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    与番茄雄性不育基因紧密连锁的SRAP分子标记及其获得方法
    2.
    发明授权
    与番茄雄性不育基因紧密连锁的SRAP分子标记及其获得方法 失效

    公开(公告)号：CN104120126B

    公开(公告)日：2016-10-26

    申请号：CN201410395154.5

    申请日：2014-08-12

    Applicant: 新疆农业科学院园艺作物研究所

    Inventor： 王强 ,  杨涛 ,  李宁 ,  唐亚萍 ,  王柏柯 ,  杨生保 ,  帕提古丽·艾斯木托拉 ,  余庆辉

    IPC: C12N15/11 ,  C12Q1/68

    Abstract: 本发明公开了与番茄雄性不育基因紧密连锁的SRAP分子标记及其获得方法，以番茄紫茎可育87‑5为父本，苗期绿茎雄性不育型番茄为母本，杂交产生F1代，自交构建F2分离群体。用集群分离分析法对雄性不育基因ms进行了SRAP标记分析，通过SRAP前、后引物的随机组合，选取了544对引物组合在雄性不育、可育池间筛选，标记为C10B9_1、C10B9_4在两DNA池间表现为多态性。利用这两个标记对F2分离群体进行SRAP标记验证，通过连锁分析发现，C10B9_1、C10B9_4与不育基因ms的连锁距离分别为3.3cM和‑3.3cM。利用此分子标记可以进行番茄雄性不育辅助选育，缩短转育周期，提高转育效率，可省去转育过程中每代需自交鉴定其不育性的繁琐程序，将传统的表现型选择转化为基因型选择，提高选择的准确性和科学性。

    与番茄苗期耐盐主效QTL紧密连锁的分子标记及其应用
    3.
    发明公开
    与番茄苗期耐盐主效QTL紧密连锁的分子标记及其应用 失效

    公开(公告)号：CN101974511A

    公开(公告)日：2011-02-16

    申请号：CN201010274441.2

    申请日：2010-09-07

    Applicant: 新疆农业科学院园艺作物研究所

    Inventor： 王柏柯 ,  余庆辉 ,  杨生保 ,  帕提古丽 ,  杨涛

    IPC: C12N15/10 ,  C12Q1/68

    Abstract: 本发明公开了与番茄苗期耐盐主效QTL紧密连锁的分子标记的获得方法。通过番茄苗期耐盐主效QTL定位；选择番茄苗期的M82和耐盐渐渗系IL7-5杂交，得到杂种F1自花授粉获得群体F2，通过盐胁迫处理，筛选耐盐亚渐渗系7-5-5和盐敏感品种M82之间具有多态性的分子标记；利用已筛选的IL7-5-5上的侧翼标记对F2群体进行筛选，建立重组F2群体和遗传分析；通过耐盐成活率与遗传连锁图中的标记检测，确定了与番茄苗期耐盐主效QTL紧密连锁的分子标记。本发明不受环境条件的影响，对特定苗期耐盐材料的后代及衍生品系在早代进行筛选，节约成本，提高育种和选择效率。

    一种CRISPR介导的快速检测植物基因功能的系统
    6.
    发明公开
    一种CRISPR介导的快速检测植物基因功能的系统 无效

    公开(公告)号：CN111139262A

    公开(公告)日：2020-05-12

    申请号：CN201911380897.4

    申请日：2019-12-27

    Applicant: 新疆农业科学院园艺作物研究所

    Inventor： 唐亚萍 ,  杨涛 ,  王柏柯 ,  杨生保 ,  李宁 ,  王娟 ,  张国儒 ,  帕提古丽·艾斯木托拉 ,  余庆辉

    IPC: C12N15/83 ,  A01H5/10

    Abstract: 本发明公开了一种CRISPR介导的快速检测植物基因功能的系统，其特征在于，在Cas蛋白转基因植株中转入含有目的基因gRNA序列的重组病毒载体。本发明克服了现有植物研究领域中采用CRISPR/Cas系统要得到纯合突变体至少需要通过两到三代的植物生长周期的技术缺陷，提供了一种可以快速研究植物基因功能的系统，通过在已经转入Cas基因的转基因植株中转入含有gRNA序列的重组病毒载体，可以于当代检测目的基因的功能；并且由于转入了含有gRNA序列的重组病毒载体，在受感染植株体内形成sgRNA，引导Cas9对目标基因进行切割，有机会获得基因突变的种子，大大缩短了实验耗时和脱靶失败的概率。

