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公开(公告)号：CN116121287B
公开(公告)日：2023-11-03
申请号：CN202310304626.0
申请日：2023-03-27
Applicant: 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明公开了一种检测水体铜离子浓度水平的荧光报告质粒载体及其应用。本发明所提供的质粒pBCOPgfp，携带了恶臭假单胞菌的copAB1启动子和绿色荧光蛋白基因(gfp)，copAB1启动子控制gfp的转录，质粒上还携带了恶臭假单胞菌的双组分系统copRS1。当无Cu2+时，copAB1启动子处于沉默状态，当Cu2+存在时，CopRS1可激活copAB1启动子，启动gfp转录，gfp的表达效率在一定范围内随着Cu2+浓度的提高而提高。以恶臭假单胞菌为宿主菌时，菌株培养物与水体样品混合孵育后，可通过检测GFP的荧光强度鉴定水体样品中的Cu2+浓度水平。
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公开(公告)号：CN114836455A
公开(公告)日：2022-08-02
申请号：CN202210589981.2
申请日：2022-05-26
Applicant: 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明公开了一种含rfp报告基因的细菌基因敲除质粒及其应用，属于分子生物学领域。具体地，本发明提供一种质粒pBRR50，其含有庆大霉素抗性基因、mob接合转移元件、R6K复制起始位点、多克隆位点区和由点突变lac启动子控制的红色荧光蛋白编码基因rfp；所述lac启动子的碱基序列优选如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供了上述质粒pBRR50的构建方法及应用，该质粒能高效表达红色荧光蛋白，使细菌在日光下呈现明显的红色。在基因敲除过程中，发生第一次同源重组的细菌具有庆大霉素抗性和红色菌落表型，发生第二次同源重组的细菌从红色恢复为原来的颜色，可根据菌落颜色对发生第二次同源重组的菌株实现直接的筛选。
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公开(公告)号：CN118562697A
公开(公告)日：2024-08-30
申请号：CN202410731291.5
申请日：2024-06-06
Applicant: 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明公开了一种产吲哚‑3‑乙酸的恶臭假单胞菌工程菌株及其构建方法与应用。本发明恶臭假单胞菌工程菌株包含经过密码子优化的色氨酸单加氧酶基因iaaM和吲哚乙酰胺水解酶基因iaaH，所述iaaM和iaaH由tac启动子控制表达，并通过同源交换以替换基因PP_2552的方式整合到基因组中，能够在所述恶臭假单胞菌中稳定遗传并表达有活性的色氨酸单加氧酶和吲哚乙酰胺水解酶。本发明所述恶臭假单胞菌工程菌株能够高效将色氨酸转化为吲哚‑3‑乙酸，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN116376956A
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202310311537.9
申请日：2023-03-27
Applicant: 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明公开了一种检测水体镉离子浓度水平的荧光报告质粒载体及其应用。本发明所提供的质粒pBCCRgfp，以pBBR1MCS‑5为基本骨架，连入了源于恶臭假单胞菌的czcR3启动子和绿色荧光蛋白基因(gfp)，czcR3启动子控制gfp的转录，质粒上还连入了源于恶臭假单胞菌的调控基因cadR，当Cd2+存在时，CadR激活czcR3启动子，启动gfp转录。以恶臭假单胞菌为宿主菌时，菌株培养物与水体样品混合孵育后，可通过检测GFP的荧光强度鉴定水体样品中的Cd2+浓度水平，且具有较高的灵敏度。
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公开(公告)号：CN116121288A
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202310304642.X
申请日：2023-03-27
Applicant: 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明公开了一组克隆恶臭假单胞菌大片段DNA的载体及其应用。所述的质粒组合包含两个质粒pBCPP51和pBCPP52，序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，能够有效地克隆细菌基因组中的特定的DNA区域，适用于10kb以上难以用PCR方法扩增的大片段。通过同源重组的方法，依次将携带同源臂的两个质粒插入到基因组中待克隆大片段的上游和下游，提取基因组并选用合适的限制性核酸内切酶进行单酶切，再将片段进行自连环化，得到包含待克隆片段的质粒，完成克隆后所得到质粒可在大肠杆菌和恶臭假单胞菌中复制。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115895988B
