公开(公告)号：CN108690133B

公开(公告)日：2020-10-13

申请号：CN201810329370.8

申请日：2018-04-13

Applicant: 新疆农垦科学院

Inventor： 张小莺 ,  钟发钢 ,  杨艳丽 ,  吴桐忠 ,  张星星 ,  韩猛立 ,  黄新 ,  何延华

IPC: C07K16/00 ,  C07K1/22 ,  C07K1/14

Abstract: 一种IgY纯化方法，包括以下步骤：用IgY免疫双峰驼通过噬菌体展示、生物亲和淘选获得到抗IgY的纳米抗体；取4FF凝胶填料2‑4g，依次用体积比为20％、50％、70％的DMSO溶液清洗，并用水清洗抽干；之后依次加入DMSO、NaBH4、NaOH和环氧氯丙烷，得到填料混合物；将上述纳米抗体与Na2CO3溶液，与上述得到的填料混合物偶联；偶联结束后加入Glycine甘氨酸，再用10‑20倍柱床体积的NaCl溶液清洗柱子，获得偶联了纳米抗体的亲和柱；将需要纯化的IgY样品加入纳米抗体亲和柱中偶联，结束后用PBS清洗柱子；最后用甘氨酸盐酸将IgY从柱子上洗脱下来，随即对洗脱下来的IgY用PH＝8.0的甘氨酸盐酸进行中和，避免IgY在酸性条件下失去活性，到此步骤已获得高纯度的IgY。

公开(公告)号：CN108690133A

公开(公告)日：2018-10-23

申请号：CN201810329370.8

申请日：2018-04-13

Applicant: 新疆农垦科学院

Inventor： 张小莺 ,  钟发钢 ,  杨艳丽 ,  吴桐忠 ,  张星星 ,  韩猛立 ,  黄新 ,  何延华

IPC: C07K16/00 ,  C07K1/22 ,  C07K1/14

CPC classification number: C07K16/00

Abstract: 一种IgY纯化方法，包括以下步骤：用IgY免疫双峰驼通过噬菌体展示、生物亲和淘选获得到抗IgY的纳米抗体；取4FF凝胶填料2‑4g，依次用体积比为20％、50％、70％的DMSO溶液清洗，并用水清洗抽干；之后依次加入DMSO、NaBH4、NaOH和环氧氯丙烷，得到填料混合物；将上述纳米抗体与Na2CO3溶液，与上述得到的填料混合物偶联；偶联结束后加入Glycine甘氨酸，再用10‑20倍柱床体积的NaCl溶液清洗柱子，获得偶联了纳米抗体的亲和柱；将需要纯化的IgY样品加入纳米抗体亲和柱中偶联，结束后用PBS清洗柱子；最后用甘氨酸盐酸将IgY从柱子上洗脱下来，随即对洗脱下来的IgY用PH＝8.0的甘氨酸盐酸进行中和，避免IgY在酸性条件下失去活性，到此步骤已获得高纯度的IgY。