中培养，收获子代病毒；C、收集，纯化双色标记的子代病毒颗粒，得到的子代病毒通过透射电镜，电感耦合等离子体质谱和激光扫描共聚焦显微镜表征其结构，测量其单颗病毒金属配合物含量及展示其单颗病毒的双荧光信号。操作简便，标记效率高，得到的标记病毒具有优异的荧光信号，能更好地满足实时示踪活病毒颗粒侵染宿主细胞研究的需要。
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公开(公告)号：CN102435746A
公开(公告)日：2012-05-02
申请号：CN201110287941.4
申请日：2011-09-26
申请人： 武汉大学
IPC分类号： G01N33/577 , G01N21/64
摘要： 本发明涉及一种病毒的检测方法，包括步骤：通过将目标病毒外膜的糖蛋白的抗体与磁性纳米/微球偶联得到免疫磁性纳米/微球，用该免疫磁性纳米/微球捕获样品中的目标病毒得到磁球病毒复合物，将生物素化的所述病毒的外膜的糖蛋白的抗体与磁球病毒复合物孵育，再与链霉亲和素偶联的量子点孵育得到磁球-病毒-量子点复合物，通过检测磁球-病毒-量子点复合物的荧光信号检测病毒。运用该方法，本发明实现了H9N2亚型禽流感活病毒的特异性识别，富集分离和高灵敏度的检测。本发明还提供了用于该方法的检测试剂盒。本方明具有操作简单，特异性强，灵敏度高等特点，整个检测过程可在一个小时内完成。
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公开(公告)号：CN105420199A
公开(公告)日：2016-03-23
申请号：CN201511026950.2
申请日：2015-12-31
申请人： 武汉大学
CPC分类号： C12N7/00 , C12N2710/14051 , C12N2710/16751
摘要： 本发明涉及一种借助宿主细胞的病毒包膜叶酸修饰方法。首先将叶酸功能化磷脂加入到包膜病毒宿主细胞的培养基中，利用细胞自身的代谢及细胞膜的流动性实现宿主细胞膜系统的叶酸修饰。继而用包膜病毒感染宿主细胞，利用病毒在宿主细胞膜系统上出芽获得包膜的过程，自然地实现病毒包膜的叶酸修饰。本方法将叶酸功能化磷脂嵌入病毒包膜的磷脂双分子层，因此不影响包膜病毒表面蛋白结构及其对细胞的识别功能。由于无需通过剧烈的化学反应或繁琐的基因工程方法改造病毒，有利于保持病毒的感染力。本发明可应用于病毒对非宿主细胞的靶向识别及转导。
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公开(公告)号：CN103555681A
公开(公告)日：2014-02-05
申请号：CN201310592905.8
申请日：2013-11-22
申请人： 武汉大学
摘要： 本发明涉及一种量子点标记包膜病毒核衣壳的方法。将融合了生物素受体肽序列的衣壳蛋白序列和催化受体肽生物素化的酶序列同时插入到病毒全基因组，得到重组病毒质粒，借助病毒质粒在宿主细胞内的复制过程实现核衣壳的生物素化，继而采用偶联有链霉亲和素的量子点实现对包膜病毒核衣壳的标记。本发明无需通过剧烈的化学反应改造和标记病毒，有利于保持病毒本身的侵染活性，且包膜病毒内部核衣壳的标记不影响包膜病毒表面及其对细胞的识别。本发明可应用于病毒侵染机理研究及与病毒相关的疾病治疗研究。
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公开(公告)号：CN103555681B
公开(公告)日：2015-06-03
申请号：CN201310592905.8
申请日：2013-11-22
申请人： 武汉大学
摘要： 本发明涉及一种量子点标记包膜病毒核衣壳的方法。将融合了生物素受体肽序列的衣壳蛋白序列和催化受体肽生物素化的酶序列同时插入到病毒全基因组，得到重组病毒质粒，借助病毒质粒在宿主细胞内的复制过程实现核衣壳的生物素化，继而采用偶联有链霉亲和素的量子点实现对包膜病毒核衣壳的标记。本发明无需通过剧烈的化学反应改造和标记病毒，有利于保持病毒本身的侵染活性，且包膜病毒内部核衣壳的标记不影响包膜病毒表面及其对细胞的识别。本发明可应用于病毒侵染机理研究及与病毒相关的疾病治疗研究。
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