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公开(公告)号：CN116271216A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310367993.5
申请日：2023-04-08
Applicant: 扬州大学
IPC: A61L27/18 , A61L27/20 , A61L27/38 , A61L27/36 , A61L27/22 , A61L27/54 , B33Y10/00 , B33Y70/10 , B33Y80/00
Abstract: 本发明涉及一种仿生式促软骨化3D打印组织工程气管的制备方法，包括以下步骤：步骤（1）、3D打印聚己内酯（PCL）气管支架；步骤（2）、剑突软骨脱细胞基质（DCM）的获取；步骤（3）、复合支架的制备；先制备甲基丙烯酰化透明质酸（HAMA）溶液，随后再将步骤（1）打印的PCL支架浸泡至溶液中，37℃浸泡15分钟，在蓝光下充分交联5分钟，使HAMA均匀包裹PCL支架；步骤（4）、骨髓间充质干细胞（BMSCs）的培养与鉴定；步骤（5）、生物墨水的制备；步骤（6）、通过光固化三维生物打印技术构建C形软骨环仿生结构。通过本发明，制备了一种仿生式促软骨化气管替代物，为临床气管替代治疗，尤其是组织工程气管软骨化提供了新思路。
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公开(公告)号：CN114533961A
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202210184091.3
申请日：2022-02-28
Applicant: 扬州大学
IPC: A61L27/38 , A61L27/18 , A61L27/22 , A61L27/54 , A61L27/50 , B33Y70/00 , B33Y80/00 , B33Y10/00 , C12N5/0775
Abstract: 本发明涉及一种3D打印负载干细胞外泌体的气管支架的制备方法，包括以下步骤：步骤（1）、骨髓间充质干细胞外泌体提取及鉴定；步骤（2）、3D打印PCL气管支架的制备；步骤（3）、光固化水凝胶负载干细胞外泌体；步骤（4）、负载干细胞外泌体复合气管支架的制备；将步骤（2）打印得到的PCL支架浸泡在负载干细胞外泌体的SilMA溶液Exo‑SilMA中，37℃下浸泡30分钟，之后使用蓝光灯交联5分钟，使Exo‑SilMA均匀包裹PCL支架。通过本发明，PCL支架可以提供良好的力学性能，而SilMA具有良好生物相容性、生物降解性、溶胀作用，能够富集促进组织再生的生物成分，间充质干细胞外泌体作为干细胞衍生物，能够发挥干细胞的修复功能，且避免了移植干细胞的致瘤、排斥等风险。
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公开(公告)号：CN111905148A
公开(公告)日：2020-11-10
申请号：CN202010712474.4
申请日：2020-07-22
Applicant: 扬州大学
IPC: A61L27/36
Abstract: 本发明公开一种真空辅助快速制备无免疫原性兔脱细胞气管基质方法，包括如下步骤：以新鲜气管为原料，在4℃无菌蒸馏水中渗透溶解24h，随后置于含有0.25％脱氧胆酸钠和0.25％Triton-X 100的溶液在37℃恒温摇床以60rpm转速孵育24h，无菌蒸馏水洗涤后置于含2000kU/L Dnase-Ⅰ和4000U/L RNase的1mol/L NaCl溶液在37℃恒温摇床以60rpm转速孵育24h，以溶解细胞核并降解DNA，以上操作均在-0.96Bar的真空环境下进行，本研究采用真空辅助脱细胞方法能够促进DNA酶及RNA酶的渗透作用，加速并切底清除基质中细胞核物质及其他免疫原性成分，制备出无免疫原性的脱细胞细胞外基质，从而解决异体移植后免疫排异及严重炎症反应等并发症问题，同时，该方法还保留有适当的血管再生因子,有利于异体移植后诱导血管新生。
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公开(公告)号：CN116271216B
公开(公告)日：2025-02-25
申请号：CN202310367993.5
申请日：2023-04-08
Applicant: 扬州大学
IPC: A61L27/18 , A61L27/20 , A61L27/38 , A61L27/36 , A61L27/22 , A61L27/54 , B33Y10/00 , B33Y70/10 , B33Y80/00
Abstract: 本发明涉及一种仿生式促软骨化3D打印组织工程气管的制备方法，包括以下步骤：步骤（1）、3D打印聚己内酯（PCL）气管支架；步骤（2）、剑突软骨脱细胞基质（DCM）的获取；步骤（3）、复合支架的制备；先制备甲基丙烯酰化透明质酸（HAMA）溶液，随后再将步骤（1）打印的PCL支架浸泡至溶液中，37℃浸泡15分钟，在蓝光下充分交联5分钟，使HAMA均匀包裹PCL支架；步骤（4）、骨髓间充质干细胞（BMSCs）的培养与鉴定；步骤（5）、生物墨水的制备；步骤（6）、通过光固化三维生物打印技术构建C形软骨环仿生结构。通过本发明，制备了一种仿生式促软骨化气管替代物，为临床气管替代治疗，尤其是组织工程气管软骨化提供了新思路。
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公开(公告)号：CN114533961B
公开(公告)日：2023-01-31
申请号：CN202210184091.3
申请日：2022-02-28
Applicant: 扬州大学
IPC: A61L27/38 , A61L27/18 , A61L27/22 , A61L27/54 , A61L27/50 , B33Y70/00 , B33Y80/00 , B33Y10/00 , C12N5/0775
