一种猪肝脏组织类器官模型及其体外构建方法

    公开(公告)号:CN111979179A

    公开(公告)日:2020-11-24

    申请号:CN202010854860.7

    申请日:2020-08-24

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开一种猪肝脏组织类器官模型的体外构建方法。将新生仔猪的肝组织剪碎清洗后,加入消化液进行孵育消化,得到类器官细小颗粒;将类器官细小颗粒与基质凝胶混合后进行接种;待基质凝胶凝固后,先用诱导培养基孵育4天,然后换用扩张培养基培养,扩张培养基每3-4天更换一次,得到猪肝脏组织类器官模型。本发明构建方法简单,构建迅速,可操作性强,直接通过新生动物类器官小颗粒构建类器官模型,不仅能够真实反映猪活体模型中的内环境,还能用于在分子细胞水平研究猪在体模型中肝脏的生长以及脂质代谢,减少对活体猪的采样。

    一种犬回肠上皮永生化细胞系的构建方法

    公开(公告)号:CN118620960A

    公开(公告)日:2024-09-10

    申请号:CN202410739537.3

    申请日:2024-06-07

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种犬回肠上皮永生化细胞系的构建方法,该构建方法包括如下步骤:将犬回肠组织进行原代培养;设计并构建靶向犬回肠上皮细胞中hTERT基因的sgRNA表达载体、含有hTERT基因的修复模板;将sgRNA表达载体、Cas9表达载体、含有hTERT基因的修复模板共转染至犬回肠上皮细胞,在hTERT基因位点产生DSB,并引导细胞通过同源重组修复机制,将hTERT基因序列敲入到目标位点,得到携带hTERT基因的犬回肠上皮细胞;将携带hTERT基因的犬回肠上皮细胞进一步培养得到永生化的犬回肠上皮细胞系。本发明永生化的hTERT‑CIECs按照2×105个细胞/25cm2,经过4天培养之后,细胞密度能够达到100%的汇合,增殖速度快;建立的永生化犬回肠上皮细胞系已传至50代,未出现任何衰老迹象,可永久保存。

    一种猪肝脏组织类器官模型及其体外构建方法

    公开(公告)号:CN111979179B

    公开(公告)日:2022-12-27

    申请号:CN202010854860.7

    申请日:2020-08-24

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开一种猪肝脏组织类器官模型的体外构建方法。将新生仔猪的肝组织剪碎清洗后,加入消化液进行孵育消化,得到类器官细小颗粒;将类器官细小颗粒与基质凝胶混合后进行接种;待基质凝胶凝固后,先用诱导培养基孵育4天,然后换用扩张培养基培养,扩张培养基每3‑4天更换一次,得到猪肝脏组织类器官模型。本发明构建方法简单,构建迅速,可操作性强,直接通过新生动物类器官小颗粒构建类器官模型,不仅能够真实反映猪活体模型中的内环境,还能用于在分子细胞水平研究猪在体模型中肝脏的生长以及脂质代谢,减少对活体猪的采样。

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