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公开(公告)号:CN114934137A
公开(公告)日:2022-08-23
申请号:CN202210646146.8
申请日:2022-06-08
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及动物病毒学技术领域,具体涉及一种可快速鉴别猪群腹泻症候群病原的iiPCR试剂盒及其使用方法,试剂盒包括iiPCR扩增液,所述iiPCR扩增液包括Taq DNA聚合酶、MMLV反转酶和引物探针组,所述引物探针组包括第一引物对及第一探针、第二引物对及第二探针、第三引物对及第三探针、第四引物对及第四探针。本发明针对临床中猪的肠道内容物、粪便、肛门拭子等样品,经核酸提取,可直接将RNA作为模板,即可完成iiPCR检测,特异性良好,且灵敏度与荧光定量PCR相当。
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公开(公告)号:CN113912681A
公开(公告)日:2022-01-11
申请号:CN202111277918.7
申请日:2021-10-30
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/01 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明提供了一种猪圆环病毒4型Cap蛋白检测优势肽段及其应用和试剂盒,所述猪圆环病毒4型Cap蛋白检测优势肽段是对圆环病毒4型Cap蛋白氨基酸序列进行分析,进一步与猪圆环病毒1‑3型Cap蛋白序列比对筛选,并通过猪圆环病毒4型阳性血清反应筛选得到,所述猪圆环病毒4型Cap蛋白检测优势肽段的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过兼顾特异性及反应灵敏度的筛选手段,得到的猪圆环病毒4型Cap蛋白检测优势肽段具有良好反应原性,可用于临床血清样品中PCV4的抗体检测,能够快速、特异、高通量、高灵敏度地用于PCV4血清学检测,能够实现猪场中PCV4的流行病学监测。
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公开(公告)号:CN114164300B
公开(公告)日:2023-10-31
申请号:CN202111556812.0
申请日:2021-12-18
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明提供了一种可快速鉴别ASFV基因I型与基因II型的iiPCR试剂盒及其使用方法,iiPCR试剂盒包括iiPCR扩增液、阳性对照和阴性对照,所述iiPCR扩增液包括引物探针组,所述引物探针组所述包括第一引物对、第一探针、第二引物对和第二探针。本发明针对临床中血清和全血样品,无需核酸提取,血清可直接作为iiPCR模板,全血样品仅需瞬时离心取上清作为模板,即可完成iiPCR检测,且不影响其特异性与敏感性。
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公开(公告)号:CN115838761A
公开(公告)日:2023-03-24
申请号:CN202210898603.2
申请日:2022-07-28
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N15/65 , C12N15/66 , C12Q1/66
Abstract: 本发明涉及病毒学技术领域,具体涉及一伪狂犬病毒IE180基因启动子活性报告质粒、检测试剂盒及其检测方法和应用,所述基因启动子活性报告质粒是通过PCR扩增得到伪狂犬病毒IE180基因启动子序列,并克隆至pGL3‑Basic载体构建而成,所述伪狂犬病毒IE180基因启动子活性报告质粒序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用萤火虫荧光素酶报告基因构建伪狂犬病毒IE180基因启动子活性报告质粒,通过双荧光素酶检测系统,检测IE180基因启动子活性;该检测方法可以用于筛选IE180基因转录因子。
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公开(公告)号:CN113176406B
公开(公告)日:2024-04-12
申请号:CN202110458511.8
申请日:2021-04-27
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K16/00 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明涉及PCV4cap单克隆抗体及其双单抗夹心ELISA检测试剂,具体公开了抗PCV4cap蛋白的单克隆抗体PCV4‑cap‑6D1,其重链可变区的氨基酸序列和其轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.1‑2所示。还公开了抗PCV4cap蛋白的单克隆抗体PCV4‑cap‑4B5,其重链可变区的氨基酸序列和其轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.3‑4所示。基于公开的单克隆抗体还进一步提供了双抗夹心ELISA检测方法试剂盒。本发明的双抗夹心ELISA检测方法具有快速、稳定、特异性强、灵敏度高的特点,无交叉反应,能够实现猪场中PCV4的流行病学检测。
