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公开(公告)号：CN105219664A
公开(公告)日：2016-01-06
申请号：CN201510629965.1
申请日：2015-09-24
Abstract: 本发明公开一种重组基因工程菌构建及高活性β-D-1,4-内切木聚糖酶的制备与应用。通过构建基因工程菌巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）GS115/pPIC9K-xynAm CGMCC No.10696及代谢的高活性β-D-1,4-内切木聚糖酶。较未删除MRTIKFLFALAITTVAKA和简单优化xynA活性提高1300倍，纯化后重组β-D-1,4-内切木聚糖酶可以专一地水解低粘度阿拉伯木聚糖、高粘度阿拉伯木聚糖、燕麦木聚糖、桦木木聚糖和可溶性木聚糖4-O-Methyl-D-glucurono-D-Xylan，不水解地衣多糖和大麦β-葡聚糖，在饲料和造纸等领域具有广泛的应用价值。
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公开(公告)号：CN105219664B
公开(公告)日：2019-07-05
申请号：CN201510629965.1
申请日：2015-09-24
Abstract: 本发明公开一种重组基因工程菌构建及高活性β‑D‑1,4‑内切木聚糖酶的制备与应用。通过构建基因工程菌巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）GS115/pPIC9K‑xynAm CGMCC No.10696及代谢的高活性β‑D‑1,4‑内切木聚糖酶。较未删除MRTIKFLFALAITTVAKA和简单优化xynA活性提高1300倍，纯化后重组β‑D‑1,4‑内切木聚糖酶可以专一地水解低粘度阿拉伯木聚糖、高粘度阿拉伯木聚糖、燕麦木聚糖、桦木木聚糖和可溶性木聚糖4‑O‑Methyl‑D‑glucurono‑D‑Xylan，不水解地衣多糖和大麦β‑葡聚糖，在饲料和造纸等领域具有广泛的应用价值。
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公开(公告)号：CN103468726A
公开(公告)日：2013-12-25
申请号：CN201310420565.0
申请日：2013-09-16
Applicant: 新疆农业大学
Abstract: 本发明属于生物基因工程及酶工程领域，特别是涉及一种来源于瘤胃细菌产琥珀酸丝状杆菌β-葡聚糖酶基因的优化、表达及其应用。将来源于瘤胃细菌产琥珀酸丝状杆菌（Fibrobactersuccinogenes）的β-葡聚糖酶基因SEQIDNO.2通过密码子优化得到SEQIDNO.3所示的优化葡聚糖酶基因；此基础上构建了葡聚糖酶基因的酵母表达载体pPIC9K-GLUm，转化毕赤酵母GS115。经核苷酸序列优化的β-葡聚糖酶基因GLUm表达的酶活力比优化前提高25.1%。经高密度发酵，GLUm葡聚糖酶的活力为51976U/g干培养物。纯化β-葡聚糖酶在胃蛋白酶和胰蛋白酶的共同作用60min后，仍保留了50.5%的酶活力，这种优化的产琥珀酸丝状杆菌β-葡聚糖酶可用于非治疗目的降解β-葡聚糖的应用。
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公开(公告)号：CN103468726B
公开(公告)日：2015-01-07
申请号：CN201310420565.0
申请日：2013-09-16
Applicant: 新疆农业大学
Abstract: 本发明属于生物基因工程及酶工程领域，特别是涉及一种来源于瘤胃细菌产琥珀酸丝状杆菌β-葡聚糖酶基因的优化、表达及其应用。将来源于瘤胃细菌产琥珀酸丝状杆菌（Fibrobactersuccinogenes）的β-葡聚糖酶基因SEQIDNO.2通过密码子优化得到SEQIDNO.3所示的优化葡聚糖酶基因；此基础上构建了葡聚糖酶基因的酵母表达载体pPIC9K-GLUm，转化毕赤酵母GS115。经核苷酸序列优化的β-葡聚糖酶基因GLUm表达的酶活力比优化前提高25.1%。经高密度发酵，GLUm葡聚糖酶的活力为51976U/g干培养物。纯化β-葡聚糖酶在胃蛋白酶和胰蛋白酶的共同作用60min后，仍保留了50.5%的酶活力，这种优化的产琥珀酸丝状杆菌β-葡聚糖酶可用于非治疗目的降解β-葡聚糖的应用。
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