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公开(公告)号:CN107937397B
公开(公告)日:2020-02-14
申请号:CN201810022725.9
申请日:2018-01-10
Applicant: 新疆农业科学院园艺作物研究所
IPC: C12N15/11 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明属于生物技术工程和番茄雄性不育遗传育种技术领域,具体公开一种与番茄雄性不育基因紧密连锁的SNP分子标记及其获得方法和应用,SNP位点是在简化基因组测序基础上,通过关联分析而获得;SNP223标记是利用含有SNP位点的多态性DNA片段,通过设计特异性引物而获得。实验证明,与番茄雄性不育基因紧密连锁的SNP标记可用于番茄雄性不育系的辅助选择育种,与第二代分子标记相比,检测方式更为准确,检测效率也更高。
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公开(公告)号:CN101831497A
公开(公告)日:2010-09-15
申请号:CN201010168152.4
申请日:2010-05-11
Applicant: 新疆农业科学院园艺作物研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明提供的一种鉴别番茄耐盐性状的分子标记方法,包括以下步骤:1)番茄耐盐主效基因定位;2)人工设计合成一对核苷酸序列作为引物,该引物是由碱基组成的特定序列的寡聚体,其中正向引物:5’GCCAATCCAAACAAACCA’3,反向引物:5’CATTGTCTCCTTCGCCTCG’3;3)提取番茄基因组的DNA,利用引物对番茄基因组DNA进行PCR扩增,无需特异性内切酶酶切,就可得到有差异的产物条带,利用此标记PCR产物片断的大小可鉴别出番茄耐盐材料和盐敏感材料;4)PCR产物在1.5%琼脂糖凝胶上电泳、溴化乙锭染色,用凝胶成像系统观察拍照得耐盐材料PCR产物有1000bp的1条谱带,盐敏感材料有900bp的1条谱带。方法步骤为:定位耐盐基因,选用含有耐盐基因的渐渗系片断,提取幼苗的DNA;建立CAPS反应体系;将PCR产物选用限制性内切酶消化控制等。
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公开(公告)号:CN104120126A
公开(公告)日:2014-10-29
申请号:CN201410395154.5
申请日:2014-08-12
Applicant: 新疆农业科学院园艺作物研究所
Abstract: 本发明公开了与番茄雄性不育基因紧密连锁的SRAP分子标记及其获得方法,以番茄紫茎可育87-5为父本,苗期绿茎雄性不育型番茄为母本,杂交产生F1代,自交构建F2分离群体。用集群分离分析法对雄性不育基因ms进行了SRAP标记分析,通过SRAP前、后引物的随机组合,选取了544对引物组合在雄性不育、可育池间筛选,标记为C10B9_1、C10B9_4在两DNA池间表现为多态性。利用这两个标记对F2分离群体进行SRAP标记验证,通过连锁分析发现,C10B9_1、C10B9_4与不育基因ms的连锁距离分别为3.3cM和-3.3cM。利用此分子标记可以进行番茄雄性不育辅助选育,缩短转育周期,提高转育效率,可省去转育过程中每代需自交鉴定其不育性的繁琐程序,将传统的表现型选择转化为基因型选择,提高选择的准确性和科学性。
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公开(公告)号:CN104120126B
公开(公告)日:2016-10-26
申请号:CN201410395154.5
申请日:2014-08-12
Applicant: 新疆农业科学院园艺作物研究所
Abstract: 本发明公开了与番茄雄性不育基因紧密连锁的SRAP分子标记及其获得方法,以番茄紫茎可育87‑5为父本,苗期绿茎雄性不育型番茄为母本,杂交产生F1代,自交构建F2分离群体。用集群分离分析法对雄性不育基因ms进行了SRAP标记分析,通过SRAP前、后引物的随机组合,选取了544对引物组合在雄性不育、可育池间筛选,标记为C10B9_1、C10B9_4在两DNA池间表现为多态性。利用这两个标记对F2分离群体进行SRAP标记验证,通过连锁分析发现,C10B9_1、C10B9_4与不育基因ms的连锁距离分别为3.3cM和‑3.3cM。利用此分子标记可以进行番茄雄性不育辅助选育,缩短转育周期,提高转育效率,可省去转育过程中每代需自交鉴定其不育性的繁琐程序,将传统的表现型选择转化为基因型选择,提高选择的准确性和科学性。
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公开(公告)号:CN101974511A
公开(公告)日:2011-02-16
申请号:CN201010274441.2
申请日:2010-09-07
Applicant: 新疆农业科学院园艺作物研究所
Abstract: 本发明公开了与番茄苗期耐盐主效QTL紧密连锁的分子标记的获得方法。通过番茄苗期耐盐主效QTL定位;选择番茄苗期的M82和耐盐渐渗系IL7-5杂交,得到杂种F1自花授粉获得群体F2,通过盐胁迫处理,筛选耐盐亚渐渗系7-5-5和盐敏感品种M82之间具有多态性的分子标记;利用已筛选的IL7-5-5上的侧翼标记对F2群体进行筛选,建立重组F2群体和遗传分析;通过耐盐成活率与遗传连锁图中的标记检测,确定了与番茄苗期耐盐主效QTL紧密连锁的分子标记。本发明不受环境条件的影响,对特定苗期耐盐材料的后代及衍生品系在早代进行筛选,节约成本,提高育种和选择效率。
