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公开(公告)号:CN115851618B
公开(公告)日:2025-05-02
申请号:CN202211423222.5
申请日:2022-11-15
Applicant: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N7/00 , C12N7/02 , C12Q1/6876 , G01N33/68 , A61K45/00 , A61K31/395 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于分子生物学和兽医药领域,提供了HSP90及其抑制剂在调控塞尼卡病毒复制中的应用。HSP90抑制剂可用于制备抑制塞尼卡病毒药剂,HSP90及其编码基因可用于筛选治疗或预防塞尼卡病毒药剂。本发明提供的HSP90及其抑制剂能够调控塞尼卡病毒的复制过程,对塞尼卡病毒的致病机理、疫苗研发具有重要意义。
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公开(公告)号:CN115927210B
公开(公告)日:2025-04-18
申请号:CN202211422548.6
申请日:2022-11-15
Applicant: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明属于分子生物学和兽医药领域,提供了HSP70及其抑制剂在调控塞尼卡病毒复制中的应用。HSP70抑制剂可用于制备抑制塞尼卡病毒药剂,HSP70及其编码基因可用于筛选治疗或预防塞尼卡病毒药剂。本发明提供的HSP70及其抑制剂能够调控塞尼卡病毒的复制过程,对塞尼卡病毒的致病机理、疫苗研发具有重要意义。
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公开(公告)号:CN116162599B
公开(公告)日:2025-02-18
申请号:CN202211454525.3
申请日:2022-11-21
Applicant: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域,提供了GSK3β在增强塞内卡病毒复制用于制备疫苗中的用途。还提供了一种提高疫苗制备用宿主细胞塞内卡病毒滴度的方法:(1)构建过表达GSK3β的宿主细胞;(2)培养过表达GSK3β的宿主细胞并接种塞内卡病毒。本发明利用分子生物学技术成功构建了GSK3β的表达载体pCMVMyc‑GSK3β;并构建了GSK3β基因过表达的BHK‑21细胞系;该细胞系在接种塞内卡病毒后,病毒复制速率加快,病毒滴度显著提高,可用于塞内卡疫苗的商业化生产。
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公开(公告)号:CN118345097A
公开(公告)日:2024-07-16
申请号:CN202410504312.X
申请日:2024-04-24
Applicant: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/40 , A61K39/12 , A61K39/125 , A61P31/20 , A61P31/14 , C12N15/34 , C12N15/866 , C12N5/10 , C07K14/08 , C07K14/01
Abstract: 本发明属于兽药生产技术领域,提供了一种PCV2‑SVA二联苗。该疫苗以去除核定位信号的PCV2 Cap蛋白和SVA VP2蛋白为抗原。本发明通过杆状系统高效表达了可溶性PCV2 Cap蛋白和SVA VP2蛋白。由于免疫协同作用,相较于商品化疫苗或灭活疫苗,以重组蛋白为基础制备的PCV2‑SVA二联疫苗能刺激产生更高水平的体液免疫和细胞免疫。免疫后的攻毒保护试验表明,二联疫苗能有效降低病毒血症及脏器中的病毒含量。基于本发明开发的抗PCV2和SVA的二联基因工程疫苗具有商业开发前景。
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公开(公告)号:CN118240030A
公开(公告)日:2024-06-25
申请号:CN202410404838.0
申请日:2024-04-07
Applicant: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明属于兽医药技术领域,提供了一种偶联COS的PCV2d型PCV2亚单位疫苗。该疫苗的抗原为COS偶联PCV2d Cap蛋白,通过巯基化Cap蛋白和马来酰亚胺化COS反应获得。该COS偶联PCV2d Cap蛋白,相比未偶联的蛋白,其二级结构中α‑螺旋、反平行式β‑折叠、平行式β‑折叠以及β‑转角比例均有不同程度提升,而无规则卷曲存在大比例减少;提高了热稳定性、结构稳定性,同时提升了抗原表位展示水平。该偶联蛋白制备的亚单位疫苗,更高效地刺激免疫系统产生强烈且持久的免疫反应,具有商业化前景。
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公开(公告)号:CN114262717B
