公开(公告)号：CN101914603B

公开(公告)日：2012-11-21

申请号：CN201010221511.8

申请日：2010-07-08

Applicant: 暨南大学

Inventor： 李弘剑 ,  蒋德旗 ,  苏正定 ,  周天鸿 ,  冉艳红

IPC: C12P21/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种利用乳糖诱导pMFH载体生产重组蛋白的发酵方法。本发明主要通过优化发酵培养基的配方、诱导前补料液的配方、诱导后补料液的配方、乳糖诱导液的配方以及发酵参数，成功运用乳糖替代IPTG作为诱导剂来诱导目的蛋白的表达。本发明的目的蛋白表达水平高，目的蛋白占菌体总蛋白的水平可达35～49％，与IPTG诱导水平相当。而且本发明在发酵过程中添加乳糖诱导后再补甘油作为碳源，既可大大提高生物量，又能减少代谢副产物乙酸的生成，还能避免由于发酵液中葡萄糖的存在而影响乳糖的诱导效果。可见，本发明不仅简便，发酵时间短，生产成本低，而且得到的产物中无毒害物质残留。

公开(公告)号：CN101914603A

公开(公告)日：2010-12-15

申请号：CN201010221511.8

申请日：2010-07-08

Applicant: 暨南大学

Inventor： 李弘剑 ,  蒋德旗 ,  苏正定 ,  周天鸿 ,  冉艳红

IPC: C12P21/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种利用乳糖诱导pMFH载体生产重组蛋白的发酵方法。本发明主要通过优化发酵培养基的配方、诱导前补料液的配方、诱导后补料液的配方、乳糖诱导液的配方以及发酵参数，成功运用乳糖替代IPTG作为诱导剂来诱导目的蛋白的表达。本发明的目的蛋白表达水平高，目的蛋白占菌体总蛋白的水平可达35～49％，与IPTG诱导水平相当。而且本发明在发酵过程中添加乳糖诱导后再补甘油作为碳源，既可大大提高生物量，又能减少代谢副产物乙酸的生成，还能避免由于发酵液中葡萄糖的存在而影响乳糖的诱导效果。可见，本发明不仅简便，发酵时间短，生产成本低，而且得到的产物中无毒害物质残留。