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公开(公告)号：CN118546962A
公开(公告)日：2024-08-27
申请号：CN202410615756.0
申请日：2024-05-17
申请人： 广州派真生物技术有限公司
IPC分类号： C12N15/64
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种基于引物连接的载体构建试剂盒及方法和应用。本发明基于引物连接的载体构建方法包括利用两对引物组进行聚合酶链式反应克隆载体骨架和插入片段，再通过DNA连接酶连接所述载体骨架和插入片段，即成；所述引物组中的每组引物序列，其上、下游引物分别与接口位点的所述载体骨架序列和所述插入片段序列互补。本发明的方法所得载体克隆阳性率高，构建的过程上更加简便，可在任意的位点间插入所需的核酸片段。本发明开拓了载体克隆的新方法，对于分子克隆领域具有重要的里程碑意义。
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公开(公告)号：CN118480099A
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202410438649.5
申请日：2023-09-20
申请人： 广州派真生物技术有限公司
IPC分类号： C07K14/015 , C12N15/35 , C12N7/01 , C12N15/864 , C12N15/66 , C40B40/02 , A61K48/00 , A61P35/00 , C12R1/93
摘要： 本发明属于生物医药技术领域，公开了一种腺相关病毒突变体及其应用。本发明AAV6衣壳蛋白突变体的氨基酸序列如SEQ ID No.26所示。本发明的AAV6衣壳蛋白突变体无需整合基因组，所构建得到的重组腺相关病毒特异性地感染激活的T细胞，可实现快速感染和回输，减少不必要的质检和体外停留时间。本发明高产AAV6衣壳蛋白突变体病毒库的制备方法，使用基于AAV2的Rep‑Cap失活突变载体，而非基于AAV6的Rep‑Cap失活突变载体进行病毒包装，产量达到超10倍提升，并且具有各突变体丰度高、均一度好的优点。
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公开(公告)号：CN118324853A
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202410399924.7
申请日：2024-04-03
申请人： 广州派真生物技术有限公司
IPC分类号： C07K7/06 , C07K14/015 , C12N15/35 , C12N7/01 , C12N15/864 , C12N15/66 , A61K48/00 , A61P25/00 , C12R1/93
摘要： 本发明属于生物医药技术领域，公开了一种腺相关病毒突变体及其应用。本发明开创性的通过体外使用类脑芯片的方法模拟体内血脑屏障，高效的筛选了具有穿透血脑屏障，且能感染神经细胞的腺相关病毒突变体。本发明AAV衣壳蛋白突变体的氨基酸序列如SEQ ID No.3或4所示。本发明还提供了一种包括所述的AAV衣壳蛋白突变体的重组腺相关病毒。本发明的AAV衣壳蛋白突变体构建得到的重组腺相关病毒载体穿透血脑屏障的效率高，感染效果好，为广大疾病患者提供更好的神经系统类疾病的基因治疗载体工具，具有巨大的临床价值和商业应用场景。
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公开(公告)号：CN116789738B
公开(公告)日：2023-12-19
申请号：CN202310689755.6
申请日：2022-12-08
申请人： 广州派真生物技术有限公司
IPC分类号： C07K7/06 , C07K14/015 , C07K19/00 , C12N15/864 , A61K48/00 , A61P35/00
摘要： 本发明属于生物医药技术领域，公开了一种具有静息或激活T细胞靶向性的腺相关病毒突变体及其应用。本发明靶向静息或激活T细胞的效率高，具有剂量低、感染力强、安全性好的优点。本发明筛选所得的AAV衣壳蛋白突变体无需整合基因组，构建得到的重组腺相关病毒感染激活的T细胞可实现快速感染和回输，减少不必要的质检和体外停留时间；感染刺激因子刺激后的T细胞也具有非常优异的表现。使用本发明筛选所得的AAV衣壳蛋白突变体感染静息或激活T细胞具有巨大的临床价值和商业应用场景。
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公开(公告)号：CN115948514B
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202211409000.8
申请日：2022-11-10
申请人： 广州派真生物技术有限公司
IPC分类号： C12Q1/6844 , C12P19/34 , C12N15/864 , C12N7/01 , C12R1/93
摘要： 本发明涉及生物技术领域，尤其是涉及一种线性双链DNA的体外扩增方法。所述方法包括以下步骤：(1)以DNA模板为模板，在至少一组引物存在下，进行PCR扩增；(2)将PCR扩增所得产物依次进行酶切和自连，获得包含至少一段腺相关病毒载体靶序列的环状双链DNA模板；(3)将步骤(2)所得的环状双链DNA模板在至少一组引物、至少一种DNA聚合酶存在的条件下扩增，将扩增所得产物切割，获得线性双链DNA。该方法与传统生产质粒的方法相比，不需要细菌发酵，DNA纯化中不含有细菌内毒素，不含有质粒复制相关的DNA序列，不含有原核抗性基因的DNA序列，能够快速扩增大量的线性双链DNA，并同时降低产品纯化的成本。
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公开(公告)号：CN118480101A