Abstract: 本发明涉及一种3D打印负载干细胞外泌体的气管支架的制备方法，包括以下步骤：步骤（1）、骨髓间充质干细胞外泌体提取及鉴定；步骤（2）、3D打印PCL气管支架的制备；步骤（3）、光固化水凝胶负载干细胞外泌体；步骤（4）、负载干细胞外泌体复合气管支架的制备；将步骤（2）打印得到的PCL支架浸泡在负载干细胞外泌体的SilMA溶液Exo‑SilMA中，37℃下浸泡30分钟，之后使用蓝光灯交联5分钟，使Exo‑SilMA均匀包裹PCL支架。通过本发明，PCL支架可以提供良好的力学性能，而SilMA具有良好生物相容性、生物降解性、溶胀作用，能够富集促进组织再生的生物成分，间充质干细胞外泌体作为干细胞衍生物，能够发挥干细胞的修复功能，且避免了移植干细胞的致瘤、排斥等风险。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112190758A
公开(公告)日：2021-01-08
申请号：CN202010978119.1
申请日：2020-09-17
Applicant: 扬州大学
IPC: A61L27/36
Abstract: 本发明公开一种快速制备脱细胞气管支架的方法，制备时使用无底物的一次性真空采血管作为容器进行脱细胞处理，通过配备显示器的真空泵将该容器抽真空至1/2标准大气压；将无菌分离获取的气管在4℃无菌蒸馏水中渗透溶解，在4％脱氧胆酸钠溶液中孵育，用磷酸缓冲盐溶液冲洗3次，置于含有6KU/mL DNaseI的NaCl溶液中，摇床孵育，将样本转移至磷酸缓冲盐溶液中后于室温下超声，随后磷酸缓冲盐溶液冲洗3次去除组织碎片即完成制备。真空负压状态加快去污剂和酶进入组织的进程，优化的DNase I的浓度，提高脱细胞的效果和效率，从而显著缩短了制备气管脱细胞支架的时间，降低支架的制备成本。
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公开(公告)号：CN116440060A
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202310424373.0
申请日：2023-04-20
Applicant: 扬州大学
IPC: A61K9/00 , A61K35/28 , A61K47/42 , A61K47/36 , A61M37/00 , C12N5/0775 , A61L27/20 , A61L27/22 , A61L27/38 , A61L27/50
Abstract: 本发明属于组织工程修复材料技术领域，涉及一种负载干细胞外泌体促进区域快速上皮化的微针的制备方法；收集无血清培养的间充质干细胞培养基上清液，采用密度梯度离心法提取干细胞外泌体，PBS溶解后，取新鲜样本进行透射电子显微镜，鉴定外泌体形态；研究干细胞外泌体对上皮细胞增殖和迁移性能的影响；在模具中加入提取的干细胞外泌体共混后的光固化水凝胶，除泡3‑5次，烘箱加热浓缩3‑5次，UV405nm光固化后脱模，并通过扫描电镜观察其形貌特征。
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公开(公告)号：CN114642520A
公开(公告)日：2022-06-21
申请号：CN202210276010.2
申请日：2022-03-21
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明提供一种功能化杂化式气管移植物，包括：动物气管和聚己内酯（PCL）；以动物气管采用真空辅助脱细胞技术制成完整细胞外基质结构；以聚己内酯（PCL）为原料采用3D打印技术制备与细胞外基质机构匹配的支架结构；所述支架结构置于细胞外基质结构内壁，还公开了该气管移植物的制作方法，使用脱氧胆酸钠/聚乙二醇辛基苯基醚溶液摇床孵育，无菌蒸馏水洗涤，随后浸入含1‑4kU/mL脱氧核糖核酸酶I、2‑8U/mL核糖核酸酶的NaCl溶液中，摇床孵育，制备低免疫原性脱细胞气管外基质结构；选择3D生物打印机高温螺杆喷头和仿生气管结构旋转轴，旋转轴样式为C型，综合了脱细胞气管基质良好的生物相容性、低免疫原性、诱导血管新生性能以及合成材料具有的良好生物力学性能。
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公开(公告)号：CN116271239A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310424159.5
申请日：2023-04-20
Applicant: 扬州大学
IPC: A61L27/36
Abstract: 本发明涉及一种脱细胞气管支架的制备方法，属于生物工程技术领域；首先取新鲜气管，进行预处理；将处理好的气管转移至质量体积比为1%‑4%的CHAPS溶液中在37℃恒温摇床以100rpm转速孵育3h；孵育后的气管用无菌PBS洗涤；将洗涤完毕的气管置于工作溶液中在37℃恒温摇床以60rpm转速孵育12h；本发明脱细胞法与传统DEM法相比，整个流程时间缩短至16h以内，此外脱细胞后力学强度有所提升、细胞黏附效率增加；与改良真空辅助脱细胞法相比时间也缩短一半以上，且无需特殊容器装载以及使用真空泵等大型仪器，整个脱细胞生物相容性、免疫原性也同样符合组织工程学的要求。
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公开(公告)号：CN116212113A
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202310367897.0
申请日：2023-04-07
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种制备脱细胞华通氏胶基质的方法，包括以下步骤：步骤（1）：去除脐带外膜及脐血管，分离出华通氏胶，使用含有1%青霉素‑链霉素的磷酸盐缓冲液PBS冲洗干净；步骤（2）：将华通氏胶基质在4℃无菌蒸馏水中浸泡过夜后，置于0.25% CHAPS、1M NaCl溶液中，37℃摇床孵育6h，PBS冲洗3次；步骤（3）：置于1KU/mL DNAse Ⅰ溶液中37℃摇床孵育6h，随后PBS冲洗3次；步骤（4）：最后，保存在含1%青霉素‑链霉素的4℃ PBS缓冲液中。通过本发明所制备的脱细胞华通氏胶细胞成分完全去除，同时完整保留了基质的三维结构，胶原蛋白、硫酸化糖胺聚糖也被很好的保留。
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