公开(公告)号：CN104059878A

公开(公告)日：2014-09-24

申请号：CN201410287368.0

申请日：2014-06-23

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李拥军 ,  张光景 ,  张佳慧 ,  杨波 ,  蔡缪荧

IPC: C12N5/076

Abstract: 本发明涉及一种适用于兔精子体外获能方法及培养液配方。本发明在BO获能液中添加10μmol/L EGCG，用于精子体外获能处理，且在BO获能液中添加10μmol/L EGCG，BO获能液配方为：NaCl 6.5453mg/mL，KCl 0.2997mg/mL，NaH2PO4·H2O 0.1145mg/mL，MgCl2·6H2O 0.1057mg/mL，CaCl2·2H2O 0.330mg/mL，葡萄糖2.518mg/mL，0.2％酚红4％，100IU/mL青霉素，100IU/mL链霉素，NaHCO33.1080mg/mL，丙酮酸钠0.1380mg/mL，肝素20μg/mL，BSA20mg/mL。本发明克服了现有的精子体外获能过程中，由于精子密度较大，精子自身代谢产生的氧自由基积累较多的缺陷。本发明利用成年新西兰白兔公免，对其采精后，在BO获能液中添加不同浓度EGCG(0μM、10μM、15μM、20μM、25μM)，研究其对兔精子获能效果的影响，得出最佳EGCG添加浓度，建立一种高效的兔体外获能培养体系。

公开(公告)号：CN104232569A

公开(公告)日：2014-12-24

申请号：CN201410287367.6

申请日：2014-06-23

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李拥军 ,  张光景 ,  张佳慧 ,  杨波 ,  蔡缪荧

IPC: C12N5/075

Abstract: 本发明涉及一种适用于幼龄兔卵母细胞体外受精方法及培养液配方。本发明在BO受精液中添加10μM EGCG，用于幼龄兔卵母细胞体外受精，在BO受精液中添加10μM EGCG，BO受精液为：NaCl 6.5453mg/mL，KCl 0.2997mg/mL，NaH2PO4·H2O 0.1145mg/mL，MgCl2·6H2O 0.1057mg/mL，CaCl2·2H2O 0.330mg/mL，葡萄糖2.518mg/mL，0.2％酚红4％，100IU/mL青霉素，100IU/mL链霉素，NaHCO33.1080mg/mL，丙酮酸钠0.1380mg/mL，肝素20μg/mL，BSA 20mg/mL。克服了现有幼龄家畜体外培养体系的缺陷。本发明在BO受精液中，不同浓度EGCG对幼龄兔卵母细胞体外受精具有显著性的影响(P＜0.05)，受精液中EGCG添加浓度为5μM、10μM、15μM时，受精率显著高于0和20μM(分别为43.26±5.92和46.34±3.57)，而添加5μM、10μM、15μM时，幼龄兔卵母细胞受精率差异不显著，添加10μM时，高于5μM和15μM。

公开(公告)号：CN102676450A

公开(公告)日：2012-09-19

申请号：CN201210165765.1

申请日：2012-05-24

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李拥军 ,  李太坤 ,  李文婷 ,  张光景 ,  张佳慧

IPC: C12N5/075

Abstract: 本发明属于生物学领域，具体涉及一种适用于幼龄兔卵母细胞体外成熟培养的方法及培养液配方。该方法采用TCM-199基础培养体系在体外培养卵丘卵母细胞复合体，以TCM-199培养液为基础，在其中添加10%FBS、0.11g/L丙酮酸钠、10μg/mlLH、10μg/mlFSH、1μg/mlE2、100IU/ml青霉素、100IU/ml硫酸链霉素、15－20μM的表没食子儿茶素没食子酸酯。本发明在TCM-199基础培养体系中通过添加EGCG研究其对幼龄新西兰兔卵母细胞体外成熟的影响，建立了一种简单、适用的幼兔卵母细胞体外成熟的方法。

公开(公告)号：CN103314951A

公开(公告)日：2013-09-25

申请号：CN201310306297.X

申请日：2013-07-19

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李拥军 ,  张佳慧 ,  蔡缪荧 ,  张光景 ,  杨波

IPC: A01N1/02

Abstract: 本发明本发明属于生物学领域，具体涉及一种适用于延长成年公兔精液常温保存时间的方法和专用稀释液。该方法是在葡－柠－卵基础稀释液中添加0.75mg/mL维生素C，用于精液常温保存。所述专用稀释液，是在葡－柠－卵基础稀释液中添加0.75mg/mL维生素C。本发明能有效延长成年公兔精液常温保存时间。