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公开(公告)号：CN113686934A
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN202110932715.0
申请日：2021-08-13
Applicant: 广东海洋大学 , 广东海洋大学深圳研究院
IPC: G01N27/30 , G01N27/327 , G01N27/48
Abstract: 本发明公开了一种CRISPR/Cas12a‑RCA电化学传感器检测体系及其应用。本发明所述CRISPR/Cas12a‑RCA电化学传感器检测体系可用于大肠杆菌O157:H7的检测，操作简单，成本低廉，可以从不同的菌中准确区分出大肠杆菌O157:H7，检测特异性强；其检测浓度范围也广，在10～107CFU·mL‑1范围内具有良好的线性关系，且检测灵敏度高，最低检测限为10CFU·mL‑1，检测结果准确可靠。本发明所述检测方法不仅适用于食品中大肠杆菌O157:H7的检测，在其他病原菌或临床诊断的检测中同样具有巨大应用潜力。
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公开(公告)号：CN113686934B
公开(公告)日：2024-08-16
申请号：CN202110932715.0
申请日：2021-08-13
Applicant: 广东海洋大学 , 广东海洋大学深圳研究院
IPC: G01N27/30 , G01N27/327 , G01N27/48
Abstract: 本发明公开了一种CRISPR/Cas12a‑RCA电化学传感器检测体系及其应用。本发明所述CRISPR/Cas12a‑RCA电化学传感器检测体系可用于大肠杆菌O157:H7的检测，操作简单，成本低廉，可以从不同的菌中准确区分出大肠杆菌O157:H7，检测特异性强；其检测浓度范围也广，在10～107CFU·mL‑1范围内具有良好的线性关系，且检测灵敏度高，最低检测限为10CFU·mL‑1，检测结果准确可靠。本发明所述检测方法不仅适用于食品中大肠杆菌O157:H7的检测，在其他病原菌或临床诊断的检测中同样具有巨大应用潜力。
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公开(公告)号：CN113670907B
公开(公告)日：2023-06-09
申请号：CN202110932714.6
申请日：2021-08-13
Applicant: 广东海洋大学 , 广东海洋大学深圳研究院
IPC: G01N21/78
Abstract: 本发明公开了一种CGC杂化纳米复合物及其制备方法和应用，所述CGC杂化纳米复合物即Con A‑GOx‑Ca2(PO4)3。在此复合物的基础上，本发明设计了一种大肠杆菌O157:H7的杂化纳米复合物比色检测体系及方法，实现了大肠杆菌O157:H7的可视化检测，且操作简便，检测特异性强，灵敏度高，其最低检测限为10CFU·mL‑1。在实际样品的检测中，所述检测方法的检测回收率也在93～102％之间，具有较高的准确性，不仅适于大肠杆菌O157:H7的现场快速检测，在其他病原菌或临床诊断的检测中也具有巨大应用潜力。
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公开(公告)号：CN113670907A
公开(公告)日：2021-11-19
申请号：CN202110932714.6
申请日：2021-08-13
Applicant: 广东海洋大学 , 广东海洋大学深圳研究院
IPC: G01N21/78
Abstract: 本发明公开了一种CGC杂化纳米复合物及其制备方法和应用，所述CGC杂化纳米复合物即Con A‑GOx‑Ca2(PO4)3。在此复合物的基础上，本发明设计了一种大肠杆菌O157:H7的杂化纳米复合物比色检测体系及方法，实现了大肠杆菌O157:H7的可视化检测，且操作简便，检测特异性强，灵敏度高，其最低检测限为10CFU·mL‑1。在实际样品的检测中，所述检测方法的检测回收率也在93～102％之间，具有较高的准确性，不仅适于大肠杆菌O157:H7的现场快速检测，在其他病原菌或临床诊断的检测中也具有巨大应用潜力。
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公开(公告)号：CN116144691A
公开(公告)日：2023-05-23
申请号：CN202211450582.4
申请日：2022-11-18
Applicant: 广东海洋大学
Abstract: 本发明公开了一种H9N2禽流感HA1蛋白重组乳酸乳球菌载体的构建方法，其技术方案包括下述步骤：1)目的基因片段合成及酶切鉴定；2)目的基因与表达载体pNZ8149酶切与连接；3)乳酸乳球菌感受态的制备；4)重组乳酸乳球菌的电转化；5)重组乳酸乳球菌NZ3900/pNZ8149‑HA1质粒的提取及鉴定；6)重组乳酸乳球菌NZ3900/pNZ8149‑HA1诱导表达条件优化及Western blot鉴定目的蛋白诱导表达；本申请提供的技术方案通过构建H9N2禽流感HA1蛋白重组乳酸乳球菌载体，使H9N2禽流感的HA1蛋白可以表达在乳酸乳球菌外表面，为后续研制重组乳酸菌口服疫苗奠定基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109053520B
公开(公告)日：2020-09-01
申请号：CN201811096521.6
申请日：2018-09-19
