公开(公告)号：CN117007813A

公开(公告)日：2023-11-07

申请号：CN202310817425.0

申请日：2023-07-05

Applicant: 山东农业大学

Inventor： 朱桂玉 ,  马玉晓 ,  王恒 ,  王续钊 ,  薛曼 ,  魏佳慧 ,  郭晓彤 ,  孟璐

IPC: G01N33/68 ,  G01N21/64 ,  C12Q1/6888 ,  C12N5/0735 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明公开了FOXO3基因及其靶向抑制剂在鸡原始生殖细胞增殖及迁移定植中的应用，属于生物技术领域。本发明深入研究了靶向下调FOXO3基因表达对鸡原始生殖细胞增殖和体内迁移效率的影响。结果表明，在现有的培养鸡原始生殖细胞培养液基础上添加1μM的FOXO3的抑制剂Carbenoxolone(CBX)可显著促进鸡原始生殖细胞的体外增殖。经验证，干扰FOXO3基因表达也会显著促进鸡原始生殖细胞增殖。另外，经1μM抑制剂CBX处理后的原始生殖细胞，注射入鸡胚体内，迁移定植性腺能力出现了显著升高。本发明能有效地促进体外鸡原始生殖细胞的增殖能力,基础培养液中添加适宜浓度CBX对鸡原始生殖细胞可显著提高迁移定植到性腺的能力，且能很好的维持其生物学特性。

公开(公告)号：CN116555170A

公开(公告)日：2023-08-08

申请号：CN202211100109.3

申请日：2022-09-09

Applicant: 山东农业大学

Inventor： 朱桂玉 ,  孟璐 ,  马玉晓 ,  张允 ,  王续钊 ,  姜运良 ,  李显耀 ,  王恒

IPC: C12N5/075

Abstract: 本发明公开了一种成年鸡卵原干细胞的体外分离培养方法及其应用，属于干细胞培养技术领域。本发明的鸡卵原干细胞的体外分离培养方法包括以下步骤：将成年鸡卵巢的皮质部分破碎成组织团块，用包含双抗的PBS缓冲液漂洗，静置后得到下层的组织团；用胰酶消化处理组织团，用磁珠活化细胞分选缓冲液进行重悬，加入一抗，孵育10‑20min；然后再加入二抗磁珠，共孵育20‑30min；用磁珠活化细胞分选缓冲液进行洗脱，收集包含目的细胞的洗脱液；将包含目的细胞的洗脱液依次进行原代培养、传代培养。本发明开创性的从成年鸡卵巢中体外分离培养得到鸡卵原干细胞，能够为延长鸡的产蛋周期、提高鸡的繁殖性能提供新的思路的途径。