公开(公告)号：CN107629127A

公开(公告)日：2018-01-26

申请号：CN201710923656.4

申请日：2017-09-30

Applicant: 伊犁职业技术学院 ,  伊犁出入境检验检疫局综合技术服务中心 ,  新疆农业大学

Inventor： 何晓杰 ,  王振宝 ,  叶尔保勒 ,  雷程红 ,  葛婷 ,  叶尔兰·阿不都买金 ,  阿斯喀·夏热甫汉 ,  哈森

IPC: C07K16/40 ,  C07K16/06 ,  C12N15/57 ,  C12N15/70 ,  C12N9/54

Abstract: 本发明公开蜜蜂幼虫芽孢杆菌金属蛋白酶多克隆抗体的制备方法，针对现有技术中蜜蜂幼虫芽孢杆菌的检测方法耗时较长，操作技术要求较高，不利于现场快速检测的问题，通过PLMP基因扩增、原核表达载体pGEX-4T-1-PLMP的构建、PLMP重组蛋白的诱导表达及纯化、PLMP多克隆抗体的制备等步骤，制备的PLMP多克隆抗体经间接ELISA检测效价为1:12800，且经Western Blot方法测定，具有较好的反应性，为建立蜜蜂幼虫芽孢杆菌免疫检测方法奠定了基础，而且构建的PLMP重组蛋白效率高，分离纯化方法简单，周期短。

公开(公告)号：CN105759036A

公开(公告)日：2016-07-13

申请号：CN201610220735.4

申请日：2016-04-11

Applicant: 新疆农业大学

Inventor： 姚刚 ,  徐新龙 ,  夏瑞阳 ,  马雪连 ,  王金泉 ,  钟旗 ,  苏艳 ,  雷程红

IPC: G01N33/569

CPC classification number: G01N33/56916

Abstract: 本发明属于生物疫苗效果的检测方法及检测试剂盒的研发技术领域，特别是涉及一种用于微囊化口服疫苗免疫效果血清学抗体效价检测的检测方法及检测试剂盒。该检测方法包括下述步骤：（1）抗原包；（2）洗涤；（3）封闭；（4）洗涤；（5）加一抗；（6）洗涤；（7）加二抗；（8）洗涤；（9）显色；（10）终止；（11）酶标仪测OD值。使用本检测方法能很好的监测大肠杆菌口服疫苗免疫效果，运用本方法制备的检测试剂盒，则能够快速及时进行实地监测。

公开(公告)号：CN107907680B

公开(公告)日：2020-02-18

申请号：CN201710936059.5

申请日：2017-09-30

Applicant: 伊犁出入境检验检疫局综合技术服务中心 ,  新疆出入境检验检疫局检验检疫技术中心 ,  新疆农业大学

Inventor： 王振宝 ,  季新成 ,  员丽娟 ,  何晓杰 ,  雷程红 ,  葛婷 ,  叶尔保勒 ,  叶尔兰·阿不都买金 ,  阿斯喀·夏热甫汉 ,  哈森

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/558 ,  G01N33/532

Abstract: 本发明公开检测蜜蜂幼虫芽孢杆菌的胶体金免疫试纸及其制备与应用，具体包括样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和底板，其中金标垫上含有胶体金标记的PLMP蛋白多克隆抗体，硝酸纤维素膜上有用PLMP蛋白多克隆抗体预包被的检测线，用羊抗兔IgG溶液预包被的质控线，制备的胶体金免疫试纸特异性强，对阴性菌液均无检出情况，特异度可达100%，灵敏性较好，对幼虫芽孢杆菌的菌液及阳性样品最低检出浓度分别为105 CFU/mL和106 CFU/mL，检测重复性好，性能稳定，保存期达到3个月。

公开(公告)号：CN107907680A

公开(公告)日：2018-04-13

申请号：CN201710936059.5

申请日：2017-09-30

Applicant: 伊犁出入境检验检疫局综合技术服务中心 ,  新疆出入境检验检疫局检验检疫技术中心 ,  新疆农业大学

Inventor： 王振宝 ,  季新成 ,  员丽娟 ,  何晓杰 ,  雷程红 ,  葛婷 ,  叶尔保勒 ,  叶尔兰·阿不都买金 ,  阿斯喀·夏热甫汉 ,  哈森

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/558 ,  G01N33/532

Abstract: 本发明公开检测蜜蜂幼虫芽孢杆菌的胶体金免疫试纸及其制备与应用，具体包括样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和底板，其中金标垫上含有胶体金标记的PLMP蛋白多克隆抗体，硝酸纤维素膜上有用PLMP蛋白多克隆抗体预包被的检测线，用羊抗兔IgG溶液预包被的质控线，制备的胶体金免疫试纸特异性强，对阴性菌液均无检出情况，特异度可达100%，灵敏性较好，对幼虫芽孢杆菌的菌液及阳性样品最低检出浓度分别为105 CFU/mL和106 CFU/mL，检测重复性好，性能稳定，保存期达到3个月。

公开(公告)号：CN107722121A

公开(公告)日：2018-02-23

申请号：CN201710923663.4

申请日：2017-09-30

Applicant: 伊犁职业技术学院 ,  伊犁出入境检验检疫局综合技术服务中心 ,  新疆农业大学

Inventor： 何晓杰 ,  王振宝 ,  叶尔兰·阿不都买金 ,  叶尔保勒 ,  雷程红 ,  葛婷 ,  阿斯喀·夏热甫汉 ,  哈森

IPC: C07K16/12 ,  C07K16/06 ,  G01N33/569 ,  G01N33/558

CPC classification number: C07K16/1278 ,  C07K16/065 ,  G01N33/558 ,  G01N33/56911

Abstract: 本发明公开蜜蜂幼虫芽孢杆菌PLMP多抗及其在免疫层析纸的应用，针对现有技术中蜜蜂幼虫芽孢杆菌的检测方法耗时较长，操作技术要求较高，不利于现场快速检测的问题，通过PLMP基因扩增、原核表达载体pGEX-4T-1-PLMP的构建、PLMP重组蛋白的诱导表达及纯化、PLMP多克隆抗体的制备等步骤制备PLMP多抗，构建的PLMP重组蛋白效率高，分离纯化方法简单，周期短并将其应用在胶体金免疫层析纸的制备中，得到的免疫层析纸特异性强，对阴性菌液均无检出情况，特异度可达100%，灵敏性较好，对幼虫芽孢杆菌的菌液及阳性样品最低检出浓度分别为105 CFU/mL和106 CFU/mL。