公开(公告)号：CN118480550A

公开(公告)日：2024-08-13

申请号：CN202410582422.8

申请日：2024-05-11

Applicant: 扬州大学 ,  江苏徐淮地区淮阴农业科学研究所

Inventor： 樊红霞 ,  吴德伟 ,  王幼平 ,  吴健 ,  顿小玲

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/10 ,  A01N63/60 ,  A01P3/00

Abstract: 本发明公开了一种防治菌核病的dsRNA及其制备方法和应用，所述dsRNA的序列如SEQ ID NO.1所示。本发明在对潜在的核盘菌效应因子进行了系统克隆，从中筛选出有助于核盘菌侵染的效应因子S201（SS1G_11928），可见S201是核盘菌的关键致病因子。因此，我们根据克隆所得到的S201的序列设计了dsRNA转录引物，转录了名为ds201的dsRNA，并通过将其喷施于烟草叶片后接种核盘菌的实验，验证了ds201的菌核病抑制功能。本发明可以将核盘菌侵染所引起的病斑面积从400~500 mm2左右降低至200~300 mm2左右。

公开(公告)号：CN114369639A

公开(公告)日：2022-04-19

申请号：CN202111579396.6

申请日：2021-12-22

Applicant: 扬州大学

Inventor： 吴德伟 ,  王幼平 ,  杨文文 ,  樊红霞 ,  聂甲玥 ,  吴健 ,  孙勤富

IPC: C12Q1/66 ,  C12N15/82 ,  C12N15/65 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种高效筛选具有植物茉莉素途径抑制功能的病原效应因子的方法，包括以下步骤：构建双荧光素酶报告载体pVSP1‑DL，并转入农杆菌中；将待筛选的效应因子基因片段构建到植物双元超表达载体，并转入农杆菌中；将含有报告载体的农杆菌与含有效应因子超表达载体的农杆菌混合，并注射烟草叶片；使用LUC荧光素酶的底物喷施注射的烟草叶片，进行荧光成像；对烟草注射部位取样，进行LUC和REN双荧光素酶酶活测定。本发明方法可以用简单快速的操作过程和低成本的仪器实现高效率、大批量的筛选抑制茉莉素途径的病原效应因子。