公开(公告)日：2025-05-02
申请号：CN202210939697.3
申请日：2022-08-05
Applicant: 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明公开了恶臭假单胞菌PP_3142基因敲除突变株及其应用。该突变株为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)ΔPP3142，是将恶臭假单胞菌KT2440的糖转移酶基因PP_3142的第72bp到第1190bp区域进行无痕敲除后获得的，所述的PP_3142基因的核苷酸序列如SEQID NO.1所示。本发明所述的突变株ΔPP3142在液面形成生物膜形成能力显著削弱，但在固体表面的粘附与生物膜形成能力与野生型菌株KT2440无明显差异，可应用于水体环境治理和修复等场景。
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公开(公告)号：CN118090575A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410332901.4
申请日：2024-03-22
Applicant: 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明公开了一种研究细菌对金属材料腐蚀机理的方法，该方法将细菌对金属材料的腐蚀机理按照接触式与非接触式进行分别研究，通过该方法可以明确细菌的腐蚀机理是：1)代谢产物腐蚀；2)电子获取式腐蚀，或是3)破坏腐蚀产物保护层式腐蚀。这种研究方法在实施过程中简单可行。通过该方法可以直观的将复杂交错的腐蚀过程分别进行展现，使得腐蚀机理更具体的得到体现和验证。是结合材料学、微生物学和腐蚀电化学得出的，将微生物腐蚀研究理论进行实践应用的代表。
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公开(公告)号：CN118562698A
公开(公告)日：2024-08-30
申请号：CN202410731293.4
申请日：2024-06-06
Applicant: 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明公开了一种产吲哚‑3‑乙酸的基因工程恶臭假单胞菌及其构建方法。本发明将色氨酸单加氧酶基因iaaM和吲哚乙酰胺水解酶基因iaaH与cfcR基因启动子连接，使iaaM和iaaH可在菌株的生长对数后期和稳定期高效表达，并通过同源交换将上述基因模块以替换基因quiC的方式整合到恶臭假单胞菌的基因组中。所述基因工程恶臭假单胞菌可表达具有活性的色氨酸单加氧酶和吲哚乙酰胺水解酶，能够高效利用色氨酸为底物合成吲哚‑3‑乙酸。
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公开(公告)号：CN114836455B
公开(公告)日：2024-08-16
申请号：CN202210589981.2
申请日：2022-05-26
Applicant: 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明公开了一种含rfp报告基因的细菌基因敲除质粒及其应用，属于分子生物学领域。具体地，本发明提供一种质粒pBRR50，其含有庆大霉素抗性基因、mob接合转移元件、R6K复制起始位点、多克隆位点区和由点突变lac启动子控制的红色荧光蛋白编码基因rfp；所述lac启动子的碱基序列优选如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供了上述质粒pBRR50的构建方法及应用，该质粒能高效表达红色荧光蛋白，使细菌在日光下呈现明显的红色。在基因敲除过程中，发生第一次同源重组的细菌具有庆大霉素抗性和红色菌落表型，发生第二次同源重组的细菌从红色恢复为原来的颜色，可根据菌落颜色对发生第二次同源重组的菌株实现直接的筛选。
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公开(公告)号：CN116121288B
公开(公告)日：2023-09-01
申请号：CN202310304642.X
申请日：2023-03-27
Applicant: 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
Abstract: 本发明公开了一组克隆恶臭假单胞菌大片段DNA的载体及其应用。所述的质粒组合包含两个质粒pBCPP51和pBCPP52，序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，能够有效地克隆细菌基因组中的特定的DNA区域，适用于10kb以上难以用PCR方法扩增的大片段。通过同源重组的方法，依次将携带同源臂的两个质粒插入到基因组中待克隆大片段的上游和下游，提取基因组并选用合适的限制性核酸内切酶进行单酶切，再将片段进行自连环化，得到包含待克隆片段的质粒，完成克隆后所得到质粒可在大肠杆菌和恶臭假单胞菌中复制。
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