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公开(公告)号:CN107937397A
公开(公告)日:2018-04-20
申请号:CN201810022725.9
申请日:2018-01-10
Applicant: 新疆农业科学院园艺作物研究所
IPC: C12N15/11 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明属于生物技术工程和番茄雄性不育遗传育种技术领域,具体公开一种与番茄雄性不育基因紧密连锁的SNP分子标记及其获得方法和应用,SNP位点是在简化基因组测序基础上,通过关联分析而获得;SNP223标记是利用含有SNP位点的多态性DNA片段,通过设计特异性引物而获得。实验证明,与番茄雄性不育基因紧密连锁的SNP标记可用于番茄雄性不育系的辅助选择育种,与第二代分子标记相比,检测方式更为准确,检测效率也更高。
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公开(公告)号:CN107312793A
公开(公告)日:2017-11-03
申请号:CN201710540810.X
申请日:2017-07-05
Applicant: 新疆农业科学院园艺作物研究所
CPC classification number: C12N15/8213 , C12N9/22 , C12N15/8261
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体公开了一种Cas9介导的番茄基因编辑载体及其应用。发明通过构建CRISPR/Cas9番茄植物表达载体,将Cas9基因导入番茄M82中,对番茄自身DFD基因进行基因编辑。提供一种创建耐储藏转基因番茄的方法,以此得到耐储藏的番茄新品种,提高番茄果实耐储藏性,同时不影响植株的生长与其他品质,可以弥补前人研究方案的不足之处。
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公开(公告)号:CN101974511B
公开(公告)日:2013-07-03
申请号:CN201010274441.2
申请日:2010-09-07
Applicant: 新疆农业科学院园艺作物研究所
Abstract: 本发明公开了与番茄苗期耐盐主效QTL紧密连锁的分子标记的获得方法。通过番茄苗期耐盐主效QTL定位;选择番茄苗期的M82和耐盐渐渗系IL7-5杂交,得到杂种F1自花授粉获得群体F2,通过盐胁迫处理,筛选耐盐亚渐渗系7-5-5和盐敏感品种M82之间具有多态性的分子标记;利用已筛选的IL7-5-5上的侧翼标记对F2群体进行筛选,建立重组F2群体和遗传分析;通过耐盐成活率与遗传连锁图中的标记检测,确定了与番茄苗期耐盐主效QTL紧密连锁的分子标记。本发明不受环境条件的影响,对特定苗期耐盐材料的后代及衍生品系在早代进行筛选,节约成本,提高育种和选择效率。
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公开(公告)号:CN111139262A
公开(公告)日:2020-05-12
申请号:CN201911380897.4
申请日:2019-12-27
Applicant: 新疆农业科学院园艺作物研究所
Abstract: 本发明公开了一种CRISPR介导的快速检测植物基因功能的系统,其特征在于,在Cas蛋白转基因植株中转入含有目的基因gRNA序列的重组病毒载体。本发明克服了现有植物研究领域中采用CRISPR/Cas系统要得到纯合突变体至少需要通过两到三代的植物生长周期的技术缺陷,提供了一种可以快速研究植物基因功能的系统,通过在已经转入Cas基因的转基因植株中转入含有gRNA序列的重组病毒载体,可以于当代检测目的基因的功能;并且由于转入了含有gRNA序列的重组病毒载体,在受感染植株体内形成sgRNA,引导Cas9对目标基因进行切割,有机会获得基因突变的种子,大大缩短了实验耗时和脱靶失败的概率。
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公开(公告)号:CN101831497B
公开(公告)日:2012-07-04
申请号:CN201010168152.4
申请日:2010-05-11
Applicant: 新疆农业科学院园艺作物研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明提供的一种鉴别番茄耐盐性状的分子标记方法,包括以下步骤:1)番茄耐盐主效基因定位;2)人工设计合成一对核苷酸序列作为引物,该引物是由碱基组成的特定序列的寡聚体,其中正向引物:5’GCCAATCCAAACAAACCA’3,反向引物:5’CATTGTCTCCTTCGCCTCG’3;3)提取番茄基因组的DNA,利用引物对番茄基因组DNA进行PCR扩增,无需特异性内切酶酶切,就可得到有差异的产物条带,利用此标记PCR产物片断的大小可鉴别出番茄耐盐材料和盐敏感材料;4)PCR产物在1.5%琼脂糖凝胶上电泳、溴化乙锭染色,用凝胶成像系统观察拍照得耐盐材料PCR产物有1000bp的1条谱带,盐敏感材料有900bp的1条谱带。方法步骤为:定位耐盐基因,选用含有耐盐基因的渐渗系片断,提取幼苗的DNA;建立CAPS反应体系;将PCR产物选用限制性内切酶消化控制等。
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