公开(公告)号：CN105255823A

公开(公告)日：2016-01-20

申请号：CN201510859271.7

申请日：2015-11-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李拥军 ,  蔡缪荧 ,  程国虎 ,  张昊 ,  郭海燕

IPC: C12N5/075

Abstract: 本发明属于生物学领域，具体涉及一种适用于羔羊卵母细胞体外成熟培养的方法及培养液。所述的培养液是在TCM199成熟基础液中分别添加5.0μg/mL的FSH和5.0μg/mL LH。该培养液用于羔羊卵母细胞体外成熟培养，结果显示羔羊卵母细胞成熟率明显高于其他，提高了羔羊卵母细胞的成熟效果，为后续的胚胎培养实验奠定基础。

公开(公告)号：CN104059878A

公开(公告)日：2014-09-24

申请号：CN201410287368.0

申请日：2014-06-23

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李拥军 ,  张光景 ,  张佳慧 ,  杨波 ,  蔡缪荧

IPC: C12N5/076

Abstract: 本发明涉及一种适用于兔精子体外获能方法及培养液配方。本发明在BO获能液中添加10μmol/L EGCG，用于精子体外获能处理，且在BO获能液中添加10μmol/L EGCG，BO获能液配方为：NaCl 6.5453mg/mL，KCl 0.2997mg/mL，NaH2PO4·H2O 0.1145mg/mL，MgCl2·6H2O 0.1057mg/mL，CaCl2·2H2O 0.330mg/mL，葡萄糖2.518mg/mL，0.2％酚红4％，100IU/mL青霉素，100IU/mL链霉素，NaHCO33.1080mg/mL，丙酮酸钠0.1380mg/mL，肝素20μg/mL，BSA20mg/mL。本发明克服了现有的精子体外获能过程中，由于精子密度较大，精子自身代谢产生的氧自由基积累较多的缺陷。本发明利用成年新西兰白兔公免，对其采精后，在BO获能液中添加不同浓度EGCG(0μM、10μM、15μM、20μM、25μM)，研究其对兔精子获能效果的影响，得出最佳EGCG添加浓度，建立一种高效的兔体外获能培养体系。

公开(公告)号：CN105255820A

公开(公告)日：2016-01-20

申请号：CN201510862744.9

申请日：2015-11-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李拥军 ,  蔡缪荧 ,  程国虎 ,  张昊 ,  郭海燕

IPC: C12N5/073 ,  C12N5/075 ,  C12N5/076

Abstract: 本发明属于生物学领域，具体涉及一种适用于羔羊卵母细胞体外受精培养的方法。该方法包括卵母细胞获取及成熟培养、精子获能，成熟卵母细胞体外受精和受精卵培养的步骤；在精子获能和成熟卵母细胞体外受精步骤中对孵育时间、离心机的转速及离心时间、离心洗涤次数、成熟卵母细胞的培养时间条件进行优化组合利用，实现了羔羊和成年母羊受精卵的卵裂率基本一致。

公开(公告)号：CN104232569A

公开(公告)日：2014-12-24

申请号：CN201410287367.6

申请日：2014-06-23

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李拥军 ,  张光景 ,  张佳慧 ,  杨波 ,  蔡缪荧

IPC: C12N5/075

Abstract: 本发明涉及一种适用于幼龄兔卵母细胞体外受精方法及培养液配方。本发明在BO受精液中添加10μM EGCG，用于幼龄兔卵母细胞体外受精，在BO受精液中添加10μM EGCG，BO受精液为：NaCl 6.5453mg/mL，KCl 0.2997mg/mL，NaH2PO4·H2O 0.1145mg/mL，MgCl2·6H2O 0.1057mg/mL，CaCl2·2H2O 0.330mg/mL，葡萄糖2.518mg/mL，0.2％酚红4％，100IU/mL青霉素，100IU/mL链霉素，NaHCO33.1080mg/mL，丙酮酸钠0.1380mg/mL，肝素20μg/mL，BSA 20mg/mL。克服了现有幼龄家畜体外培养体系的缺陷。本发明在BO受精液中，不同浓度EGCG对幼龄兔卵母细胞体外受精具有显著性的影响(P＜0.05)，受精液中EGCG添加浓度为5μM、10μM、15μM时，受精率显著高于0和20μM(分别为43.26±5.92和46.34±3.57)，而添加5μM、10μM、15μM时，幼龄兔卵母细胞受精率差异不显著，添加10μM时，高于5μM和15μM。

公开(公告)号：CN103314951A

公开(公告)日：2013-09-25

申请号：CN201310306297.X

申请日：2013-07-19

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李拥军 ,  张佳慧 ,  蔡缪荧 ,  张光景 ,  杨波

IPC: A01N1/02

Abstract: 本发明本发明属于生物学领域，具体涉及一种适用于延长成年公兔精液常温保存时间的方法和专用稀释液。该方法是在葡－柠－卵基础稀释液中添加0.75mg/mL维生素C，用于精液常温保存。所述专用稀释液，是在葡－柠－卵基础稀释液中添加0.75mg/mL维生素C。本发明能有效延长成年公兔精液常温保存时间。