公开(公告)号：CN119372347A

公开(公告)日：2025-01-28

申请号：CN202411758706.4

申请日：2024-12-03

Applicant: 扬州大学

Inventor： 焦新安 ,  王雪莹 ,  顾丹 ,  薛淏月 ,  张云增 ,  唐苑悦

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/113 ,  C12N15/11 ,  C12N9/22 ,  C12R1/63

Abstract: 本发明公开了一种用于检测副溶血弧菌的sgRNA及其在RPA‑CRISPR/Cas12b检测中的应用，所述sgRNA包含如SEQ ID NO.1所示的副溶血弧菌靶标序列。本发明的RPA‑CRISPR/Cas12b检测方法为先对待测样本进行RPA扩增，所用引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2～3所示；再用上述的sgRNA对RPA扩增产物进行CRISPR/Cas12b检测，CRISPR/Cas12b检测结束后在485nm激发光下肉眼读取荧光信号，如有荧光信号则待测样本中含有副溶血弧菌，如没有荧光信号则待测样本中不含副溶血弧菌。本发明的检测方法最低检测限为菌浓度100CFU/mL，特异性强，使用范围广，不受场地环境、操作人员专业技术的限制，操作简单，可用于实际水产品样品中副溶血弧菌的快速检测，且结果准确。