    一种创制果实高番茄红素含量的番茄材料的方法
    7.
    发明公开
    一种创制果实高番茄红素含量的番茄材料的方法 无效

    公开(公告)号：CN110777163A

    公开(公告)日：2020-02-11

    申请号：CN201911253430.3

    申请日：2019-12-09

    Applicant: 新疆农业科学院园艺作物研究所

    Inventor： 王娟 ,  王柏柯 ,  李宁 ,  余庆辉 ,  黄少勇

    IPC: C12N15/82 ,  C12N15/113 ,  A01H5/00 ,  A01H6/82

    Abstract: 本发明属于番茄生物技术和转基因技术领域，公开一种通过基因编辑创制果实高番茄红素含量的番茄材料的方法。本发明通过设计SISGR1基因的编辑靶位点，构建pCGR1301-CRISPR/Cas9-gRNA表达载体，利用农杆菌介导法转化到果实低番茄红素含量的番茄材料中，通过抗生素筛选获得阳性T0代转基因番茄植株；T0代自交获得T1代植株，从T1代中筛选不含有外源转基因成份但SISGR1基因发生纯合突变且果实番茄红素含量高的植株，即为高番茄红素材料。本方法可以显著地提高番茄果实中番茄红素的含量，在番茄高品质分子育种中具有良好的应用前景。

    一种鉴别番茄耐盐性状的分子标记方法
    8.
    发明授权
    一种鉴别番茄耐盐性状的分子标记方法 失效

    公开(公告)号：CN101831497B

    公开(公告)日：2012-07-04

    申请号：CN201010168152.4

    申请日：2010-05-11

    Applicant: 新疆农业科学院园艺作物研究所

    Inventor： 杨生保 ,  帕提古丽 ,  王柏柯 ,  余庆辉 ,  杨涛

    IPC: C12Q1/68

    Abstract: 本发明提供的一种鉴别番茄耐盐性状的分子标记方法，包括以下步骤：1)番茄耐盐主效基因定位；2)人工设计合成一对核苷酸序列作为引物，该引物是由碱基组成的特定序列的寡聚体，其中正向引物：5’GCCAATCCAAACAAACCA’3，反向引物：5’CATTGTCTCCTTCGCCTCG’3；3)提取番茄基因组的DNA，利用引物对番茄基因组DNA进行PCR扩增，无需特异性内切酶酶切，就可得到有差异的产物条带，利用此标记PCR产物片断的大小可鉴别出番茄耐盐材料和盐敏感材料；4)PCR产物在1.5％琼脂糖凝胶上电泳、溴化乙锭染色，用凝胶成像系统观察拍照得耐盐材料PCR产物有1000bp的1条谱带，盐敏感材料有900bp的1条谱带。方法步骤为：定位耐盐基因，选用含有耐盐基因的渐渗系片断，提取幼苗的DNA；建立CAPS反应体系；将PCR产物选用限制性内切酶消化控制等。

    SlMADS1基因在调节番茄红素含量中的应用
    9.
    发明公开
    SlMADS1基因在调节番茄红素含量中的应用 审中-实审

    公开(公告)号：CN119082137A

    公开(公告)日：2024-12-06

    申请号：CN202411479226.4

    申请日：2024-10-23

    Applicant: 新疆农业科学院园艺作物研究所

    Inventor： 杨海涛 ,  贾春平 ,  杨涛 ,  王娟 ,  王柏柯 ,  余庆辉

    IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/82

    Abstract: 本发明公开了SlMADS1基因在调节番茄红素含量中的应用，属于植物基因工程和基因遗传修饰技术领域。本发明通过设计SlMADS1基因的编辑靶位点，构建pCAMBIA1300‑CRISPR/Cas9‑gRNA表达载体，利用农杆菌介导法转化到果实低番茄红素含量的番茄材料中，通过抗生素筛选获得阳性T0代转基因番茄植株；T0代自交获得T1代植株，从T1代中筛选不含有外源转基因成分但SlMADS1基因发生纯合突变且果实番茄红素含量高的植株，即为高番茄红素材料。本发明可以显著地提高番茄果实中番茄红素的含量，在番茄高品质分子育种中具有良好的应用前景。

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