公开(公告)号：CN115181166A

公开(公告)日：2022-10-14

申请号：CN202210786836.3

申请日：2022-07-06

Applicant: 无锡中德伯尔生物技术有限公司 ,  无锡市水产畜牧技术推广中心

Inventor： 陆意 ,  李林 ,  毛爱民 ,  杨芝芬 ,  李花 ,  冯嘉林 ,  周虹妤

IPC: C07K14/09 ,  C12N15/42 ,  C12N15/70 ,  C12N15/62

Abstract: 本发明公开了一种O型口蹄疫病毒VP1蛋白的可溶性表达方法，以GenBank公布的KM243095.1基因为参考序列，根据大肠杆菌密码子嗜性，优化目的基因序列，合成目的基因；将目的基因克隆入pET32a(+)原核表达载体，转入大肠杆菌构建pET32a‑VP1重组质粒，随后进行pET32a‑VP1重组蛋白的诱导表达，并最终利用镍柱进行纯化。本发明根据大肠杆菌密码子嗜性对O型FMDV的基因序列进行部分优化，充分利用T7启动子、His纯化标签和Trx促溶标签的优点，结合密码子优化、在羧基端引入His标签和终止子、以及诱导表达条件的优化，实现了重组蛋白的可溶性表达，提高了纯化效率。