Applicant: 广东海洋大学
IPC: C07C403/24
Abstract: 本发明公开了一种胶红酵母中虾青素提取及分离纯化的方法。该方法包括以下步骤：S1.采用酸热法将胶红酵母干菌体细胞破壁后，离心，弃上清液，洗涤，加入浸提液，于45～55℃提取2～4次，得到虾青素粗提液；S2.向虾青素粗提液中加入KOH醇溶液，在4～50℃黑暗条件下皂化20 min～7 h后，得到皂化后的虾青素提取液；S3.将虾青素提取液上样至硅胶柱层析中，以流动相进行梯度洗脱，分离得到虾青素成品。本发明通过对破壁方法、浸提溶剂、皂化方法及提取条件改进，获得的虾青素得率高、纯度高，而且在提高分离速度的同时，有利于减少虾青素在破壁和皂化过程中的破坏，生理活性好，可实现工业化生产。
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公开(公告)号：CN115896151B
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202211454098.9
申请日：2022-11-18
Applicant: 广东海洋大学
Abstract: 本发明公开了一种食品级重组鸭坦布苏病毒截短E基因乳酸乳球菌载体的构建方法及应用；其技术方案是先将E基因进行乳酸菌密码子优化后合成，然后设计引物扩增E基因的domainI‑domainII区片段，将该片段作为目的基因与质粒pNZ8149同源重组构建重组质粒，电转化至NZ3900感受态细菌，挑取阳性克隆菌株并培养，提取阳性质粒进行PCR鉴定及测序分析，获得重组载体；再使用诱导剂诱导表达目的蛋白，检测重组蛋白；优化蛋白表达最佳诱导表达条件后，得到的目的蛋白在胞内以可溶性蛋白和包涵体蛋白表达；其在实际中生产安全性高、成本低、免疫过程不产生应激、可大规模应用于家鸭养殖的抗鸭坦布苏病毒的乳酸菌活载体疫苗。
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公开(公告)号：CN118731347A
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202410788095.1
申请日：2024-06-18
Applicant: 广东海洋大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/58 , G01N33/533 , C07K16/10 , C12N5/20 , C12N15/64 , C12N15/70 , C12N15/44 , C07K14/11 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种基于HA1蛋白单克隆抗体的荧光微球检测卡，旨在提供一种操作方法简便、结果快速，灵敏度和特异性高，检测结果可靠的快速检测H9N2亚型禽流感检测试剂卡；其技术方案包括，包括样本垫、结合垫、NC膜、吸水垫及PCV底板；所述样本垫、结合垫、NC膜和吸水垫按样品层析方向依次设置于PCV底板上；所述NC膜上设有检测T线和质控C线，所述检测线靠近所述结合垫，所述质控线靠近吸水垫，所述结合垫上负载有荧光微球标记的HA1蛋白单克隆抗体1A3；所述的检测T线上包被有荧光微球标记的HA1蛋白单克隆抗体2E9，所述质控线包被有荧光微球标记的羊抗鼠IgG抗体；属于生物检测技术领域。
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公开(公告)号：CN115896151A
公开(公告)日：2023-04-04
申请号：CN202211454098.9
申请日：2022-11-18
Applicant: 广东海洋大学
Abstract: 本发明公开了一种食品级重组鸭坦布苏病毒截短E基因乳酸乳球菌载体的构建方法及应用；其技术方案是先将E基因进行乳酸菌密码子优化后合成，然后设计引物扩增E基因的domainI‑domainII区片段，将该片段作为目的基因与质粒pNZ8149同源重组构建重组质粒，电转化至NZ3900感受态细菌，挑取阳性克隆菌株并培养，提取阳性质粒进行PCR鉴定及测序分析，获得重组载体；再使用诱导剂诱导表达目的蛋白，检测重组蛋白；优化蛋白表达最佳诱导表达条件后，得到的目的蛋白在胞内以可溶性蛋白和包涵体蛋白表达；其在实际中生产安全性高、成本低、免疫过程不产生应激、可大规模应用于家鸭养殖的抗鸭坦布苏病毒的乳酸菌活载体疫苗。
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公开(公告)号：CN109053520A
公开(公告)日：2018-12-21
申请号：CN201811096521.6
申请日：2018-09-19
Applicant: 广东海洋大学
IPC: C07C403/24
Abstract: 本发明公开了一种胶红酵母中虾青素提取及分离纯化的方法。该方法包括以下步骤：S1.采用酸热法将胶红酵母干菌体细胞破壁后，离心，弃上清液，洗涤，加入浸提液，于45～55℃提取2～4次，得到虾青素粗提液；S2.向虾青素粗提液中加入KOH醇溶液，在4～50℃黑暗条件下皂化20 min～7 h后，得到皂化后的虾青素提取液；S3.将虾青素提取液上样至硅胶柱层析中，以流动相进行梯度洗脱，分离得到虾青素成品。本发明通过对破壁方法、浸提溶剂、皂化方法及提取条件改进，获得的虾青素得率高、纯度高，而且在提高分离速度的同时，有利于减少虾青素在破壁和皂化过程中的破坏，生理活性好，可实现工业化生产。
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