公开(公告)号：CN102719468A

公开(公告)日：2012-10-10

申请号：CN201210190626.4

申请日：2012-06-11

Applicant: 武汉大学

Inventor： 梁毅 ,  朱应竹 ,  孟生荣 ,  郭童 ,  莫重瑛 ,  陈杰

IPC: C12N15/70 ,  C07K19/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本专利书公开了一种通过纤维形成片段来诱导蛋白质生长淀粉样纤维的方法。选择可以独立生长蛋白质淀粉样纤维的多肽序列，即纤维形成片段；用分子克隆的方法将纤维形成片段插入目标蛋白质的柔性结构和溶剂可及区域，然后诱导目标蛋白质形成淀粉样纤维。该方法在医学，化工等领域有比较重要的应用前景。

公开(公告)号：CN102242141A

公开(公告)日：2011-11-16

申请号：CN201110099528.5

申请日：2011-04-20

Applicant: 武汉大学

Inventor： 梁毅 ,  朱应竹 ,  孟生荣 ,  周拯 ,  莫重瑛 ,  陈杰

IPC: C12N15/70 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种寡氨基酸质粒的构建方法，其步骤：A、引物设计，设计并合成两对引物，分别为a，b和c，d；B、将两对引物a、b、c、d与同一质粒模板分别进行聚合酶链式反应；C、将（B）步骤中混合，再经过变性和复性的过程；D、模板消化后直接转化进入宿主细胞大肠杆菌BL21；用DnpI酶消化PCR反应产物，反应体系为：17mL，2mLTango缓冲液，1mLDnpI酶，反应条件为37°C,30min，用反应产物转化大肠杆菌LB21的感受态，挑选单克隆并测序鉴定；E、测序结果准确。方法简单，材料试剂相对低廉，省略了线性质粒平末端连接酶连接步骤，能显著提高质粒寡氨基酸突变的连接效率，有利于工业或医用放大生产。测序的成功率高达66%，是传统方法的5倍以上。