一种与绵羊F17大肠杆菌相关的miRNA及其应用

    公开(公告)号:CN113699153A

    公开(公告)日:2021-11-26

    申请号:CN202111197413.X

    申请日:2021-10-14

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提出了一种与绵羊F17大肠杆菌相关的分子标志物miR‑299‑5p、所述miR‑299‑5p的靶向绵羊β防御素2基因(SBD2),以及miRNA在研究绵羊小肠上皮细胞抗F17大肠杆菌感染中的应用,所述SBD2基因的NCBI序列号为NM_001198545.1,miR‑299‑5p能够提高小肠上皮细胞抗F17大肠杆菌感染小肠上皮细胞的能力。本发明不仅可以通过对靶基因的负调控来调控小肠上皮细胞抗F17大肠杆菌的感染,还可以更加深入的探究SBD2在湖羊小肠上皮细胞抗F17大肠杆菌感染中的作用及其调控机制的研究,为防御素在生产上的应用提供一定的理论依据。本发明所公开的miR‑299‑5p还应用于为研发因F17大肠杆菌引起的疾病的抗细菌药物提供了一个新的药物靶点,可用于评价提高养羊业的经济效益。

    一种检测湖羊NSMF基因CNV标记的方法及其应用

    公开(公告)号:CN112342301A

    公开(公告)日:2021-02-09

    申请号:CN202011259217.6

    申请日:2020-11-12

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提出了一种检测湖羊NSMF基因CNV标记的方法及其应用,所述的CNV标记是指湖羊NSMF基因候选区域chr3:545787‑597706内的拷贝数变异,以湖羊基因组DNA为模板,以正常双拷贝基因ANKRD1为内参基因,通过荧光定量PCR分别扩增湖羊NSMF基因和内参基因部分片段,根据2*2−ΔCt定量结果将湖羊个体划分为增加型、缺失型和正常型。本发明在DNA水平上检测与湖羊体长性状密切相关的CNV标记,并应用于湖羊生长性状的分子标记辅助选择,从而加快湖羊遗传选育进程。

    一种检测湖羊NSMF基因CNV标记的方法及其应用

    公开(公告)号:CN112342301B

    公开(公告)日:2023-11-24

    申请号:CN202011259217.6

    申请日:2020-11-12

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提出了一种检测湖羊NSMF基因CNV标记的方法及其应用,所述的CNV标记是指湖羊NSMF基因候选区域chr3:545787‑597706内的拷贝数变异,以湖羊基因组DNA为模板,以正常双拷贝基因ANKRD1为内参基因,通过荧光定量PCR分别扩增湖羊NSMF基因和内参基因部分片段,根据2*2−ΔCt定量结果将湖羊个体划分为增加型、缺失型和正常型。本发明在DNA水平上检测与湖羊体长性状密切相关的CNV标记,并应用于湖羊生长性状的分子标记辅助选择,从而加快湖羊遗传选育进程。

    一种防止绵羊近亲交配的家系追溯编码方法及应用

    公开(公告)号:CN115831227A

    公开(公告)日:2023-03-21

    申请号:CN202211443135.6

    申请日:2022-11-17

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种防止绵羊近亲交配的家系追溯编码方法,该方法所涉及的家系编码由2~6个脱氧核糖核苷酸的碱基组成,家系编码时相邻上、下世代之间通过碱基互补配对的方式记录家系信息;根据原始家系数采用不同的方式进行编码,当原始家系数≤16时,采用2个或4个脱氧核糖核苷酸碱基的组合记录家系信息;当16<原始家系数≤64时,采用3个或6个脱氧核糖核苷酸碱基的组合记录家系信息。本发明的操作简单、易行,并能够记录世代信息,适用的世代长,可将个体的近交系数控制在0.125之内。

    提高目的片段与psiCHECK2载体连接效率的方法

    公开(公告)号:CN113736791A

    公开(公告)日:2021-12-03

    申请号:CN202111161574.3

    申请日:2021-09-30

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提出了一种提高目的片段与psiCHECK2载体连接效率的方法,该方法以牛基因组DNA为模板,利用载体同源序列引物替换传统引物中的保护碱基序列,通过PCR扩增目的片段,将PCR扩增产物与psiCHECK2载体连接后导入感受态细胞,判断目的片段与psiCHECK2载体的载体连接效率。本发明的同源片段实验组的连接效率要比常规引物实验组和细菌内源性同源重实验组效率高,但该方法并不是基于同源重组原理,而是通过改变保护碱基的长度(本发明中采用的是载体同源序列)提高双酶切效率达到改善重组效率的目的。本发明可为其他载体构建提供技术依据。

    提高目的片段与psiCHECK2载体连接效率的方法

    公开(公告)号:CN113736791B

    公开(公告)日:2024-01-26

    申请号:CN202111161574.3

    申请日:2021-09-30

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提出了一种提高目的片段与psiCHECK2载体连接效率的方法,该方法以牛基因组DNA为模板,利用载体同源序列引物替换传统引物中的保护碱基序列,通过PCR扩增目的片段,将PCR扩增产物与psiCHECK2载体连接后导入感受态细胞,判断目的片段与psiCHECK2载体的载体连接效率。本发明的同源片段实验组的连接效率要比常规引物实验组和细菌内源性同源重实验组效率高,但该方法并不是基于同源重组原理,而是通过改变保护碱基的长度(本发明中采用的是载体同源序列)提高双酶切效率达到改善重组效率的目的。本发明可为其他载体构建提供技术依据。

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