一种用于蛋白质组学分析的罗汉果叶片总蛋白质的提取方法

    公开(公告)号:CN104877004A

    公开(公告)日:2015-09-02

    申请号:CN201510210416.0

    申请日:2015-04-29

    Abstract: 本发明公开了一种用于蛋白质组学分析的罗汉果叶片总蛋白质的提取方法,包括:将预处理得到的罗汉果叶片粉末与第一蛋白质提取液混合,于-20℃中静置10-14h,4℃下离心30min,转速为12000r/min,取下层沉淀,得第一沉淀;所述第一蛋白质提取液的制备方法为:将丙酮与β-巯基乙醇按体积比10000∶5-10混合,加入三氯醋酸,混合,于-20℃保存备用,本发明方法总蛋白质提取效率高、省时,且蛋白质不易降解,解决传统的酚提取法提取植物叶片蛋白质产生时无法有效去除多酚类和盐类物质的问题,实现了罗汉果叶片总蛋白质的高效提取,获得的蛋白质纯度高,适宜应用于蛋白质组学分析。

    一种酶解蛋白质的方法

    公开(公告)号:CN104833738B

    公开(公告)日:2017-05-24

    申请号:CN201510226996.2

    申请日:2015-05-06

    Abstract: 本发明公开了一种酶解蛋白质的方法,将蛋白质加水搅拌均匀,放入电泳槽,在80‑120V电压下电泳,电泳结束后收集蛋白质溶液,使用含有三氟乙醇的酶解缓冲溶液溶解蛋白质,之后对蛋白质进行还原和烷基化处理,将处理后的蛋白质溶液调节pH至7.5‑8.5,然后加入占整个溶液体积90%‑98%的胰蛋白酶,酶解,得到多肽产物;其中,电泳槽中的工作电极为氧化还原酶和锌铝层状双氢氧化物修饰的电极。本发明得到适合液相色谱‑串联质谱分析肽段所用的酶解方法,为蛋白质组学分析提供稳定可靠的样品制备技术。

    一种酶解蛋白质的方法

    公开(公告)号:CN104833738A

    公开(公告)日:2015-08-12

    申请号:CN201510226996.2

    申请日:2015-05-06

    Abstract: 本发明公开了一种酶解蛋白质的方法,将蛋白质加水搅拌均匀,放入电泳槽,在80-120V电压下电泳,电泳结束后收集蛋白质溶液,使用含有三氟乙醇的酶解缓冲溶液溶解蛋白质,之后对蛋白质进行还原和烷基化处理,将处理后的蛋白质溶液调节pH至7.5-8.5,然后加入占整个溶液体积90%-98%的胰蛋白酶,酶解,得到多肽产物;其中,电泳槽中的工作电极为氧化还原酶和锌铝层状双氢氧化物修饰的电极。本发明得到适合液相色谱-串联质谱分析肽段所用的酶解方法,为蛋白质组学分析提供稳定可靠的样品制备技术。

Patent Agency Ranking