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公开(公告)号：CN101538552A
公开(公告)日：2009-09-23
申请号：CN200910031021.9
申请日：2009-04-24
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 本发明提供了一种大鼠肝细胞分离培养的方法。大鼠用戊巴比妥钠麻醉，并给予肝素钠抗凝，做门静脉插管，两步灌流法灌流，取下消化成熟肝脏，收集肝细胞于4℃含1％牛血清白蛋白(BSA)的Hanks液中，肝细胞悬液用筛网过滤，滤液离心、沉淀后，收集沉淀于Leibovitz’s－15(L－15)完全培养基中，调整肝细胞密度为3～6×105个/ml接种于铺鼠尾胶原的培养板中，于37℃、5％CO2环境中培养。接种后4h换液去除未贴壁及死细胞，继续培养20h后可用于试验。本方法简便易行、价格低廉，稳定、高效，获得的肝细胞活力高，易贴壁，可用于药理及毒理试验并在一般实验室推广。
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