公开(公告)日:2023-11-17
申请号:CN202111596344.X
申请日:2021-12-24
Applicant: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/85 , C12Q1/6851 , C12Q1/6888 , A61K31/7088 , A61K45/00 , A61P31/20
Abstract: 本发明提供了一种调控PCV2在宿主中复制的方法及应用。通过METTL14基因、FTO基因和miR30a‑5p可以调控PCV2病毒在宿主中的复制。METTL14可引起m6A甲基化水平升高促进PCV2病毒的复制,FTO能够使甲基化总体水平降低抑制PCV2病毒的复制,miR‑30a‑5p可以促进PCV2病毒的复制。本发明为利用宿主蛋白提高自身免疫力抵抗病毒感染,寻找病毒通用治疗靶点提供重要的依据。
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公开(公告)号:CN113862226B
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202111169658.1
申请日:2021-10-08
Applicant: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明属于分子生物学与细胞生物学领域,提供了一种Dicer基因敲除的BHK‑21细胞系,其保藏编号为CCTCC NO:C2021232。上述Dicer基因敲除的BHK‑21细胞系可用于塞尼卡增殖和塞尼卡疫苗的生产。本发明利用CRISPR/Cas9技术成功构建了Dicer基因敲除的BHK‑21细胞系;该细胞系中塞尼卡病毒复制速率加快,病毒滴度显著提高,可用于塞尼卡疫苗的商业化生产。
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公开(公告)号:CN113604440B
公开(公告)日:2023-04-07
申请号:CN202111027090.X
申请日:2021-09-02
Applicant: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C12N15/113 , C12N15/85 , C12N7/00 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于分子生物学与细胞生物学领域,提供了一种Ago2基因敲除的BHK‑21细胞系,其保藏编号为CCTCC NO:C2021206。上述Ago2基因敲除的BHK‑21细胞系可用于塞尼卡增殖和塞尼卡疫苗的生产。本发明利用CRISPR/Cas9技术成功构建了Ago2基因敲除的BHK‑21细胞系;该细胞系中塞尼卡病毒复制速率加快,病毒滴度显著提高,且对细胞生长速率无显著影响,可用于塞尼卡疫苗的商业化生产。
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公开(公告)号:CN110055251B
公开(公告)日:2022-05-27
申请号:CN201910336909.7
申请日:2019-04-25
Applicant: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/90 , A61P31/20
Abstract: 本发明提供了一种调控PCV2病毒增殖的gRNAs序列。本发明设计了与PCV2复制相关的8个gRNA靶向片段:gRNA‑Oc8,gRNA‑O13,gRNA‑O134,gRNA‑O26,gRNA‑NPS,gRNA‑NQT和gRNA‑NAT,分别靶向PCV2复制起点的八聚体结构、ORF1和ORF3的重叠区、ORF1,ORF3和ORF4的重叠区、ORF2和ORF6的重叠区、ORF1的23‑25aa糖基化位点、ORF1的256‑258aa糖基化位点及ORF1的286‑288aa糖基化位点。以pX458为表达载体,获得PCV2 Cas9/gRNAs重组质粒,并对阳性Cas9/gRNAs克隆进行了测序鉴定。同时,成功得到以PCV2 Cas9/gRNAs重组质粒转染的PK‑15细胞系,且PCV2 Cas9/gRNAs重组质粒能对PCV2基因组进行有效编辑,并抑制PCV2在PK‑15细胞内的增殖复制。
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公开(公告)号:CN111560386A
公开(公告)日:2020-08-21
申请号:CN202010174682.3
申请日:2020-03-13
Applicant: 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及生物技术中蛋白表达技术领域,特别涉及一种可溶性猪圆环病毒2型Cap蛋白。该可溶性猪圆环病毒2型Cap蛋白制成的铝胶佐剂疫苗比油佐剂疫苗安全效果好,免疫后猪体吸收快,应激小,比201佐剂免疫保护率高。
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