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公开(公告)号:CN114058740B
公开(公告)日:2024-03-22
申请号:CN202111556818.8
申请日:2021-12-18
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明提供了一种可鉴别基因I型与基因II型非洲猪瘟病毒的荧光PCR扩增引物探针组及检测试剂盒,所述引物探针组包括第一引物对、第一探针、第二引物对和第二探针,所述第一引物对包括如SEQ ID NO.1所示的基因I型上游引物和如SEQ ID NO.2所示的基因I型下游引物,所述第一探针包括如SEQ ID NO.3所示的基因I型探针。本发明的引物探针组能够有效鉴别基因I型和II型两类非洲猪瘟病毒,其包括两对特异性最强、灵敏度最高的引物组合和两条探针。
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公开(公告)号:CN115011736A
公开(公告)日:2022-09-06
申请号:CN202210692876.1
申请日:2022-06-17
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及动物病毒学技术领域,具体涉及一种鉴别猪呼吸道疾病综合征原发性病原的iiPCR试剂盒及其使用方法,试剂盒包括针对这四种病原独立配置的iiPCR扩增液、阳性对照和阴性对照,所述iiPCR扩增液包括Premix缓冲液、Taq DNA聚合酶、MMLV反转酶和引物探针组等,所述引物探针组分别包括第一引物对和第一探针、第二引物对和第二探针、第三引物对和第三探针、第四引物对和第四探针。本发明针对临床中猪的淋巴结、肺脏、鼻拭子等样品,经核酸提取,可直接将DNA或者RNA作为模板,即可完成iiPCR检测。
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公开(公告)号:CN113293231A
公开(公告)日:2021-08-24
申请号:CN202110540563.X
申请日:2021-05-18
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明提供了一种鉴别不同基因型猪伪狂犬病毒的实时荧光PCR引物对和探针组及试剂盒、方法,所述引物对和探针组是基于猪伪狂犬病毒gC基因保守区域设计得到,所述引物对包括核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的下游引物,所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。本发明在PRV基因I型21个核苷酸缺失处设计实时荧光PCR探针,分别在上下游设计特异性引物,建立可鉴别PRV基因I型与基因II型的实时荧光PCR方法,具有灵敏度高、特异性好等技术优势。
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公开(公告)号:CN113912681B
公开(公告)日:2023-03-21
申请号:CN202111277918.7
申请日:2021-10-30
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/01 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明提供了一种猪圆环病毒4型Cap蛋白检测优势肽段及其应用和试剂盒,所述猪圆环病毒4型Cap蛋白检测优势肽段是对圆环病毒4型Cap蛋白氨基酸序列进行分析,进一步与猪圆环病毒1‑3型Cap蛋白序列比对筛选,并通过猪圆环病毒4型阳性血清反应筛选得到,所述猪圆环病毒4型Cap蛋白检测优势肽段的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过兼顾特异性及反应灵敏度的筛选手段,得到的猪圆环病毒4型Cap蛋白检测优势肽段具有良好反应原性,可用于临床血清样品中PCV4的抗体检测,能够快速、特异、高通量、高灵敏度地用于PCV4血清学检测,能够实现猪场中PCV4的流行病学监测。
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公开(公告)号:CN115725783A
公开(公告)日:2023-03-03
申请号:CN202210892957.6
申请日:2022-07-27
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及猪繁殖与呼吸综合征病毒检测技术领域,具体涉及一种鉴别NADC34PRRSV的TaqMan实时荧光PCR检测试剂盒及其使用方法,检测试剂盒包括PCR扩增液,所述PCR扩增液包括第一引物对和探针,所述第一引物对包括如SEQ ID NO.1所示的上游引物NADC34‑F、如SEQ ID NO.2所示的下游引物NADC34‑R,所述探针为如SEQ ID NO.3所示的NADC34‑P。本发明可有效诊断类NADC34PRRSV毒株,可有效避免临床中将类NADC34PRRSV误诊为类NADC30PRRSV,补充当前PRRSV分型检测的不足,可用于PRRSV的流行病学调查。
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