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202410438661.6
申请日：2023-09-20
申请人： 广州派真生物技术有限公司
IPC分类号： C07K14/015 , C12N15/35 , C12N7/01 , C12N15/864 , C12N15/66 , C40B40/02 , A61K48/00 , A61P35/00 , C12R1/93
摘要： 本发明属于生物医药技术领域，公开了一种腺相关病毒突变体及其应用。本发明AAV6衣壳蛋白突变体的氨基酸序列如SEQ ID No.32所示。本发明的AAV6衣壳蛋白突变体无需整合基因组，所构建得到的重组腺相关病毒特异性地感染激活的T细胞，可实现快速感染和回输，减少不必要的质检和体外停留时间。本发明高产AAV6衣壳蛋白突变体病毒库的制备方法，使用基于AAV2的Rep‑Cap失活突变载体，而非基于AAV6的Rep‑Cap失活突变载体进行病毒包装，产量达到超10倍提升，并且具有各突变体丰度高、均一度好的优点。
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公开(公告)号：CN118480098A
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202410438648.0
申请日：2023-09-20
申请人： 广州派真生物技术有限公司
IPC分类号： C07K14/015 , C12N15/35 , C12N7/01 , C12N15/864 , C12N15/66 , C40B40/02 , A61K48/00 , A61P35/00 , C12R1/93
摘要： 本发明属于生物医药技术领域，公开了一种腺相关病毒突变体及其应用。本发明AAV6衣壳蛋白突变体的氨基酸序列如SEQ ID No.25所示。本发明的AAV6衣壳蛋白突变体无需整合基因组，所构建得到的重组腺相关病毒特异性地感染激活的T细胞，可实现快速感染和回输，减少不必要的质检和体外停留时间。本发明高产AAV6衣壳蛋白突变体病毒库的制备方法，使用基于AAV2的Rep‑Cap失活突变载体，而非基于AAV6的Rep‑Cap失活突变载体进行病毒包装，产量达到超10倍提升，并且具有各突变体丰度高、均一度好的优点。
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公开(公告)号：CN118480094A
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202410438643.8
申请日：2023-09-20
申请人： 广州派真生物技术有限公司
IPC分类号： C07K14/015 , C12N15/35 , C12N7/01 , C12N15/864 , C12N15/66 , C40B40/02 , A61K48/00 , A61P35/00 , C12R1/93
摘要： 本发明属于生物医药技术领域，公开了一种腺相关病毒突变体及其应用。本发明AAV6衣壳蛋白突变体的氨基酸序列如SEQ ID No.29所示。本发明的AAV6衣壳蛋白突变体无需整合基因组，所构建得到的重组腺相关病毒特异性地感染激活的T细胞，可实现快速感染和回输，减少不必要的质检和体外停留时间。本发明高产AAV6衣壳蛋白突变体病毒库的制备方法，使用基于AAV2的Rep‑Cap失活突变载体，而非基于AAV6的Rep‑Cap失活突变载体进行病毒包装，产量达到超10倍提升，并且具有各突变体丰度高、均一度好的优点。
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公开(公告)号：CN115838399B
公开(公告)日：2023-08-11
申请号：CN202211576110.3
申请日：2022-12-08
申请人： 广州派真生物技术有限公司
IPC分类号： C07K7/06 , C07K14/015 , C07K19/00 , C12N15/864 , A61K48/00 , A61P35/00
摘要： 本发明属于生物医药技术领域，公开了一种具有静息或激活T细胞靶向性的腺相关病毒突变体及其应用。本发明具有T细胞靶向性的异源肽的氨基酸序列为如SEQ ID No.1～5任一所示的序列。本发明靶向静息或激活T细胞的效率高，具有剂量低、感染力强、安全性好的优点。本发明筛选所得的AAV衣壳蛋白突变体无需整合基因组，构建得到的重组腺相关病毒感染激活的T细胞可实现快速感染和回输，减少不必要的质检和体外停留时间；感染刺激因子刺激后的T细胞也具有非常优异的表现。使用本发明筛选所得的AAV衣壳蛋白突变体感染静息或激活T细胞具有巨大的临床价值和商业应用场景。
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公开(公告)号：CN118480096A
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202410438645.7
申请日：2023-09-20
申请人： 广州派真生物技术有限公司
IPC分类号： C07K14/015 , C12N15/35 , C12N7/01 , C12N15/864 , C12N15/66 , C40B40/02 , A61K48/00 , A61P35/00 , C12R1/93
摘要： 本发明属于生物医药技术领域，公开了一种腺相关病毒突变体及其应用。本发明AAV6衣壳蛋白突变体的氨基酸序列如SEQ ID No.27所示。本发明的AAV6衣壳蛋白突变体无需整合基因组，所构建得到的重组腺相关病毒特异性地感染激活的T细胞，可实现快速感染和回输，减少不必要的质检和体外停留时间。本发明高产AAV6衣壳蛋白突变体病毒库的制备方法，使用基于AAV2的Rep‑Cap失活突变载体，而非基于AAV6的Rep‑Cap失活突变载体进行病毒包装，产量达到超10倍提升，并且具有各突变体丰度高、均一度好的优点。
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